| 研究課題/領域番号 |
17380197
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
応用分子細胞生物学
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
増田 税 北海道大学, 大学院・農学研究院, 教授 (60281854)
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| 研究分担者 |
阿部 純 北海道大学, 大学院・農学研究院, 教授 (00192998)
金澤 彰 (金澤 章) 北海道大学, 大学院・農学研究院, 准教授 (30281794)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
15,640千円 (直接経費: 14,500千円、間接経費: 1,140千円)
2007年度: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円)
2006年度: 3,800千円 (直接経費: 3,800千円)
2005年度: 6,900千円 (直接経費: 6,900千円)
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| キーワード | ウイルス / ダイズ / ベクター / 機能解析 / ウイルスベクター / ファンクショナルゲノミクス / ジーンサイレンシング / ファンクショナルゲノミックス |
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| 研究概要 |
ダイズに感染するキュウリモザイクウイルス(CMV-Sj)を改良してダイズ遺伝子の機能解析に使用できるウイルスベクターとして開発した。ダイズの形質転換は研究者の努力にもかかわらずいまだに多くの困難を抱えており、遺伝子の機能解析のためには標的遺伝子の発現を抑止する新技術の開発が必要であった。研究期間中に、我々はウイルスに標的遺伝子を組込んでダイズに感染させ、RNAサイレンシングを誘導する新技術(VIGS)を開発することに成功した。初年度はダイズの品種に対する病原性の異なる2つのCMV-Sj株(Sj-D, Sj-D)の感染性クローンを取得した。これらの分離株を利用してCMVのゲノムRNAを交換したシュードリコンビナントウイルスを作製し、様々な品種に感染させるシステムを構築した。CMVベクターによるダイズでのVIGSの有効性を実証するために、アントシアニン生合成系のキー酵素であるカルコンシンターゼ(CHS)遺伝子とケルセチンの蓄積に関与するF3'H遺伝子を標的にしてサイレンシングを誘導した。その結果、ダイズ種子の色はCHSのVIGSによって茶色から黄色に変化し、またダイズ中のケルセチンの蓄積量はF3'HのVIGSによる影響を受けて変化した。これらの研究成果から、CMVベクターがダイズ遺伝子のVIGS誘導に適しており、遺伝子の機能解析を推進する新手法として期待できると考えられる。
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