mRNA不安定化因子を利用したhypomorph型モデルマウスの作出

• 研究課題/領域番号: 17500286
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: 信州大学
• 研究代表者: 森 政之 信州大学, 医学研究科, 助教授 (60273190)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2006年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円); 2005年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: mRNA不安定化因子 / hypomorph / モデルマウス / 遺伝子 / ゲノム / 動物

研究概要

遺伝性白内障のモデルであるShumiya Cataract Rat(SCR系ラット)における白内障遺伝子の同定を試み、白内障遺伝子はラノステロール合成酵素遺伝子(Lss遺伝子)の自然突然変異であることを突き止めた。SCR系ラットはLss^SとLss^lの2つの異なる突然変異対立遺伝子をヘテロでもっていた。このうちLss^Sはhypomorph型対立遺伝子であった。Lss^S対立遺伝子をさらに詳細に解析した結果、第4エクソンの3'端から17番目の塩基にG→A置換変異が見付かった。この変異によりmRNAの不安定化が生じ、そのためにmRNA発現量が低下して見えることが明らかとなった。
hypomorph型Lss^S遺伝子の第4エクソンをルシフェラーゼ遺伝子に連結して培養細胞中で強制発現させると、ルシフェラーゼ活性が低下した。この結果より、Lss遺伝子の第4エクソン内のmRNA不安定化因子は、その位置する遺伝子に関わり無く機能することが明らかとなった。Lss^Sにおいて第4エクソンの3'端から17番目のG塩基からA塩基への置換がmRNA前駆体の異常スプライシングから不安定化を惹起する機構の可能性として、exonic splicing enhance(ESE)配列の変化を考え、実験的に検証した。コンピュータープログラムESEfinderにより解析の結果、Lss^SではA塩基への置換により、比較的スコアの高い(score=4.15)SRp40配列があらたに形成されていることが確認された。「本来結合するべきではないスプライス因子がmRNA前駆体に結合すると、何らかの理由によりmRNA前駆体が不安定化する」との機構が推測された。

