膜結合型増殖因子EGFファミリーのカルボキシ末端断片シグナリングの解析

• 研究課題/領域番号: 17390081
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 東山 繁樹 愛媛大学, 大学院医学系研究科, 教授 (60202272)
• 研究分担者: 檜枝 美紀 愛媛大学, 大学院医学系研究科, 講師 (00380254) ; 井上 博文 愛媛大学, 大学院医学系研究科, 講師 (70321635) ; 難波 大輔 愛媛大学, 医学部, 特任助手 (10380255)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 14,700千円 (直接経費: 14,700千円); 2006年度: 4,900千円 (直接経費: 4,900千円); 2005年度: 9,800千円 (直接経費: 9,800千円)
• キーワード: HB-EGF / CTF / PLZF / c-myc / bFGF / EGF / PDGF / 細胞周期進行 / EGF-ファミリー / Shedding / TGF-α / ampbiregulin / epiregulin / メタロプロテアーゼ / γ-セクレターゼ

研究概要

細胞増殖因子シグナルの下流に位置し、細胞分裂促進に必須の転写因子c-mycの遺伝子発現がPLZFにより抑制されることが報告されている。HB-EGF-CTFがPLZFの機能を解除することから、HB-EGF-CTFシグナルが増殖因子によるc-Myc遺伝子発現誘導シグナルの中間に位置するのではないかと考え、Hb-egf-/-繊維芽細胞を用いてbFGF, EGF, PDGFによるc-Myc遺伝子発現誘導を解析した。まず、野生型繊維芽細胞(Hb-egf+/+)でbFGF, EGF, PDGF刺激により内在性のHB-EGFのsheddingが誘導され、HB-EGF-CTFは核移行することを確認した。また、上記各増殖因子受容体からのシグナルはMAP kinase ERK1/2の活性化で見る限り、Hb-egf+/+およびHb-egf-/-繊維芽細胞で変化は無かった。次に、Hb-egf+/+および-/-繊維芽細胞を上記各増殖因子により刺激し、c-Myc遺伝子発現をRNA protection assayと定量PCRにより解析した。その結果細胞増殖因子シグナルにより誘導されるc-Myc遺伝子発現はHb-egf-/-繊維芽細胞では顕著に抑制されることが明らかとなった。また、Hb-egf-/-繊維芽細胞では、Hb-egf+/+繊維芽細胞に比べて、EGFとbFGF増殖因子による細胞周期S期への進行が有意に抑制されることが明らかとなった。一方PDGFによる繊維芽細胞の増殖促進には有意さを持った細胞周期S期進行の遅延は認められなかった。さらに、Hb-egf-/-繊維芽細胞にHb-egf遺伝子を導入し発現を回復させることで上記各増殖因子によるc-Myc遺伝子発現ならびに細胞周期S期進行への遅延が回復することを示した。これらの結果からHB-EGF-CTFシグナルが少なくともEGFならびにbFGFによるc-Myc遺伝子発現誘導においてPLZF等の転写抑制因子の解除に重要な機能をはたしていることを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Pbx1is a major target of PLZF-mediated melanoma cell growth suppression. (2007)
  • 著者名/発表者名: Shiraishi, K., Yamasaki, K., Nanba, D., Inoue, H., Hanakawa, Y., Shirakata, Y., Hashimoto, K., Higashiyama, S.
  • 雑誌名: Oncogene 26 ページ: 339-348
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Pbxl is a major target of PLZF-mediated melanoma cell growth suppression. (2007)
  • 著者名/発表者名: Shiraishi, K., Yamasaki, K., Nanba, D., Inoue, H., Hanakawa, Y., Shirakata, Y., Hashimoto, K., Higashiyama, S.
  • 雑誌名: Oncogene 26 ページ: 339-348
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Alternative recycling of E-cadeherin depends on metalloprotease activity of ADAM9 (2006)
  • 著者名/発表者名: Hirao, F., Nanba, D., Tanaka, M., Ishiguro, H., Kinugasa, Y., Doki, Y., Yanao, M., Matuura, N., Monden, M., Higashiyama, S.
  • 雑誌名: Exp. Cell Res. 312 ページ: 331-339
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] PLZF regulates Pbx1 transcription and Pbx1-HoxC8 complex leads to androgen-independent prostate cancer proliferation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kikugawa, T., Kinugasa, Y., Shiraishi, K., Nanba, D., Nakashiro K., Tanji, N., Yokoyama, M., Higashiyama, S.
