インスリン様増殖因子(IGF)-I受容体とがん分子標的治療法

• 研究課題/領域番号: 17570120
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 山口 陽子 東海大学, 工学部, 教授 (10328106)
• 研究分担者: 高柳 淳 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (80245464)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 3,750千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 150千円); 2007年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2006年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円); 2005年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
• キーワード: 抗IGF-I受容体 / 単鎖抗体 / がん分子標的治療法 / ダウンレギュレーション / 抗がん効果 / 抗IGF-I 受容体 / ヒト単鎖抗体 / Phage display法 / downregulation

研究概要

本研究の目的は、より効果的なIGF-I受容体機能を阻害する抗体を新規に作製し、IGF-I受容体に対する分子標的治療法の確立を目指そうとすると同時に、乳がん細胞で抗体により誘起されるIGF-I受容体の分解過程の分子機構を明らかにしようとするものである。
1.ファージディスプレイ法の活用により種々のIGF-I受容体に対する抗体をスクリーニングし、より親和性の高いヒト型抗体を調製する。
スクリーニングして得られた20種の抗体ファージの特異性検討、エピトープ解析を行った結果、インスリン受容体及び他のタンパク質にも結合し目的物は得られなかった。IGF-I受容体に対するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマから作製した抗体の特異性が、IGF-I受容体特異的であったことと対照的であり、はからずも、ファージディスプレイ法による生体外とマウスによる抗体産生の違いが明らかになった。ハイブリドーマから作製した2種のIGF-I受容体特異的単鎖抗体の解析により、親和性・エピトープに関しての新知見が得られた。この成果は2報として論文発表した。
2.既存及び新たなIGF-I受容体特異的抗体の抗がん効果とそのメカニズムを評価する。
IGF-I受容体に対する抗体によるダウンレギュレーションのメカニズムの解明に関して、ヒト乳がんMCF-7細胞で、エピトープの異なる抗体でも用いた抗IGF-IR抗体の全てがIGF-I受容体のダウンレギュレーションを引き起こした。抗IGF-I受容体抗体によるIGF-I受容体のダウンレギュレーションはクラスリン被覆小胞を介して細胞内に侵入し、リソソームにて分解されるという事が明らかになった。これらの成果は2回の学会で報告した。さらに、共焦点顕微鏡での解析結果を加え、平成19年、5月にアメリカ生化学・分子生物学会で報告した。現在、投稿準備中である。

