低酸素濃度細胞培養法による食品成分の生理機能評価

• 研究課題/領域番号: 17580114
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 食品科学
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 西山 和夫 宮崎大学, 農学部, 助教授 (40164610)
• 研究分担者: 山崎 正夫 宮崎大学, 農学部, 助手 (80381060)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円); 2006年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円); 2005年度: 2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
• キーワード: 低酸素濃度細胞培養 / 血管新生 / 共役リノール酸 / HIF-1 / VEGF / 脂肪酸 / ポリフェノール

研究概要

がん細胞は生体内において盛んに血管新生を誘導し、酸素あるいは栄養分を補給することで腫瘍組織の増大を可能としている。血管新生の誘導は細胞が低酸素状態になることが刺激になると考えられており、低酸素への応答を低下させることによってがん細胞からの血管新生誘導因子の産生は抑制されると考えられる。
まず、がん細胞を低酸素状態で培養することにより、HIF-1αの安定化と血管新生誘導因子であるVEGF産生が誘導されることを確認し、さらに種々の食品成分の活性評価を行った。HepG2細胞に各食品成分を50%増殖阻害濃度および50%増殖阻害濃度の1/3、1/10の濃度になるように添加した後、1%酸素濃度の条件で48時間培養し、培地中のVEGF濃度をELISA法により定量した。
その結果、今回使用した化合物の中でポリフェノール化合物では、カテキン類のEGCG、EGC、フラボノール類のケルセチン、ケンフェロール、ガランギン、イソフラボン類のゲニステイン、ダイゼイン、フェノール酸類のクロロゲン酸、ロスマリン酸、およびその他のポリフェノールであるレスベラトロールに強いVEGF産生抑制活性が認められた。また、脂肪酸類では、共役リノール酸とイオウを含む短鎖脂肪酸であるリポ酸に強いVEGF産生抑制活性をもつことを明らかにした。これらの結果から、がん細胞の低酸素応答が種々の食品成分で抑制できる可能性が示唆され、本評価系はがん細胞の低酸素応答評価に有用であることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] vitamin B6 suppresses apoptosis of NM-1 bovine endothelial cells induced by homocysteine and copper. (2007)
  • 著者名/発表者名: Endo N, Nishiyama K, Okabe M, Matsumoto M, Kanouchi H, Oka T.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta. 1770巻・4号 ページ: 571-577
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Soy-derived isoflavones inhibit the growth of adult T-cell leukemia cells in vitro and in vivo. (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamasaki M, Fujita S, Ishiyama E, Mukai A, Harishkumar Madhyastha, Sakakibara Y, Suiko M, Hatakeyama K, Nemoto T, Morishita K, Kataoka H, Tsubouchi H, Nishiyama K
  • 雑誌名: Cancer Sci. 98巻・11号 ページ: 1740-1746
  • NAID: 10020119045
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Induction of endoreduplication by a JNK inhibitor SP600125 in humanlung carcinoma A549 cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Y.Miyamoto-Yamasaki, M.Yamasaki, H.Tachibana, K.Yamada.
  • 雑誌名: Cell Biology International 31巻・12号 ページ: 1501-1506
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Vitamin B6 suppresses apoptosis of NM-1 bovine endothelial cells induced by homocysteine and copper (2007)
  • 著者名/発表者名: Endo N, Nishiyama K, Okabe M, Matsumoto M, Kanouchi H, Oka T.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta. 1770(4) ページ: 571-577
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Soy-derived isoflavones inhibit the growth of adult T-cell leukemia cells in vitro and in vivo (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamasaki M, Fujita S, Ishiyama E, Mukai A, Harishkumar Madhyastha, Sakakibara Y, Suiko M, Hatakeyama K, Nemoto T, Morishita K, Kataoka H, Tsubouchi H, Nishiyama K
  • 雑誌名: Cancer Sci. 98(11) ページ: 1740-1746
  • NAID: 10020119045
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Induction of endoreduplication by a JNK inhibitor SP600125 in human lung carcinoma A549 cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Y.Miyamoto-Yamasaki, M.Yamasaki, H.Tachibana, K.Yamada.
