| 研究課題/領域番号 |
17380121
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(B)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
水産学一般
|
|---|
| 研究機関 | 独立行政法人国立環境研究所 |
|---|
研究代表者 |
堀口 敏宏 独立行政法人国立環境研究所, 環境リスク研究センター, 主席研究員 (30260186)
|
|---|
| 研究分担者 |
白石 寛明 独立行政法人国立環境研究所, 環境リスク研究センター, センター長 (10124348)
太田 康彦 国立大学法人鳥取大学, 農学部, 教授 (60069078)
西川 智浩 独立行政法人国立環境研究所, 環境リスク研究センター, 契約職員 (10391137)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
|
| 配分額 *注記 |
15,400千円 (直接経費: 15,400千円)
2006年度: 7,200千円 (直接経費: 7,200千円)
2005年度: 8,200千円 (直接経費: 8,200千円)
|
|---|
| キーワード | インポセックス / ペニス / 輸精管 / 細胞分化 / 細胞増殖 / レチノイドX受容体(RXR) / トリプチルスズ(TBT) / トリフェニルスズ(TPT) / トリブチルスズ(TBT) / 分化 / 成長 |
|---|
| 研究概要 |
1.イボニシのインポセックスは、まず右触角後部の表皮が隆起してペニスの分化が始まり、ほぼ同時期に表皮が陥入・結合して精管を形成する。次いで複数箇所から表皮が陥入して輸精管を形成し、ペニス様隆起の発達に伴ってペニス基部の輸精管が進入する。輸精管上皮細胞と周辺筋層の発達によりペニスが成長する。陰門付近で輸精管周辺組織が過形成すると陰門が閉塞し、交尾・産卵不能となり、卵嚢腺内に変質卵嚢塊が観察される。
2.9-cisレチノイン酸により濃度依存的にイボニシにインポセックスが誘導され、雌に形成されたペニスと輸精管が雄のものと組織学的に同等であることを認めた。免疫染色により、RXRタンパクのペニスや輸精管、頭部神経節の細泡への分布を認めた。
3.イボニシの雌雄とインポセックス症状の重篤な雌を用いてreal time RT-PCR法により組織別RXR遺伝子発現量を測定した結果、雄及びインポセックスの雌ではペニスでの発現量が他の組織より有意に高く(それぞれ、p<0.05及びp<0.01)、雌ではペニス形成部位の発現量に有意差がなかった。
4.トリフェニルスズに3日間曝露された正常な雌イボニシのペニス形成部位を用いてDifferential Display法により有機スズ応答遺伝子を解析した結果、有機スズによる誘導バンド8種と抑制バンド12種が検出された。ホモロジー検索の結果、これらと既知遺伝子との相同性は見出せなかった。
5.RXRと結合するDNA断片、調節領域をプローブにした標的遺伝子(一部)及び標的遺伝子の一部をプローブにした標的遺伝子全長のクローニングにより、12種のRXR結合性DNA断片が得られた。シークエンス解析の結果、4種に脊椎動物のRXR認識配列が見つかった。RXR認識配列が認められなかったクローンにもダイレクトリピートのハーフサイトであるAGGTCAが存在していた。
|