  • 雑誌名: The Prostate 66 ページ: 1092-2099
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Activity-dependent shedding of heparin-binding EGF-like growth factor in brain neurons. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shishido, Y., Tanaka, T., Piao, Y.S., Araki, K., Takei, N., Higashiyama, S., Nawa H.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 348 ページ: 963-970
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Loss of HB-EGF in smooth muscle or endothelial cell lineages causes heart valve malformation and cardiac hypertrophy. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nanba, D., Kinugasa, Y., Morimoto, C., Koizumi, M., Yamamutra, H., Takahashi K., Takakura, N., Mekada, E., Hashimoto, K., Higashiyama, S.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 350 ページ: 315-321
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Alternative recycling of E-cadeherin depends on metalloprotease activity of ADAM9 (2006)
  • 著者名/発表者名: Hirao, F., Nanba, D., Tanaka, M., Ishiguro, H., Kinugasa, Y., Doki, Y., Yanao, M., Matuura, N., Monden, M., Higashiyama, S.
  • 雑誌名: Exp.Cell Res. 312 ページ: 331-339
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] PLZF regulates Pbxl transcription and Pbxl-HoxC8 complex leads to androgen-independent prostate cancer proliferation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kikugawa, T., Kinugasa, Y., Shiraishi, K., Nanba, D., Nakashiro K., Tanji, N., Yokoyama.M., Higashiyama.S.
  • 雑誌名: The Prostate 66 ページ: 1092-2099
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Loss of HB-EGF in smooth muscle or endothelial cell lineages causes heart valve malformation and cardiac hypertrophy. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nanba, D., Kinugasa, Y., Morimoto, C., Koizumi, M., Yamamutra, H., Takahashi, K., Takakura, N., Mekada, E., Hashimoto, K., Higashiyama, S.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 350 ページ: 315-321
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] HB-EGF ad liver regeneration. (2006)
  • 著者名/発表者名: Higashiyama, S., Kiso, S.
  • 雑誌名: Growth Factor ＆ Regenerative Medicine ページ: 50-57
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] PLZF regulates Pbx1 transcription and Pbx1-HoxC8 complex leads to androgen-independent prostate cancer proliferation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kikugawa T., Kinugasa Y., Shiraishi K., Nanba D., Nakashiro K., Tanji N., Yokoyama M., Higashiyama S.
  • 雑誌名: The Prostate 66 ページ: 1092-2099
• [雑誌論文] Activity-dependent shedding of heparin-binding EGF-like growth factor in brain neurons. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shishido, Y., Tanaka, T., Piao, Y.S., Araki, K., Takei, N., Higashiyama, S., Nawa H.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 348, ページ: 963-970
• [雑誌論文] Loss of HB-EGF in smooth muscle or endothelial cell lineages causes heart valve malformation and cardiac hypertrophy. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nanba, D., Kinugasa, Y., Morimoto, C., Koizumi, M., Yamamutra, H., Takahashi, K., Mekada, E., Hashimoto, K., Higashiyama, S.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 350 ページ: 315-321
• [雑誌論文] Ectodomain shedding of membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor and subcellular localization of the C-terminal fragment in a cell cycle. (2005)
  • 著者名/発表者名: Toki, F., Nanba, D., Matsuura, N., Higashiyama, S.
  • 雑誌名: J. Cell. Physiol. 202 ページ: 839-848
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] IL-8 promotes cell proliferation and migration through metalloproteinase-cleavage proHB-EGF in Human Colon Carcinoma Cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Itoh, Y., Joh, T., Tanida, S., Sasaki, M., Kataoka, H., Itoh, K., Oshima, T., Ogasawara, N., Togawa, S., Wada, T., Kubota, H., Mori, Y., Ohara, H., Nomura, T., Higashiyama, S., Itoh, M.
  • 雑誌名: Cytokine 29 ページ: 275-282
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Heparin-binding EGF-like growth factor is essential for keratinocyte migration in skin wound heaking. (2005)
  • 著者名/発表者名: Shirakata, Y., Kimura, R., Nanba, D., Morimoto, C., Yokota, K., Nakamura, M., Mekada, E., Higashiyama, S., Hashimoto, K.