  • 雑誌名: Cell Biology International 31(12) ページ: 1501-1506
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Vitamin B6 suppresses apoptosis of NM-1 bovine endothelial cells induced by homocysteine and copper. (2007)
  • 著者名/発表者名: Endo N, Nishiyama K, Okabe M, Matsumoto M, Kanouchi H, Oka T
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta. 1770巻・4号 ページ: 571-577
• [雑誌論文] リポ酸によるヒト白血病細胞HL-60のアポトーシス誘導効果 (2006)
  • 著者名/発表者名: 山崎正夫、山根理学、西本健太朗、榊原陽一、水光正仁、西山和夫
  • 雑誌名: Food Function 2巻・1号 ページ: 58-62
  • NAID: 40007299498
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Multifunctional effect of CLA. (2006)
  • 著者名/発表者名: M.Yamasaki, H.Chujo, K.Yamada.
  • 雑誌名: Advances in Conjugated Linolpic Acid Research 3巻 ページ: 141-152
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Reduced expression of perchloric Acid-soluble protein after partialhepatectomy in rats. (2006)
  • 著者名/発表者名: H.Kanouchi, M.Taga, T.Okamoto, M.Yamasaki, T.Oka, K.Yamada, S.Tone, Y.Minatogawa
  • 雑誌名: Biosci Biotechnol Biochem. 70巻・1巻 ページ: 290-292
  • NAID: 10018535856
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Dietary effect of pomegranate seed oil on immune function and lipid metabolism in mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: M.Yamasaki, T.Kitagawa, H.Chujo, N.Koyanagi, H.Maeda, J.Kohno-Murase, J.Imamura, H.Tachibana, K.Yamada
  • 雑誌名: Nutrition 22巻・1号 ページ: 54-59
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Antioxidant activity of vitamin B6 delays homocysteine-inducedatherosclerosis in rats. (2006)
  • 著者名/発表者名: Endo N, Nishiyama K, Otsuka A, Kanouchi H, Taga M, Oka T.
  • 雑誌名: Br J Nutr. 95巻・6号 ページ: 1088-1093
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Induction of apoptic cell death in HL-60 cells by lipoic acid(in Japanese) (2006)
  • 著者名/発表者名: M.Yamasaki, M, Yamane, K.Nishimoto, Y.Sakakibara, M.Suiko, K.Nishiyama
  • 雑誌名: Food Function 2(1) ページ: 58-62
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Multifunctional effect of CLA (2006)
  • 著者名/発表者名: M.Yamasaki, H.Chujo, K.Yamada.
  • 雑誌名: Advances in Conjugated Linoleic Acid Research 3 ページ: 141-152
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Reduced expression of perchloric Acid-soluble protein after partial hepatectomy in rats (2006)
  • 著者名/発表者名: H.Kanouchi, M.Taga, T.Okamoto, M.Yamasaki, T.Oka, K.Yamada, S.Tone, Y.Minatogawa.
  • 雑誌名: Biosci Biotechnol Biochem 70(1) ページ: 290-292
  • NAID: 10018535856
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Dietary effect of pomegranate seed oil on immune function and lipid metabolism in mice (2006)
  • 著者名/発表者名: M.Yamasaki, T.Kitagawa, H.Chujo, N.Koyanagi, H.Maeda, J.Kohno-Murase, J.Imamura, H.Tachibana, K.Yamada.
  • 雑誌名: Nutrition 22(1) ページ: 54-59
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Antioxidant activity of vitamin B6 delays homocysteine-induced atherosclerosis in rats (2006)
  • 著者名/発表者名: Endo N, Nishiyama K, Otsuka A, Kanouchi H, Taga M, Oka T.
  • 雑誌名: Br J Nutr. 95(6) ページ: 1088-1093
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Antioxidant activity of vitamin B6 delays homocysteine-induced atherosclerosis in rats. (2006)
  • 著者名/発表者名: Endo N, Nishiyama K, Otsuka A, Kanouchi H, Taga M, Oka T
  • 雑誌名: Br J Nutr. 95巻・6号 ページ: 1088-1093
• [雑誌論文] Dietary effect of pomegranate seed oil on immune function and lipid metabolism in mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: M.Yamasaki
  • 雑誌名: Nutrition 22・1 ページ: 54-59
• [雑誌論文] IgM production of lymphocytes from C57BL/6N mice was stimulatedby estrogen treated splenic adherent cells (2005)
  • 著者名/発表者名: M.Nakaya, M,Yamasaki, H.Tachibana., K.Yamada.
