| 研究課題/領域番号 |
17550088
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
分析化学
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| 研究機関 | 同志社大学 |
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研究代表者 |
塚越 一彦 同志社大学, 工学部, 教授 (60227361)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
2006年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
2005年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | 化学発光 / 免疫反応 / マイクロチップ / 電気泳動 / タンパク質 / 腫瘍マーカー / マイクロ分析 / 免疫分析 |
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| 研究概要 |
化学発光(CL)検出法は、高感度検出を目的としてHPLC、液体クロマトグラフィー、イムノアッセイなどにも適用されている。バックグラウンドが低いために、CL検出は優れた検出感度を与えることが期待される。ルミノールCLまたは過シュウ酸エステルCL検出は、目的成分の検出において適用範囲が広いCLである。また近年、マイクロ化学分析システム(μ一TAS)を用いた研究が盛んに行われている。μ一TASには、早い分析時間、試料の節約、小型化、自動化といった利点がある。しかし、多くのF-TASは検出にレーザー励起蛍光法などを用いているため、マイクロチップ自体は小型であるが、全体としては比較的大掛かりな装置になってしまう。本研究では、マイクロチップ上で、抗体固定化ガラスビーズを用いて行う抗原抗体反応とルミノールCL検出または過シュウ酸エステルCL検出とを組み合わせることにより、高感度「マイクロ免疫分析システム」を開発し、血清中の特定成分の定量を行った。まず、免疫反応のモデルとしてヒト血清アルブミン(HSA)と抗ヒト血清アルブミン(anti-HSA)を用いた。HSAをイソルミノールイソチオシアナート(ILITC)またはフルオレセインイソチオシアナート(FITC)で標識し、競合法を導入してマイクロチップ上で分析した。HSAの検量線を作成し、それを使ってコントロール血清中に含まれるHSAを定量することができた。同様の方法にて腫瘍マーカーの一つである免疫抑制酸性蛋白(IAP)を分析することも可能であった。
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