分子生物学的手法を用いた抗癌剤感受性試験

• 研究課題/領域番号: 17591435
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 久保田 哲朗 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00118944)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2006年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円); 2005年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
• キーワード: 抗癌剤感受性試験 / cisplatin / 5-fluorouracil / gadd153 / p21 / c-jun / 抗癌剤 / 感受性 / 分子標的 / 化学療法 / 分子マーカー / ヒト胃癌細胞株 / ヌードマウス / mRNA / MTTアッセイ

研究概要

抗癌剤に対するnon-responderの早期の抽出は重要である。本研究は治療早期に癌化学療法の効果を予測しうるassayの開発を目的とした。【方法と対象】化学療法開始早期の細胞死の指標としてgadd153,p21,c-junのmRNA発現レベルを用いた。【結果】(in vitro)ヒト胃癌細胞株TMK-1,MKN-45,MKN-74、3種全てにおいて,増殖阻害の明確でない早期(抗癌剤曝露後24時間)での各遺伝子発現レベルは、後期(抗癌剤曝露後72時間後)の増殖阻害効果を予測し、各々のcut off値を算定しえた。TMK-1の高濃度5-FUでは,gadd153で18.5倍,p21で39.3倍,c-junで2.2倍で、低濃度ではいずれも遺伝子発現は対象群の0.6-1.5倍にとどまった。(in vivo)ヒト胃癌細胞株TMK-1をnude mouseに皮下移植し腫瘍を作成したmodelにおいて、in vitroと同様に,腫瘍増殖抑制を認めた高濃度5-FU, CDDPでは、薬剤投与後48時間でのgadd153,p21,c-junの発現増強を認めた。更に、ヒト検体を用いた各遺伝発現の検討を行い、同一胃癌腫瘍内、同一正常胃粘膜内における発現のばらつきが小さいこと、個人間の胃癌腫瘍内、正常粘膜内における発現のばらつきが小さいこと(GAPDHとの比が1.0近傍)を確認した。また、実際に術前化学療法を受けた11例について、遺伝子発現(治療後早期での内視鏡による生検組織を用いて)と臨床効果が相関することが強く示唆された。本研究によって本アッセイの臨床応用の可能性が強く示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] 消化器癌化学療法の最前線 : 大腸癌化学療法につい (2007)
  • 著者名/発表者名: 久保田哲朗, 和田則仁, 北島政樹
  • 雑誌名: 日本消化器病学会雑誌 104 ページ: 177-185
• [雑誌論文] Gastrointestinal stromal tumor (GIST) and imatinib. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kubota T, et al.
  • 雑誌名: Int. J. Clin. Oncol. 11 ページ: 184-189
  • NAID: 10018174282
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Chemosensitivity and resistance testing : to be "standard" or to be individualized, that is the question. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kubota T, et al.
  • 雑誌名: Gastric Cancer 9 ページ: 82-87
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Erythrocytes with T-stabilized hemoglobin as a therapeutic tool for postischemic liver dysfunction. (2006)
  • 著者名/発表者名: Suganuma, K, Kubota T, et al.
  • 雑誌名: Antioxid. Redox Signal. 8 ページ: 1847-1855
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Endoscopic classifications as diagnostic factors of peptic ulcer and early gastric cancer - a possible reason why Helicobacter pylori infection causes gastric ulcers along lesser curvature. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yoshida, M., Kubota, T., et al.
  • 雑誌名: Aliment. Pharmacol. Ther. symp 2 ページ: 303-310
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Chemosensitivity and resistance testing : to be "standard" or to be individualized, that is the question. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kubota, T., Weisenthal, L.
  • 雑誌名: Gastric Cancer 9 ページ: 82-87
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Gastrointestinal stromal tumor (GIST) and imatinib. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kubota, T.
  • 雑誌名: Int.J.Clin.Oncol. 11 ページ: 184-189
  • NAID: 10018174282
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Erythrocytes with T-stabilized hemoglobin as a therapeutic tool for postischemic liver dysfunction. (2006)
  • 著者名/発表者名: Suganuma, K., Tsukada, K., Kashiba, M., Tsuneshige, A., Furukawa, T., Kubota, T., Goda, N., Kitajima, M., Yonetani, T., Suematsu, M.
  • 雑誌名: Antioxid.Redox Signal. 8(9) ページ: 1847-1855
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Endoscopic classifications as diagnostic factors of peptic ulcer and early gastric cancer-a possible reason why Helicobacter pylori infection causes gastric ulcers along lesser curvature. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yoshida, M., Saikawa, Y., Hosoda, S., Kumai, K., Kubota.T., Ishikawa, H., Nakamura, T., Nakamura R., Kameyama, K., Takahashi, S., Kurihara, N., Kitajima, M.
  • 雑誌名: Aliment.Pharmacol.Ther.symp 2 ページ: 303-310
