研究課題
基盤研究(C)
25日齢の雌ラットの発育卵胞を摘出して器官培養を行う系を用いて実験を行った。卵胞摘出前にequine chorionic gonadotropinを作用させると、TUNEL法によるアポトーシスの発現が有意に減少することが示された。同時にこのアポトーシス発現の減少に合わせてカスパーゼ3のmRNAの発現が減少していた。このことより、卵胞におけるアポトーシスの発現にはカスパーゼ3が関与していることが示唆された。さらに、Fas-Fas ligand系とnitric oxide (NO)系が卵巣アポトーシスを調節している可能性も示唆されているので、今回この2つの系が相互に関連しあっているか否かを、ラット卵巣顆粒膜細胞培養系を用いて検討した。Fas ligand添加により培養系細胞は細胞死を呈するが、同時にカスパーゼ阻害剤を添加すると細胞死を抑制することができた。また、NO供給剤であるインターフェロンγの同時添加によってもFas ligandの細胞死誘導を抑制することができた。これらより、卵巣局所において両系の間での調節が行われていることが推察できた。また、線虫における腫瘍抑制因子のヒトでのアナログであるhScribの癌組織における細胞死での役割を検討するため、Hela細胞を用いたアポトーシス発現の検討とhScribの関係を観察した。その結果、カスパーゼによるhScribの崩壊がアポトーシスに重要なステップとなっていることが推察された。本研究により、卵巣機能不全や排卵障害、早発閉経の病態の解明、さらには悪性腫瘍治療における生殖機能温存を考慮した治療法の開発が進むことが期待される。
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