  • 雑誌名: J. Cell Science 118 ページ: 2363-2370
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] G protein coupling and second messenger generation are indispensable for metalloprotease-dependent, heparin-binding epidermal growth factor shedding through angiotensin II type-1 receptor. (2005)
  • 著者名/発表者名: Mifune, M., Ohtsu, H., Suzuki, H., Nakashima, H., Brailoiu, E., Dun, N.J., Frank, G.D., Inagami, T., Higashiyama, S., Thomas, W.G., Eckhart, A.D., Dempsey, P.J., Eguchi, S.
  • 雑誌名: J. Biol Chem. 280 ページ: 26592-26599
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Regenerative and therapeutic effects of heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor on diabetes by gene transduction through retrograde pancreatic duct injection of adenovirus vector. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kozawa, J., Tokui, Y., Moriwaki, M., Li, M., Ohmoto, H., Yuan, M., Zhang, J., Iwahashi, H., Imagawa, A., Yamagata, K., Tochino, Y., Shimomura, I., Higashiyama, S., Miyagawa, J.
  • 雑誌名: Pancreas 31 ページ: 32-42
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Induction of Keratinocyte Migration via Transactivation of the Epidermal Growth Factor Receptor by the Antimicrobial Peptide LL-37. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tokumaru, S., Sayama, K., Shirakata, Y., Komatsuzawa, H., Ouhara, K., Hanakawa, Y., Yahata, Y., Dai, X., Tohyama, M., Nagai, H., Yang, L., Higashiyama, S., Yoshimura, A., Sugai, M., Hashimoto, K.
  • 雑誌名: J. Immunol. 175 ページ: 4662-4668
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Helicobacter pylori-Stimulated Interleukin-8 (IL-8) Promotes Cell Proliferation Through Transactivation of Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) by Disintegrin and Metalloproteinase (ADAM) Activation. (2005)
  • 著者名/発表者名: Joh, T., Kataoka, H., Tanida, S., Watanabe, K., Ohshima, T., Sasaki, M., Nakao, H., Ohhara, H., Higashiyama, S., Itoh, M.
  • 雑誌名: Dig Dis Sci. 50 ページ: 2081-2089
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] The HNF-1 target collectrin controls insulin exocytosis by SNARE complex formation. (2005)
  • 著者名/発表者名: Fukui, K., Yang, Q., Cao, Y., Takahashi, N., Hatakeyama, H., Wang, H., Wada, J., Zhang, Y., Marselli, L., Namno, T., Yoneda K., Onishi, M., Higashiyama S., Matsuzawa, Y., Gonzalez, F.J., Weir, G.C., Kasai, H., Shimomura, I., Miyagawa, J., Wollheim, C.B., Yamagata, K.
  • 雑誌名: Cell Metabolism 2 ページ: 373-384
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Ectodomain shedding of membrane-anchored heparin-binding EGF like growth factor and subcellular localization of the C-terminal fragment in a cell cycle. (2005)
  • 著者名/発表者名: Toki, F., Nanba, D., Matsuura, N., Higashiyama, S.
  • 雑誌名: J.Cell.Physiol. 202 ページ: 839-848
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] IL-8 promotes cell proliferation and migration through metalloproteinase-cleavage proHB-EGF in Human Colon Carcinoma Cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Itoh, Y., Joh, T., Tanida, S., Sasaki, M,.Kataoka, H., Itoh, K., Oshima, T., Ogasawara, N., Togawa, S., Wada, T., Kubota, H., Mori, Y., Ohara, H., Nomura, T., Higashiyama, S., Itoh, M.
  • 雑誌名: Cytokine 29 ページ: 275-282
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Heparin-binding EGF-like growth factor is essential for keratinocyte migration in skin wound heaking. (2005)
  • 著者名/発表者名: Shirakata, Y., Kimura, R, Nanba, D., Morimoto, C., Yokota, K., Nakamura, M, Mekada, E., Higashiyama, S., Hashimoto, K.
