| 研究課題/領域番号 |
17590382
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
細菌学(含真菌学)
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| 研究機関 | 千葉大学 (2006)
筑波大学 (2005) |
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研究代表者 |
清水 健 千葉大学, 大学院医学研究院, 講師 (70312840)
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| 研究分担者 |
浜端 崇 (濱端 崇) 国立国際医療センター研究所, 感染症制御研究部, 室長 (40311427)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
3,700千円 (直接経費: 3,700千円)
2006年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
2005年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
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| キーワード | 腸管出血性大腸菌 / 志賀様毒素 / 分泌 / 病原性 / Gb3 / 細菌感染症 |
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| 研究概要 |
腸管出血性大腸菌(EHEC)は主要な病原因子として志賀様毒素を産生する。志賀様毒素1(Stx1)と志賀様毒素2(Stx2)では分泌様式が異なっており、Stx1の毒素活性のほとんどが菌胎内に存在しているが、Stx2では培養上消に存在する。そこで我々はEHECでのStx2の分泌機構の解析を進めるために、C端末にHis Tagを付加したStx1のBサブユニット(Stx1BH)、あるいはStx2のBサブユニット(Stx2BH)を低いレベルでEHECに発現させた菌体でのStxBHsとStxsの分布を解析した。その結果。発現していたStx1BHとStx2BHはどちらも分泌されなかった。しかしながら、Stx2BHを発現させたEHECではStx2の分泌が阻害された。一方、StxBHを発現させたEHECではそのようなことは起こらなかった。これらの結果はStx2BHが特異的にEHECのStx2分泌システムを阻害していることを示していた。そこで、Stx2分泌装置が認識するStx2のBサブユニットを作成し、解析を行った。その結果、Stx2BHのSer31をStx1BHのそれに相当するAsnへの置換によってこのBサブユニットを発現していたEHECにおけるStx2の分泌の制御が回復した。ことのことより、Stx2の分泌には、BサブユニットのSer31が重要であることが示唆された。このことを明らかにするためにStx2のBサブユニットの31番目のセリン残基をアスパラギン残基に置換した変異Stx2を作製し、その分布を確認したところ、大部分が菌体内から検出された。このことから、Stx2のBサブユニットの31番目のセリン残基が分泌に必須であることが明らかになった。
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