| 研究課題/領域番号 |
17570064
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
動物生理・行動
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
岡田 幸雄 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 准教授 (60136687)
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| 研究分担者 |
戸田 一雄 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (80134708)
藤山 理恵 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (10274664)
ゼレド ジョージ 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (10363459)
宮崎 敏博 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (10174161)
佛坂 斉祉 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 講師 (90199513)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
3,810千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 210千円)
2007年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2006年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2005年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | 副甲状腺 / アラキドン酸 / Ca^<2+> / パッチクランプ / ウシガエル / イオンチャネル / 情報伝達 / Gタンパク質 |
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| 研究概要 |
哺乳類副甲状腺細胞の細胞膜にはCa^<2+>受容体(CaR)が発現しており,この細胞は血漿Ca^<2+>濃度変化を直接検出しながらPTH分泌量を変化させる。カエル副甲状腺においても同様な機序が働いているかについて解析した。カエル単離副甲状腺細胞は、-84mVの保持電位からの脱分極ステップにより一過性のTTX感受性Na^+電流を示した。細胞外液に10μM Win55,212-2を加えると電位依存性Na^+電流は強く抑制され,その活動は脂質であるカンナビノイドによって調節されている可能性が示唆された。細胞外液のCa^<2+>濃度を静止時の1.8mMからそれ以上に増加させると,副甲状腺細胞はCa^<2+>濃度に依存した内向き電流を示した。Ca^<2+>濃度-応答関係のEC_<50>は約6mMであった。この電流は,細胞内Ca^<2+>濃度上昇により活性化されるクロライド電流であった。細胞外液へのPLCの特異的阻害剤である10μM U-73122の投与は細胞外Ca^<2+>誘発電流を強く抑制し、その大きさは対照値の38%に減少した。細胞内への50μMIP_3の投与は副甲状腺細胞に何の応答も誘発しなかった。細胞外液にジアシルグリセロール(DAG)リパーゼの特異的阻害剤である10μM Tetrahydrolipstatinを投与すると、細胞外Ca^<2+>誘発電流の大きさは対照値の10%に低下した。同様に、モノアシルグリセロール(MAG)リパーゼの阻害剤である1μM MAFPもこの電流を対照値の6%に低下させた。一方、電極内液から細胞内に50μM2-AGを灌流すると、副甲状腺細胞は5-10分間の潜時の後しだいに増大するGd^<3+>感受性の内向き電流を示した。以上の結果を総合的に考察すると、細胞外Ca^<2+>受容体にCa^<2+>が結合すると、PLCにより膜PIP_2がIP_3とDAGに解離し、次いでDAGはDAGリパーゼの作用により2-AGとなり、さらにMAGリパーゼによりアラキドン酸とグリセリンに代謝されるカスケード反応が進行し電流応答が誘発されると推定される。今後の課題は、リポキシゲナーゼ(LO)などのアラキドン酸カスケードがCa^<2+>誘発電流発現に関与するか否かを解析することである。
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