| 研究課題/領域番号 |
17591942
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
機能系基礎歯科学
|
|---|
| 研究機関 | 長崎大学 |
|---|
研究代表者 |
岡元 邦彰 長崎大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 助教授 (10311846)
|
|---|
| 研究分担者 |
加藤 有三 長崎大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 教授 (20014128)
西下 一久 長崎大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 助手 (20237697)
坂井 詠子 長崎大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 助手 (10176612)
中山 浩次 長崎大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 教授 (80150473)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2006年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2005年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
|
|---|
| キーワード | Arg-gingipain / cysteine proteinase / Lys-gingipain / periodntitis disease / Peophyromonas gingivalis / transport / periodontal disease / Porphyromonas gingivalis |
|---|
| 研究概要 |
歯周病原性細菌Porphyromonas gingivalis(P.g.)の産生する2つのシステインプロテアーゼRgpとKgpは歯周疾患の発症および進行に重要な役割をしていると考えられている。非常におもしろいことに、これら2つの酵素はプロテアーゼドメインと血球凝集素ドメインの2つの機能ドメインをもつ構造上類似した酵素である。今回、2つの酵素の中の一つKgpを用いP.g.を利用した発現系を確立することを試み、活性型のKgpを発現させることに成功した。さらに、Kgpの活性中心に点変異を導入し、活性中心の決定を行った。Kgpの予測される活性中心には248番目と249番目に2つのシステインが存在しているため、これらつをアラニンに置換したコンストラクトを作製し、Kgp発現系と同様の手法を用い変異体を作製した。両方のシステインをアラニンに置換したものではウエスタンブロット法ではKgpの免疫反応物が認められるものの、この変異体には活性が認められないことから、これらのどちらか、あるいは両方がKgpの活性に必要であることが明らかとなった。そこで、さらにそれぞれのシステインをアラニンに置換したコンストラクトを作製したところ、248番目のシステインをアラニンに置換したものでは活性が認められたが、249番目のシステインをアラニンに置換したものでは活性が認められなかった。以上のことから、Kgpの活性には249番目のシステイン残基が必要であることが明らかとされた。
|