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Twelve years' progress in surgery for perforated gastric and duodenal ulcers : a retrospective study of indications for laparoscopic surgery, post-operateive course and the influence of Candida infection. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, T., Yoshida, M., Otani, Y., Kameyama, K., Ishikawa, H., Kumai, K., Kubota, T., Saikawa, Y., Kitajima, M.
  • 雑誌名: Aliment.Pharmacol.Ther.symp ser2 ページ: 297-302
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Chemosensitivity and resistance testing : to be "standard" or to be individualized, that is the question (2006)
  • 著者名/発表者名: Kubota, T., Weisenthal, L.
  • 雑誌名: Gastric Cancer 9 ページ: 82-87
• [雑誌論文] Gastronitestinal stromal tumor (GIST) and imatinib (2006)
  • 著者名/発表者名: Kubota, T.
  • 雑誌名: Int. J. Clin. Oncol. 11 ページ: 184-189
• [雑誌論文] 進行胃癌の術前化学療法 (2006)
  • 著者名/発表者名: 久保田哲朗
  • 雑誌名: 消化器外科 29 ページ: 1303-1309
• [雑誌論文] 胃癌術後補助化学療法(S-1)における抗癌剤感受性試験の検証(JACCRO GC-04) (2006)
  • 著者名/発表者名: 久保田哲朗
  • 雑誌名: 医学のあゆみ 217(9) ページ: 869-873
• [雑誌論文] 抗癌剤感受性試験を用いた個別化癌化学療法 (2006)
  • 著者名/発表者名: 久保田哲朗
  • 雑誌名: Surgery Frontier 13(1) ページ: 15-19
• [雑誌論文] Tyrosine kinase inhibitor SU6666 inhibits peritoneal dissemination of gastric cancer via suppression of tumor angiogenesis. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tokuyama, J, Kubota T, et al.
  • 雑誌名: Anticancer Research 25 ページ: 17-22
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] TSU-68 (SU6668) inhibits local tumor growth and liver metastasis of human colon cancer xenografts via anti-angiogenesis. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yozrozuya, K, Kubota T, et al.
  • 雑誌名: Oncology Report 14 ページ: 677-682
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Tyrosine kinase inhibitor SU6666 inhibits peritoneal dissemination of gastric cancer via suppression of tumor angiogenesis. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tokuyama, J., Kubota, T., Saikawa, Y., Yoshida, M., Furukawa, T., Otani, Y., Kumai, K., Kitajima, M.
  • 雑誌名: Anticancer Research 25 ページ: 17-22
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Gastric cancer mimicking submucosal tumor diagnosed by laparoscopic biopsy. (2005)
  • 著者名/発表者名: Takahashi, T., Otani, Y., Yoshida, M., Furukawa, T., Kameyama, K., Akiba, Y., Saikawa, Y., Kubota, T., Kumai, K., Kuramochi, S., Mukai, M., Ishii, H., Kitajima, M.
  • 雑誌名: J.Laparoscopic ＆ Advanced Surgical Techniques. 15(1) ページ: 51-56
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Minimally invasive surgery for gastric cancer-toward confluence of two major streams : review. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kitagawa, Y., Kitano, S., Kubota, T., Kumai, K., Otani, Y., Saikawa, Y., Yoshida, M., Kitajima, M.
  • 雑誌名: Gastric Cancer 8 ページ: 103-110
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] TSU-68 (SU6668) inhibits local tumor growth and liver metastasis of human colon cancer xenografts via anti-angiogenesis. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yozrozuya, K., Kubota, T., Watanabe, M., Hasegawa, H., Ozawa, S., Kitajima, M., Chikahisa, L.M., Yamada, Y.
  • 雑誌名: Oncology Report 14 ページ: 677-682
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] 薬剤感受性による胃癌化学療法の選択-現状と問題点- (2005)
  • 著者名/発表者名: 久保田哲朗
  • 雑誌名: 胃と腸 40(7) ページ: 1023-1026
• [雑誌論文] 手術不能進行再発胃癌に対する化学療法 (2005)
  • 著者名/発表者名: 久保田哲朗
  • 雑誌名: コンセンサス胃癌の治療.2005〜2007 4(2) ページ: 88-91
• [雑誌論文] 癌治療専門医制度を考える.日本癌治療学会 (2005)
  • 著者名/発表者名: 久保田哲朗, 西山正彦, 吉野肇一
  • 雑誌名: 癌の臨床 51(6) ページ: 421-426
• [雑誌論文] 特集;包括医療の導入による影響と対策、6.消化器外科領域における包括医療の影響と対策. (2005)
  • 著者名/発表者名: 久保田哲朗
  • 雑誌名: 日本外科学会雑誌 106(10) ページ: 649-653
• [雑誌論文] テーラーメイドの胃癌化学療法 (2005)
  • 著者名/発表者名: 久保田哲朗
  • 雑誌名: 外科治療 93(5) ページ: 552-556
• [雑誌論文] 抗癌剤感受性と遺伝子多型 (2005)
  • 著者名/発表者名: 久保田哲朗
  • 雑誌名: Bitoherapy 19(6) ページ: 471-476
• [図書] Chemosensitivity volume 2 In vivo models imaging, and molecular regulators Blumenthal R. D.、 pp., : Real timeRT-PCR (Taqman^【○!R】) of tumor mRNA to predict sensitivity of specimens to 5-fluorouracil. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kubota T, et al.
  • 出版者: Human Press Inc., New Jersey.
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より