| 研究課題/領域番号 |
17510174
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
生物分子科学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
藤井 勲 東京大学, 大学院薬学系研究科, 助教授 (70181302)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2006年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2005年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
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| キーワード | ポリケタイド合成酵素 |
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| 研究概要 |
本研究においては、新規化合物供給のための新たな方法論の開発、開拓を目的として、糸状菌の繰返し型タイプI型ポリケタイド合成酵素を取り上げ、その反応制御機構の解明へ向けて研究を行った。その結果、単環性芳香族化合物合成のSA-PKSとして、A.terreus由来6-methylsalicylic acid synthaseであるATXについて、酵母共発現系を用いたサブユニット-サブユニット相互作用による活性中心の再構成系を確立し、その相互作用に必要なInder Domainの存在と高次構造モデルを提出することができた。また、多環性芳香族化合物合成のAR-PKSにおいては、そのC-末に存在するClaisen Cyclaseドメインを中心に解析を進め、Claisen Cyclaseが単独の酵素タンパクとして機能しうることを初めて実証するとともに、Cyclaseタンパクを大腸菌で活性を有する機能タンパクとして発現することに成功し、さらにその精製法も確立することができた。また、還元型化合物合成のRD-PKS遺伝子をジャガイモ夏疫病菌Alternaria solaniより網羅的にクローニングし、糸状菌発現系を用いてその機能同定を進めるとともに、酵母発現系を用いたalternapyrone合成酵素PKSNのメチルトランスフェラーゼドメインMeTの解析を行った。以上の結果は、繰返し型タイプI型ポリケタイド合成酵素の反応制御機構解明に向けて前進した着実な一歩であると考えられる。
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