| 研究概要 |
目的:生体内に存在する自然免疫に関与する抗菌ペプチドを用いて口腔感染症や口腔癌の治療薬として応用することを目的とした.その結果は以下に示す
1.口腔癌細胞移植ヌードマウスによるhCAP18ペプチドのin vivoにおける治療効果
ヒト培養口腔扁平上皮癌細胞をヌードマウス背部皮下または舌への同所移植を行い,合成ペプチドを投与し,in vivoでの抗腫瘍効果を判定した.その結果,腹腔内,腫瘍局所に連日,又は隔日局所投与を行うことで,腫瘍増殖抑制効果が認められたが,静脈内投与では無効であった.
2.口腔癌および正常上皮細胞へのhCAP18/CAHP遺伝子導入による細胞形質の変化
ヒト培養口腔扁平上皮癌細胞SAS-H1および正常ヒト上皮細胞HaCaTを用いて,CAMP遺伝子を導入し高発現安定細胞を作製し,本細胞を用いて,細胞形質の変化を検討したところ,遺伝子導入による細胞増殖の変化はみられなかったが,CAMP遺伝子を導入し構成的に蛋白質発現を有するSAS-H1細胞では,hCAP18ペプチドで誘導されるアポトーシスが抑制され,その結果,抗腫瘍効果が減弱した.
3.hCAP18/CAMP遺伝子導入細胞の感染抵抗性の検討
上記で得られたCAMP遺伝子導入細胞を用いて.本細胞が,nativeな活性ペプチドを産生分泌することを抗hCAP18抗体によるウエスタンブロットで,蛋白質発現と培養上清での確認を行った.そこで,菌体成分による細胞処理による生存細胞の変化を検討下結果,CAMP導入細胞では,菌体成分による殺細胞効果が抑制されていた.
4.hCAP18合成ペプチドによる樹状細胞誘導と癌免疫療法への応用
ヒト末梢血から単球を分離し,hCAP18合成ペプチドによる樹状細胞誘導の有無を,細胞表面抗原の解析と形態変化を指標に検討した結果,CAMP遺伝子導入癌細胞が産生するhCAP18ペプチより,樹状細胞の分化誘導が促進された.
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