| 研究課題/領域番号 |
17591652
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
麻酔・蘇生学
|
|---|
| 研究機関 | 東京医科大学 |
|---|
研究代表者 |
松本 晶平 東京医科大学, 医学部, 講師 (30256250)
|
|---|
| 研究分担者 |
室園 美智博 東京医科大学, 医学部, 講師 (70276947)
渡辺 泰雄 日本薬科大学, 薬学部, 教授 (70183720)
一色 淳 東京医科大学, 医学部, 教授 (60074796)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,700千円 (直接経費: 3,700千円)
2006年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2005年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
|
|---|
| キーワード | 吸入麻酔薬 / CaMKII / 免疫沈降法 / 脳保護作用 / NMDA / NR2 / リン酸化チロシン / 免疫沈降 / NMDAレセプター / チロシンリン酸化 / イソフルレン |
|---|
| 研究概要 |
我々は、マウスに吸入麻酔薬イソフルレン、セボフルレンを吸入させた後、断頭により脳虚血を作成し、脳内N-methyl-D-aspartate(NMDA)レセプターサブユニット:NR2A、NR2Bのチロシンリン酸化を測定した。また、それらサブユニットとカルシウム・カルモジュリン依存性プロテインキナーゼII(CaMKII)との相互作用(インタラクション)を測定した。測定には、免疫沈降法及び、ウェスタンブロット法を用いた。
方法:雄性C57/blackマウスを用い、断頭により虚血を作成する。断頭後に37cCの生食で3分から5分のインキュベートを行い、-80℃で保存した。断頭前にイソフルレンおよびセボフルレン1MAC、2MACの吸入を行った。
マウス頭部を冷凍グローブボックス内で切り出し、脳を摘出、大脳半球を分離し、ホモジナイズ後、NR2A、NR2Bのチロシンリン酸化蛋白に対して、免疫沈降を行った。SDS-PAGEを行い、抗NR2A抗体、抗NR2B抗体でウェスタンブロットを行った。また、リン酸化CaMKIIとNR2A、NR2Bのインタラクションを免疫沈降で測定した。
結果:イソフルレン、セボフルレン吸入により、NR2Aのリン酸化は低下していた,NR2Bではそれが明らかではなかった。この傾向は、吸入麻酔薬の濃度にある程度依存していると推察される、リン酸化CaMKIIとNR2A、NR2Bのインタラクションについては、NR2A、NR2Bともに吸入麻酔薬の影響が確認できるに至っていない。
考察:イソフルレン、セボフルレンによるCaMKIIのランスロケーション抑制が、リン酸化したCaMKIIとNR2Aサブユニットのインタラクションを低下させ、チロシンリン酸化を減少させることによって、NMDAレセプターの活性化を抑え、脳保護作用をもたらしていると考えられた。
|
