| 研究課題/領域番号 |
17592133
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
矯正・小児系歯学
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| 研究機関 | 新潟大学 |
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研究代表者 |
松山 順子 新潟大学, 医歯学系, 助手 (30293236)
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| 研究分担者 |
佐藤 拓一 東北大学, 大学院歯学研究科, 講師 (10303132)
富沢 美恵子 (富沢 美惠子) 新潟大学, 医歯学系, 教授 (50107786)
高橋 信博 東北大学, 大学院歯学研究科, 教授 (60183852)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2006年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2005年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | PCR法 / Real-time PCR法 / 小児 / 細菌叢 / う蝕 / 歯周炎 / real-time PCR法 |
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| 研究概要 |
申請者らは、これまでの研究でPCR-RFLP (Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism)法を用いて、口腔細菌叢の変化を"定性的"に検出する方法を確立してきた。本研究では、さらにそれを発展させ、"定量的"な検出が可能なリアルタイムPCR法により細菌叢のシフトを解析・モニタリングする方法を確立し,臨床応用を試みることを目的とした。2年間の本研究では、リアルタイムPCR法を用いて小児の歯垢細菌叢の構成細菌Streptococcus、Veillonellaについて定量的に解析した。小児44名(1歳〜16歳)の口腔内から(健康な歯面)歯垢を採取し解析の試料とした。歯垢の採取にあたっては、研究の趣旨を十分に説明、同意を得た上で行った。採取した歯垢から通法に従いDNAを抽出し、リアルタイムPCR法により歯垢中の細菌を定量的に検出した。検出系として、SYBR Green Iによるインカレーションダイを用い、Streptococcus、S.mutans、Veillonellaをターゲットとしたprimersを用いて、定量的検出を行った。健康な歯面上の歯垢では、Streptococcusの割合(平均約20%)は、Veillonellaの割合(平均約2%)に比較して高い傾向を示した。Streptococcusの構成は、各試料(被験者)において多様性が認められたが、Veillonellaの割合は、比較的一定で、低年齢からも恒常的に存在していると考えられた。さらに、年齢に伴うStreptococcus, Veillonellaの構成割合の変化は認められなかった。今後は、Caries歯面上の歯垢を解析し、HealthyとCariesの歯垢細菌叢の比較・検討の必要性が考えられた。
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