C型慢性肝炎のCTL免疫モニタリングシステムの開発

• 研究課題/領域番号: 17590640
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 平松 直樹 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (30362700)
• 研究分担者: 巽 智秀 大阪大学, 医学部附属病院, 助手 (20397699)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2006年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円); 2005年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
• キーワード: C型慢性肝炎 / CTL / ELISPOT / 免疫モニタリング / インターフェロン治療 / ELISPOT法 / インターフェロン

研究概要

C型肝炎ウイルス(HCV)は、日本における慢性肝障害の原因の大部分を占めるが、進行して肝硬変や肝細胞癌を引き起こす。HCV排除を目指す治療としてインターフェロン(IFN)による治療法が確立されているが、IFN治療時のウイルス排除における、HCVの動態に関してはウイルス量やウイルスのgenotypeの視点から数多く解析されている。一方宿主側因子では、IFN治療の効果予測因子として確立されたものはない。
本研究では、IFN-γELISPOT法を用いてIFN治療における細胞傷害性T細胞(CTL)のHCV蛋白に対する免疫反応を解析することを目的としている。HCV蛋白由来のHLA-classI結合ペプチドを合成し、このペプチドに対するCTLの免疫反応をIFN-γELISPOT法によって検討した。基礎実験として生体より採取したCTLはin vitroでの再刺激は必要なしでELISPOT法での検出が可能であることを確認した。次にペグインターフェロン及びリバビリン併用による治療を受けるC型慢性肝炎患者を対象に治療前、治療開始2週間後、4週間後にCD8陽性Tリンパ球を採取し、HCV由来ペプチド(HCV-Core35,-Core131,-NS3-1073,-NS3-1406)に対する免疫反応をIFN-γELISPOT法にて評価した。
ほとんどの症例において治療前のHCVペプチドに対するIFN-γ産生は非常に低かった。IFN治療後IFN-γ産生の増大は、4種類いずれのHCV由来ペプチドに対しても、SR症例では多く認められたが、TR症例、NR症例ではIFN-γ産生の増大は、低い傾向であった。以上よりHCV排除にHCV特異的CTLが関与しており、HCVの排除にIFN投与早期のCTL免疫反応が関与していることが示唆された。
以上の結果よりIFN-γELISPOT法はC型慢性肝炎患者のCTL免疫反応を評価するのに有用な方法であることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] Natural killer cell-mediated ablation of metastatic liver tumors by hydrodynamic injection of IFNalpha gene to mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Takehara T., Hiramatsu N., et al.
  • 雑誌名: International Journal of Cancer 120 ページ: 1252-1260
• [雑誌論文] Reduced expression and functional impairment of Toll-like receptor 2 on dendritic cells in chronic hepatitis C virus infection (2006)
  • 著者名/発表者名: Yakushijin T., Hiramatsu N., et al.
  • 雑誌名: Hepatology Research 34 ページ: 156-162
  • NAID: 10020405278
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Should aged patients with chronic hepatic C be treated with interferon and ribavirin combination therapy? (2006)
  • 著者名/発表者名: Hiramatsu N., et al.
  • 雑誌名: Hepatology Research 35 ページ: 185-189
  • NAID: 10018774942
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Early decline of hemoglobin correlates with progression of ribavirin induced hemolytic anemia during interferon plus ribavirin combination therapy in chronic hepatitis C (2006)
  • 著者名/発表者名: Oze T., Hiramatsu N., et al.
  • 雑誌名: Hepatology Research 41 ページ: 862-872
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Reduced expression and functional impairment of Toll-like receptor 2 on dendritic cells in chronic hepatitis C virus infection (2006)
  • 著者名/発表者名: Yakushijin T, Kanto T, Inoue M, Oze T, Miyazaki M, Itose I, Miyatake H, Sakakibara M, Kuzushita N, Hiramatsu N, Takehara T, Kasahara A, Hayashi N.
  • 雑誌名: Hepatol Res. 34 ページ: 156-162
  • NAID: 10020405278
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Should aged patients with chronic hepatitis C be treated with interferon and ribavirin combination therapy? (2006)
  • 著者名/発表者名: Hiramatsu N, Oze T, Tsuda N, Kurashige N, Koga K, Toyama T, Yasumaru M, Kanto T, Takehara T, Kasahara A, Kato M, Yoshihara H, Katayama K, Hijioka T, Hagiwara H, Kubota S, Oshita M, Haruna Y, Mita E, Suzuki K, Ishibashi K, Hayashi N.
  • 雑誌名: Hepatol.Res. 35 ページ: 185-189
  • NAID: 10018774942
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Early decline of hemoglobin correlates with progression of ribavirin-induced hemolytic anemia during interferon plus ribavirin combination therapy in patients with chronic hepatitis C. (2006)
  • 著者名/発表者名: Oze T, Hiramatsu N, Kurashige N, Tsuda N, Yakushijin T, Kanto T, Takehara T, Kasahara A, Kato M, Yoshihara H, Katayama K, Kubota S, Hijioka T, Ishibashi K, Oshita M, Hagiwara H, Haruna Y, Mita E, Tamura S, Hayashi N.
  • 雑誌名: J.Gastroenterol. 41 ページ: 862-872
  • NAID: 10020626268
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] IL-13 in chronic hepatitis C infection (2006)
  • 著者名/発表者名: Inoue M., Hiramatsu N., et al.
  • 雑誌名: Journal of Hepatology 45 ページ: 190-196
• [雑誌論文] Impaired function of dendritic cells circulating in patients infected with hepatitis C virus who have persistently normal alanine aminotransferase levels (2006)
  • 著者名/発表者名: Kanto T., Hiramatsu N., et al.
  • 雑誌名: Intervirology 49 ページ: 58-63
• [雑誌論文] Qwick generation of fully mature denritic cells from monocytes with OK432, low-dose prostanoid, and interferon-alpha as potent immune enhnacers (2006)
  • 著者名/発表者名: Sakakibara M., Hiramatsu N., et al.
  • 雑誌名: Journal of Immunotherapy 29 ページ: 67-77
• [雑誌論文] Impairment of natural killer cell and dendritic cell functions by the soluble form of MHC class I-related chain A in advanced human hepatocellular carcinomas. (2005)
  • 著者名/発表者名: Jinushi M, Hiramatsu N
  • 雑誌名: Journal of Hepatology 43 ページ: 1013-1020
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Impairment of natural killer cell and dendritic cell functions by the soluble form of MHC class I-related chain A in advanced human hepatocellular carcinoma. (2005)
  • 著者名/発表者名: Jinushi M, Takehara T, Tatsumi T, Hiramatsu N, Sakamori R, Yamaguchi S, Hayashi N.
  • 雑誌名: J.Hepatol. 43 ページ: 1013-1020
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Alteration in gene expression profile by full-length hepatitis B genome (2005)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi F., Hiramatsu N., et al.
  • 雑誌名: Intervirology 48 ページ: 77-83
• [雑誌論文] Impairment of natural killer cell and dendritic cell functions by the soluble form of MHC class I-related chain A in advanced human hepatocellular carcinoma (2005)
  • 著者名/発表者名: Jinushi M., Hiramatsu N., et al.
  • 雑誌名: Journal of Hepatology 43 ページ: 1013-1020