研究成果

• [雑誌論文] Construction and characterization of single-chain antibodies against human insulin-like growth factor-1 Receptor from hybridomas producing 1H7 and 3B7 monoclonal antibody (2008)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y, Morizono, T., Matsumoto-Takasaki, A., Sakai, K., Sato, S., Asanuma, H., Takayanagi, A., and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 雑誌名: J.Biochem. 143 ページ: 9-19
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Construction and characterization of single-chain antibodies against human insulin-like growth factor-1 Receptor from hybridomas producing 1H7 and 3B7 monoclonal antibody (2008)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y, Morizono, T., Matsumoto-Takasaki, A., Sakai, K., Sato, S., Asanuma, H., Takayanagi, A., Fujita-Yamaguchi, Y
  • 雑誌名: J. Biochem 143 ページ: 9-19
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] An overview of currently available anti-insulin-like growth factor I receptor antibodies (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y. and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 雑誌名: BisScience Trends 1 ページ: 128-133
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] An overview of currently available anti-insulin-like growth factor I receptor antibodies (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Fujita-Yamaguchi, Y
  • 雑誌名: Bis Science Trends 1 ページ: 128-133
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] An overview of currently available anti-insulin-like growth factor I receptor antibodies. (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y. and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 雑誌名: BisScience Trends 1 ページ: 128-133
  • 査読あり
• [雑誌論文] Downregulation of insulin receptor by antibodies against the type Iinsulin-like growth factor receptor:implications for anti-insulin-like growth factor therapy in breast cancer (2006)
  • 著者名/発表者名: Sachdev, S., Singh, R., Fujita-Yamaguchi, Y., and Yee, D.
  • 雑誌名: Cancer Res. 66 ページ: 2391-2402
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Downregulation of insulin receptor by antibodies against the type I insulin-like growth factor receptor : implications for anti-insulin-like growth factor therapy in breast cancer (2006)
  • 著者名/発表者名: Sachdev, S., Singh, R., Fujita-Yamaguchi, Y., Yee, D
  • 雑誌名: Cancer Res 66 ページ: 2391-2402
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Downregulation of insulin receptor by antibodies against the type I insulin-like growth factor receptor : implications for anti-insulin-like growth factor therapy in breast cancer. (2006)
  • 著者名/発表者名: Sachdev, S.
  • 雑誌名: Cancer Res. 66・4 ページ: 2391-2402
• [学会発表] Comparison of monoclonal antibodies against human IGF-I receptor prepared from mice to those prepared by phage-display technology in vitro (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Sekine, K., Sato, S., Asanuma, H., Takayanagi, A., Shimizu, N., and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 学会等名: WIRC
  • 発表場所: Davos,Switzerland
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Down-regulation pathways of insulin-like growth factor I receptor induced by anti-IGFIR antibodies (2007)
  • 著者名/発表者名: Fujita-Yamaguchi, Y., Ohtani, M., Numazaki, M., and Yajima, Y.
  • 学会等名: Annual Meeting of ASBMB
  • 発表場所: Washington D.C.,USA
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Isolation and characterization of human single-chain antibodies against insulin receptor isoform A by phage-display techniques (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Sekine, K., Takayanagi, A., Shimizu, N., and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 学会等名: 11th Annual Meeting of Japanese Society for Molecular Targeted Therapy for Cancer
  • 発表場所: Osaka,Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Construction and characterzation of single-chain antibodies against insulin-like growth factor-I receptor from hybridomas producing lH7 or 3B7 monoclonal antibody (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Matsumoto-Takasaki, A., Asanuma, H., and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 学会等名: Antibodies-Euorope.
  • 発表場所: Vienna,Austria
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Down-regulation pathways of insulin-like growth factor I receptor(IGF-IR)induced by anti-IGF-IR antibody in MCF-7 breast cancer cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Numazaki, M., Ohtani, M., Yajima, Y., and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 学会等名: The 30tht Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan.The 80th Annual Meeting of the Japanese Biochemical Society
  • 発表場所: Yokohama,Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Comparison of monoclonal antibodies against human IGF-I receptor prepared from mice to those prepared by phage-display technology in vitro (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Sekine, K., Sato, S., Asanuma, H., Takayanagi, A., Shimizu, N., Fujita-Yamaguchi, Y
  • 発表場所: WIRC, Davos, Switzerland
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Down-regulation pathways of insulin-like growth factor I receptor induced by and-IGFIR antibodies (2007)
  • 著者名/発表者名: Fujita-Yamaguchi, Y., Ohtani, M., Numazaki, M., Yajima, Y
  • 学会等名: 2007 Annual Meeting of ASBMB
  • 発表場所: Washington D.C., USA
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Isolation and characterization of human single-chain antibodies against insulin receptor isoform A by phage-display techniques (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y, Sekine, K, Takayanagi, A., Shimizu, N., Fujita-Yamaguchi, Y
  • 学会等名: 11th Annual Meeting of Japanese Society for Molecular Targeted Therapy for Cancer