研究成果

• [雑誌論文] Functional polymorphisms of the Lss and Fdftl genes in laboratory rats (2007)
  • 著者名/発表者名: Mori M., Sawashita J., Higuchi K.
  • 雑誌名: Experimental Animals 56・2 ページ: 93-101
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Quantitative trait locus that determines the cross-sectional shape of the femur in SAMP6 and SAMP2 mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Otsuki B., Matsumura T., Shimizu M., Mori M., Okudaira S., Nakanishi R., Higuchi K., Hosokawa M., Tsuboyama T., Nakamura T.
  • 雑誌名: Journal of Bone and Mineral Research 22・5 ページ: 675-685
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Amyloidosis in transgenic mice expressing murine amyloidogenic apolipoprotein (Apoa2^c) (2007)
  • 著者名/発表者名: Ge F., Yao J., Fu X., Guo Z., Yan J., Zhang B., Zhang H., Tomozawa H., Miyazaki J., Sawashita J., Mori M., Higuchi K.
  • 雑誌名: Laboratory Investigations (印刷中)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Functional polymorphisms of the Lss and Fdft1 genes in laboratory rats (2007)
  • 著者名/発表者名: Mori M., Sawashita J., Higuchi K.
  • 雑誌名: Experimental Animals 56(2) ページ: 93-101
  • NAID: 130000068039
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Quantitative trait locus that determines the cross-sectional shape of the femur in SAMP6 and SAMP2 mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Otsuki B., Matsumura T., Shimizu M., Mod M., Okudaira S., Nakanishi R., Higuchi K., Hosokawa M., Tsuboyama T., Nakamura T.
  • 雑誌名: Journal of Bone and Mineral Research 22(5) ページ: 675-685
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Functional polymorphisms of the Lss and Fdftl genes in laboratory rats. (2007)
  • 著者名/発表者名: Mori M., Sawashita J., Higuchi K.
  • 雑誌名: Experimental Animals 56・2 ページ: 93-101
• [雑誌論文] Reduced Coenzyme Q10 supplementation decelerates senescence in SAMP1 mice (2006)
  • 著者名/発表者名: Yan J., Fujii K., Yao J., Kishida H., Hosoe K., Sawashita J., Takeda T., Mori M., Higuchi K.
  • 雑誌名: Experimental Gerontology 41・2 ページ: 130-140
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Lanosterol synthase mutations cause cholesterol deficiency-associated cataracts in the Shumiya cataract rat (2006)
  • 著者名/発表者名: Mori M., Li G., Abe I., Nakayama J., Guo Z., Sawashita J., Ugawa T., Nishizono S., Serikawa T., Higuchi K., Shumiya S.
  • 雑誌名: The Journal of Clinical Investigation 116・2 ページ: 395-404
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Transmission of amyloidosis in offspring of mice with AApoAII amyloidosis (2006)
  • 著者名/発表者名: Korenaga T., Yan J., Sawashita J., Matsushita T., Naiki H., Hosokawa M., Mori M., Higuchi K., Fu X.
  • 雑誌名: American Journal of Pathology 168・3 ページ: 898-906
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Transmissibility of mouse AApoAII amyloid fibrils : inactivation by physical and chemical methods (2006)
  • 著者名/発表者名: Zhang H., Sawashita J., Fu X., Korenaga T., Yan J., Mori M., Higuchi K.
  • 雑誌名: FASEB Journal 20・7 ページ: 1012-1014
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] A third locus for eosinophilia on chromosome 1 of the MES rats (2006)
  • 著者名/発表者名: Mori M., Higuchi K., Matsumoto K.
  • 雑誌名: Experimental Animals 55・5 ページ: 497-500
  • NAID: 130000068084
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Secreted Frizzled-Related Protein 4 as a negative regulator of bone formation and a candidate gene affecting peak bone mineral density in mice (2006)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi R., Shimizu M., Mori M., Akiyama H., Otsuki B., Okudaira S., Hashimoto M., Higuchi K., Tsuboyama T., Nakamura T.
  • 雑誌名: Journal of Bone and Mineral Research 21・11 ページ: 1713-1721
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Reduced Coenzyme Q10 supplementation decelerates senescence in SAMP1 mice (2006)
  • 著者名/発表者名: Yan J., Fujii K., Yao J., Kishida H., Hosoe K., Sawashita J., Takeda T., Mod M., Higuchi K.
  • 雑誌名: Experimental Gerontology 41(2) ページ: 130-140
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Lanosterol synthase mutations cause cholesterol deficiency-associated cataracts in the Shumiya cataract rat (2006)