  • 雑誌名: Immunol Lett. 98巻 ページ: 225-231
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Retronasal Aroma Simulatorを用いた穀類本格焼酎の含み香と立ち香分析 (2005)
  • 著者名/発表者名: 境田博至、渡司奈穂子、中原徳昭、甲斐孝憲、榊原陽一、西山和夫、水光正仁
  • 雑誌名: 日本食品科学工学会誌 52巻・1号 ページ: 19-26
  • NAID: 130000052774
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 味覚センサを用いた本格焼酎の味評価 (2005)
  • 著者名/発表者名: 中原徳昭、境田博至、甲斐孝憲、榊原陽一、西山和夫、福田亘博、水光正仁
  • 雑誌名: 日本食品科学工学会誌 52巻・4号 ページ: 145-153
  • NAID: 130000052614
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 本格焼酎の基本味を識別する脂質膜センサ (2005)
  • 著者名/発表者名: 中原徳昭、古田幸、境田博至、甲斐孝憲、榊原陽一、西山和夫、水光正仁
  • 雑誌名: 日本食品科学工学会誌 52巻・8号 ページ: 355-365
  • NAID: 10019043914
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] IgM production of lymphocytes from C57BL/6N mice was stimulated by estrogen treated splenic adherent cells (2005)
  • 著者名/発表者名: M.Nakaya, M, Yamasaki, H.Tachibana, K.Yamada.
  • 雑誌名: Immunol Lett 98 ページ: 225-231
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Retronasal aroma and orthnasal aroma of cereal shochu using retronasal aroma simulator(in Japanese) (2005)
  • 著者名/発表者名: H.Sakaida, N.Watashi, N.Nakahara, T.Kai, Y.Sakakibara, K.Nishiama, N.M.Suiko
  • 雑誌名: Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi 52(1) ページ: 19-26
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Taste evaluation of Honkakushochu with taste sensor(in Japanese) (2005)
  • 著者名/発表者名: N.Nakahara, H.Sakaida, Kai, Y.Sakakibara, K.Nishiama, N.M.Suiko
  • 雑誌名: Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi 52(4) ページ: 145-153
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Lipid membrane sensors that identifies basic taste of Honkakushochu(in Japanese) (2005)
  • 著者名/発表者名: N.Nakahara, S.Huruta, H.Sakaida, Kai, Y.Sakakibara, K.Nishiama, N.M.Suiko
  • 雑誌名: Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi 52(8) ページ: 355-365
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Trans 10, cis 12-conjugated linoleic acid induces mitochondoria-related apoptosis and lysosomal destabilization in rat hepatoma cells (2005)
  • 著者名/発表者名: M.Yamasaki, Y.Miyamoto, H.Chujo, K.Nishisyama, H.Tachibana, K.Yamada.
  • 雑誌名: Biochim.Biophyis.Acta. 1735(3) ページ: 176-184
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Cytotoxity of the trans10, cis12 isomer of conjugated linoleic acid on rat hepatoma and its modulation by other fatty acids and tocopherol and tocotrienol. (2005)
  • 著者名/発表者名: M.Yamasaki
  • 雑誌名: In Vitro Cellular Develomental Biology-Animal 41 ページ: 239-244
• [雑誌論文] Trans10, cis12-conjugated linoleic acid induces mitochondria-related apoptosis and lysosomal destabilization in rat hepatoma cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: M.Yamasaki
  • 雑誌名: Biochimica et Biophysica Acta-Molecular and Gel and Cell Biology of Lipids 1735 ページ: 176-184
• [雑誌論文] IgM production of lymphocytes from C57BL/6N mice was stimulated by estrogen treated splenic adherent cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: M.Nakaya
  • 雑誌名: Immunological Letters 98・2 ページ: 225-231