  • 発表場所: Osaka, Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Construction and characterzation of single-chain antibodies against insulin-like growth factor-I receptor from hybridomas producing 1H7 or 3B7 monoclonal antibody (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Matsumoto-Takasaki, A., Asanuma, H., Fujita-Yamaguchi, Y
  • 学会等名: Antibodies-Euorope
  • 発表場所: Vienna, Austria
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Down-regulation pathways of insulin-like growth factor I receptor(IGF-IR) induced by anti-IGF-IR antibody in MCF-7 breast cancer cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Numazaki, M., Ohtani, M., Yajima, Y., Fujita-Yamaguch, Y
  • 学会等名: The 30th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan. The 80th Annual Meeting of the Japanese Biochemical Society
  • 発表場所: Yokohama, Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Comparison of monoclonal antibodies against human IGF-I receptor prepared from mice to those prepared by phage-display technology in votro (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Sekine, K., Sato, S., Asanuma, H., Takayanagi, A., Shimizu, N., and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 学会等名: WIRC
  • 発表場所: Davos,Switzerland
• [学会発表] Constuction and characterzation of single-chain antibodies against insulin-like growth factor-I receptor from hybridomas producing 1H7 or 3B7 monoclonal antibody (2007)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y, Matsumoto-Takasaki, A., Asanuma, H, and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 学会等名: Antibodies-Euorope
  • 発表場所: Vienna,Austria
• [学会発表] Down-regulation pathways of insulin-like growth factor I receptor (IGF-IR) induced by anti-IGF-IR antibody in MCF-7 breast cancer cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Numazaki, M., Ohtani, M., Yajima, Y., and Fujita-Yamachi, Y.
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会・第80回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Tokyo,Japan RTK signaling as atarget for cancer intervention strategies:IGF-I receptor signaling intervention (2006)
  • 著者名/発表者名: Yoko Fujita-Yamaguchi
  • 学会等名: ICBS2006 RTK Systems Biology Training Course(organized and sponsored by RIKEN Genomic Sciences Center)
  • 発表場所: Tokyo,Japan
  • 年月日: 2006-10-12
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] RTK signaling as atarget for cancer intervention strategies : IGF-I receptor signaling intervention (2006)
  • 著者名/発表者名: Yoko, Fujita-Yamaguchi
  • 学会等名: ICBS2006 RTK Systems Biology Training Course(organized and sponsored by RIKEN Genomic Sciences Center)
  • 発表場所: Tokyo, Japan
  • 年月日: 2006-10-12
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Isolation and characterization of single-chain antibodies(scFvs)against insulin-like growth factor-I receptor(IGF-IR)and/or insulin receptor isoform A(IR-A) (2006)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Sekine, H., Ohtani, M., Sakai, K., Yajima, Y., Takayanagi, A., Shimizu, N., and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 学会等名: 20th IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology and 11th FAOBMB Congress
  • 発表場所: Kyoto,Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Mechanisms of antibody-mediated insulin-like growth factor I receptor(IGF-IR)down-regulation in MCF-7 breast cancer cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Ohtani, M., Yajima, Y., and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 学会等名: The third International Congress of the GRS and the IGF Society
  • 発表場所: Kobe,Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Isolation and characterization of single-chain antibodies(scFvs) against insulin-like growth factor-I receptor(IGF-IR) and/or insulin receptor isoform A(IR-A) (2006)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Sekine, H., Ohtani, M., Sakai, K., Yajima, Y., Takayanagi, A., Shimizu, N., Fujita-Yamaguchi, Y
  • 学会等名: 20th IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology and 11th FAOBMB Congress
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Mechanisms of antibody-mediated insulin-like growth factor I receptor(IGF-IR) down-regulation in MCF-7 breast cancer cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Ohtani, M., Yajima, Y., Fujita-Yamaguchi, Y
  • 学会等名: The third International Congress of the GRS and the IGF Society
  • 発表場所: Kobe, Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Mechanisms of antibody-mediated insulin-like growth factor I receptor(IGF-IR)down-regulation (2005)
  • 著者名/発表者名: Ootani, M., Yajima, Y., and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 学会等名: 78th Annual Meeting of the Japanese Biochemical Society
  • 発表場所: Kobe,Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Isolation and characterization of human single-chain antibodies(scFv)against insulin-like growth factor I receptor(IGF-IR) (2005)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Morizono, T., Sakai, K., Takayanagi, A., Shimizu, N., and Fujita-Yamaguchi, Y.
  • 学会等名: 78th Annual Meeting of the Japanese Biochemical Society
  • 発表場所: Kobe,Japan.
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Mechanisms of antibody-mediated insulin-like growth factor I receptor(IGF-IR) down-regulation (2005)
  • 著者名/発表者名: Ootani, M., Yajima, Y., Fujita-Yamaguchi, Y
  • 学会等名: 78th Annual Meeting of the Japanese Biochemical Society
  • 発表場所: Kobe, Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Isolation and characterization of human single-chain antibodies(scFv) against insulin-like growth factor I receptor(IGF-IR) (2005)
  • 著者名/発表者名: Kusada, Y., Morizono, T., Sakai, K., Takayanagi, A., Shimizu, N., Fujita-Yamaguchi, Y
  • 学会等名: 78th Annual Meeting of the Japanese Biochemical Society
  • 発表場所: Kobe, Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より