| 研究課題/領域番号 |
17591348
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
外科学一般
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| 研究機関 | 東海大学 |
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研究代表者 |
猪口 貞樹 東海大学, 医学部, 教授 (60160008)
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| 研究分担者 |
伊東 功 東海大学, 医学部, 講師 (70297258)
梅澤 和夫 東海大学, 医学部, 講師 (30349344)
関 知子 東海大学, 医学部, 講師 (00316605)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
3,610千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 210千円)
2007年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2006年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
2005年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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| キーワード | 抗菌ペプチド / 培養皮膚 / 遺伝子導入 / 再生医療 / 重症熱傷 / ディフェンシン / MRSA / MDRP / 移植、再生医療 / ウイルス / ヒト抗菌ペプチド / ウイルスベクター / 表皮細胞 / 線維芽細胞 |
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| 研究概要 |
目的:重症熱傷に対する培養皮膚移植では、培養皮膚が細菌感染に脆弱なため良好な生着が得られない場合がある。ヒト抗菌ペプチドであるhBD-2、3の遺伝子を皮膚細胞に導入し、感染に抵抗性の強い培養皮膚を作製するのが本研究の目的である。
方法:ヒト培養表皮細胞からhBD-2および3のcDNAをクローニングし、hBD-2および3c-DNA組み換えアデノウイルスを作製。培養ヒト表皮細胞およびヒト線維芽細胞へ感染させて当該遺伝子を導入後、導入遺伝子の発現と細胞培養上清の各種標準菌株・熱傷患者由来抗生剤耐性菌に対する殺菌的抗菌活性を計測した。
結果:(1)組み換えアデノウイルスの感染によりヒト皮膚細胞への当該遺伝子の導入・発現が確認された。(2)hBD-2遺伝子導入表皮細胞および線維芽細胞培養上清の各種菌株に対するコロニー抑制率は、S.aureus標準菌株、多剤耐性S.aureus(MRSA)に対しては非常に低く、E.coli標準菌株、P.aeruginosa、多剤耐性P.aeruginosa(MDRP)には弱い抗菌活性を示した。(3)hBD-3遺伝子導入表皮細胞および線維芽細胞培養上清のコロニー抑制率は、S.aureus標準菌株67.8〜86.0%、MRSA61.5〜70.7%で、グラム陽性球菌に対しては高い殺菌的抗菌活性を認めた。一方、E.coli標準菌株、P.aeruginosa、MDRPに対してはほとんど抗菌活性を示さなかった。
結語:hBD-3遺伝子導入細胞を用いることにより、MRSA感染創に対する培養皮膚移植の成績向上が期待できる。グラム陰性桿菌、特にMDRPに対しては別途の対応が必要と考えられる。
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