| 研究課題/領域番号 |
17590159
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
解剖学一般(含組織学・発生学)
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
西尾 康二 名古屋大学, 大学院医学系研究科, 助手 (60252235)
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| 研究分担者 |
井上 晃 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 助教授 (50109857)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2006年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
2005年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
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| キーワード | 腫瘍細胞 / リン酸化 / ヌクレオボデイ / PML / RBM10 / 癌抑制遺伝子 / 細胞死 / カゼインキナーゼ / ヌクレオボディ / 老化細胞 / 核内輸送機能 / S1-1 / 老化シグナル |
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| 研究概要 |
直接蛍光標識した抗S1-1-Z及び抗S1-1-p130抗体、並びに抗PMLアイソフォーム抗体を使用し、培養ヒト正常細胞(TIG3S)、腫瘍細胞、ラット及びヒト正常組織におけるS1-1及びPMLヌクレオボディの動態を観察した。若いTIG3S細胞では、S1-1ヌクレオボディが稀に観察され、PML2,4,5,6のヌクレオボディも顕著に観察された。さらにS1-1及びPML6ヌクレオボディの共局在が確認された。HeLa細胞では、S1-1ヌクレオボディは殆ど観察されず、S1-1及びPMLの顕著な細胞質局在、主にPML2及びPML6のヌクレオボディ、稀にPML4及びPML5のヌクレオボディが観察された。分裂の盛んな若いTIG3SやHeLa細胞では、S1-1ヌクレオボディが稀に存在した。またHeLa及び若いTIG3S細胞のS1-1p110蛋白質レベルは非常に低く、逆にS1-1p130蛋白質は高レベルであった。さらにHeLa細胞のS1-1p130レベルは、TIG3S細胞の3倍程も高レベルであった。PML及びS1-1(RBM10)の各アイソフォームのアミノ酸配列中には、多数のプロテインキナーゼC(PKC)及びカゼインキナーゼ2(CK2)のリン酸化部位が存在する。そのため、カゼインキナーゼ(CK2)の活性が強いHeLa細胞では、CK2-リン酸化修飾(PMLの517番目のセリンS^<517>)を受けたPML蛋白がプロテアソームで分解される。しかしながら、S1-1p130(RBM10 variant-1)は非常に安定であった。PKC及びCK2阻害剤を投与したHeLa及びTIG3S細胞では、S1-1ヌクレオボディの発達が認められ、リン酸化修飾によりS1-1ヌクレオボディの構築が抑制されることが示唆された。PKCとCK2阻害剤により、HeLa及びTIG3S細胞の細胞死が誘導され、それらの増殖も強く阻害された。
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