  • 著者名/発表者名: Mori M., Li G., Abe I., Nakayama J., Guo Z., Sawashita J., Ugawa T., Nishizono S., Serikawa T., Higuchi K., Shumiya S.
  • 雑誌名: The Journal of Clinical Investigations 116(2) ページ: 395-404
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Transmission of amyloidosis in offspring of mice with AApoAII amyloidosis (2006)
  • 著者名/発表者名: Korenaga T., Yan J., Sawashita J., Matsushita T., Naiki H., Hosokawa M., Mod M., Higuchi K., Fu X.
  • 雑誌名: American Journal of Pathology 168(3) ページ: 898-906
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Transmissibility of mouse AApoAII amyloid fibrils: inactivation by physical and chemical methods (2006)
  • 著者名/発表者名: Zhang H., Sawashita J., Fu X., Korenaga T., Yan J., Mori M., Higuchi K.
  • 雑誌名: FASEB Journal 20(7) ページ: 1012-1014
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A third locus for eosinophilia on chromosome 1 of the MES rats (2006)
  • 著者名/発表者名: Mori M., Higuchi K., Matsumoto K.
  • 雑誌名: Experimental Animals 55(5) ページ: 497-500
  • NAID: 130000068084
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Secreted Frizzled-Related Protein 4 as a negative regulator of bone formation and a candidate gene affecting peak bone mineral density in mice (2006)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi R., Shimizu M., Mori M., Akiyama H., Otsuki B., Okudaira S., Hashimoto M., Higuchi K., Tsuboyama T., Nakamura T.
  • 雑誌名: Journal of Bone and Mineral Research 21(11) ページ: 1713-1721
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Transmissibility of mouse AApoAII amyloid fibrils : inactivation by physical and chemical methods. (2006)
  • 著者名/発表者名: Zhang H., Sawashita J., Fu X., Korenaga T., Yan J., Mori M., Hifuchi K.
  • 雑誌名: FASEB Journal 20・7 ページ: 1012-1014
• [雑誌論文] A third locus for eosinophilia on chromosome 1 of the MES rats. (2006)
  • 著者名/発表者名: Mori M., Higuchi K., Matsumoto K.
  • 雑誌名: Experimental Animals 55・5 ページ: 497-500
  • NAID: 130000068084
• [雑誌論文] Secreted Frizzled-Related Protein 4 as a negative regulator of bone formation and a candidate gene affecting peak bone mineral density in mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi R., Shimizu M., Mori M., Akiyama H., Otsuki B., Okudaira S., Hashimoto M., Higuchi K., Tsuboyama T., Nakamura T.
  • 雑誌名: Journal of Bone and Mineral Research 21・11 ページ: 1713-1721
• [雑誌論文] Reduced Coenzyme Q10 supplementation decelerates senescence in SAMP1 mice (2006)
  • 著者名/発表者名: Yan J., Fujii K., Yao J., Kishida H., Hosoe K., Sawashita.J., Takeda T., Mori M., Higuchi K.
  • 雑誌名: Experimental Gerontology 41(2) ページ: 130-140
• [雑誌論文] Lanosterol synthase mutations cause cholesterol deficiency-associated cataracts in the Shumiya cataract rat (2006)
  • 著者名/発表者名: Mori M., Li G., Abe I., Nakayama J., Guo Z., Sawashita J., Ugawa T., Nishizono S., Serikawa T., Higuchi K., Shumiya S.
  • 雑誌名: The Journal of Clinical Investigation 116(2) ページ: 395-404
• [雑誌論文] Transmission of amyloidosis in offspring of mice with AApoAII amyloidosis (2006)
  • 著者名/発表者名: Korenaga T., Yan J., Sawashita J., Matsushita M., Naiki H., Hosokawa M., Mori M., Higuchi K., Fu X.
  • 雑誌名: American Journal of Pathology 168(3) ページ: 898-906
• [雑誌論文] A locus for eosinophilia in the MES rat is on chromosome 19 (2005)
  • 著者名/発表者名: Li G., Guo Z., Higuchi K., Kawakubo M., Matsumoto K., Mori M.
  • 雑誌名: Mammalian Genome 16・7 ページ: 516-523
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] A locus for eosinophilia in the MES rat is on chromosome 19 (2005)
  • 著者名/発表者名: Li G., Guo Z., Higuchi K., Kawakubo M., Matsumoto K., Mod M.
  • 雑誌名: Mammalian Genome 16(7) ページ: 516-523
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A locus for eosinophilia in the MES rat is on Chromosome 19 (2005)
  • 著者名/発表者名: Li G., Guo Z., Higuchi K., Kawakubo M., Matsumoto K., Mori M.
  • 雑誌名: Mammalian Genome 16(7) ページ: 516-523
• [雑誌論文] Amyloidosis in transgenic mice expressing murine amyloidogenic apolipoprotein (Apoa2^c)
  • 著者名/発表者名: Ge F., Yao J., Fu X., Guo Z., Yan J., Zhang B., Zhang H., Tomozawa H., Miyazaki J., Sawashita J., Mori M., Higuchi K.
  • 雑誌名: Laboratory Investigations (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より