  • 雑誌名: J.Cell Science 118 ページ: 2363-2370
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] G protein coupling and second messenger generation are indispensable for metalloprotease-dependent, heparin-binding epidermal growth factor shedding through angiotensin II type-1 receptor. (2005)
  • 著者名/発表者名: Mifune, M., Ohtsu, H., Suzuki, H., Nakashima, H., Brailoiu, E., Dun, N.J., Frank, GD., Inagami, T., Higashiyama, S., Thomas, W.G, Eckhart, A.D., Dempsey, P.J., Eguchi, S.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 280 ページ: 26592-26599
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Regenerative and therapeutic effects of heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor on diabetes by gene transduction through retrograde pancreatic duct injection of adenovirus vector. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kozawa, J., Tokui, Y.Moriwaki, M., Li, M., Ohmoto, H., Yuan, M., Zhang, J., Iwahashi, H., Imagawa, A, Yamagata, K., Tochino, Y., Shimomura, I., Higashiyama, S., Miyagawa, J.
  • 雑誌名: Pancreas 31 ページ: 32-42
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Induction of Keratinocyte Migration via Transactivation of the Epidermal Growth Factor Receptor by the Antimicrobial Peptide LL-37. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tokumaru, S., Sayama, K., Shirakata, Y., Komatsuzawa, H., Ouhara, K., Hanakawa, Y., Yahata, Y., Dai, X., Tohyama, M., Nagai, H., Yang, L., Higashiyama, S., Yoshimura, A, Sugai, M., Hashimoto, K.
  • 雑誌名: J.Immunol. 175 ページ: 4662-4668
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Helicobacter pylori-Stimulated Interleukin-8 (IL-8) Promotes Cell Proliferation Through Transactivation of Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) by Disintegrin and Metalloproteinase (ADAM) Activation. (2005)
  • 著者名/発表者名: Joh, T., Kataoka, H., Tanida, S., Watanabe, K., Ohshima, T., Sasaki M., Nakao, H., Ohhara, H., Higashiyama, S., Itoh, M.
  • 雑誌名: Dig Dis Sci. 50 ページ: 2081-2089
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The HNF-1 target collectrin controls insulin exocytosis by SNARE complex formation. (2005)
  • 著者名/発表者名: Fukui, K., Yang, Q., Cao, Y., Takahashi, N., Hatakeyama, H., Wang, H., Wada, J., Zhang, Y., Marselli, L., Namno, T., Yoneda, K., Onishi, M., Higashiyama, S., Matsuzawa, Y., Gonzalez, F.J., Weir, GC., Kasai, H., Shimomura, I., Miyagawa, J., Wollheim, C.B., Yamagata, K.
  • 雑誌名: Cell Metabolism 2 ページ: 373-384
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Ectodomain shedding of membrane-anchored heparin-binding EGF like growth factor and subcellular localization of the C-terminal fragment in a cell cycle (2005)
  • 著者名/発表者名: Toki, F.et al.
  • 雑誌名: J.Cell.Physiol. 202 ページ: 839-848
• [雑誌論文] Heparin-binding EGF-like growth factor is essential for keratinocyte migration in skin wound heaking (2005)
  • 著者名/発表者名: Shirakata, Y.et al.
  • 雑誌名: J.Cell.Science 118 ページ: 2363-2370
• [雑誌論文] G protein coupling and second messenger generation are indispensable for metalloprotease dependent, heparin-binding epidermal growth factor shedding through angiotensin II type-1 receptor. (2005)
  • 著者名/発表者名: Mifune, M.et al.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 280 ページ: 26592-26599
• [雑誌論文] Induction of Keratinocyte Migration via Transactivation of the Epidermal Growth Factor Receptor by the Antimicrobial Peptide LL-37. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tokumaru, S.et al.
  • 雑誌名: J.Immunol. 175 ページ: 4662-4668
• [雑誌論文] Alternative recycling of E-cadeherin depends on metalloprotease activity of ADAM9 (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirao, F.et al.
  • 雑誌名: Exp.Cell Res. 12 ページ: 331-339
• [雑誌論文] The HNF-1 target collectrin controls insulin exocytosis by SNARE complex formation. (2005)
  • 著者名/発表者名: Fukui, K., et al.
  • 雑誌名: Cell Metabolism 2 ページ: 373-384
• [図書] 細胞増殖因子と再生医療 (2006)
  • 著者名/発表者名: 松本邦夫, 田畑泰彦, 東山繁樹 他
  • 総ページ数: 401
  • 出版者: メディカルレビュー社
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] 細胞増殖因子と再生医療 (2006)
  • 著者名/発表者名: 松本邦夫, 田畑恭彦, 東山繁樹 他
  • 総ページ数: 401
  • 出版者: メディカルレビュー社