| 研究課題/領域番号 |
17591567
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
整形外科学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
村瀬 剛 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (50335361)
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| 研究分担者 |
吉川 秀樹 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (60191558)
森友 寿夫 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (00332742)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
3,790千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 390千円)
2007年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2006年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2005年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | 細胞周期関連遺伝子 / 末梢神経 / 軸索伸展 |
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| 研究概要 |
サイクリン依存性キナーゼインヒビター(CDKI)のなかのCip/Kipファミリー(p21、p27、p57)は、神経軸索伸展に阻害的に働くRho/Rho-kinase経路の活性をそれぞれ抑制することが報告されているが、CDKIの他のファミリーであるINK4ファミリー(p15,p16,p18,p19)については細胞周期関連以外の機能を解明した報告はない。そこでINK4ファミリーが、Cip/Kipファミリーと同様に神経軸索伸展作用を有し、末梢神経損傷後の機能回復に貢献しうるかどうかを解明するために研究を開始した。まず最初のステップとして、INK4ファミリー遺伝子のクローニングを行った。次にそれぞれのINK4ファミリーのN端、およびC端にmyc-tagを結合させたベクターを作製し、HEK293細胞にトランスフェクションを行い、その細胞内局在の検討を行った。INK4ファミリーはいずれも核内に発現することがわかった。またINK4ファミリーを含むアデノウイルスを作製し、初代培養後根神経節細胞に感染させたところ、いずれも核内に発現が認められ、軸索伸展、神経突起数、神経突起の枝分かれの数について優位な変化は認められなかった。また初代培養小脳顆粒細胞を用いて、同様の実験を行ったがこちらについても優位な差は得られなかった。またp21、p27がそれぞれスレオニン残基、セリン残基がリン酸化を受けることによってその局在を核内から細胞質へと変化させることから、INK4ファミリー遺伝子でも同様にスレオニン残基、セリン残基に対する変異体を作製し、その局在の観察を行ったが、いずれもその局在は核内であり、細胞質に局在する変異体は認められなかった。
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