| 研究課題/領域番号 |
17658038
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| 研究種目 |
萌芽研究
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
応用微生物学
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| 研究機関 | 筑波大学 |
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研究代表者 |
中島 敏明 筑波大学, 大学院生命環境科学研究科, 助教授 (80241777)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2006年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
2005年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
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| キーワード | メタゲノムスクリーニング / メタン酸化細菌 / メタンモノオキシゲナーゼ |
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| 研究概要 |
メタンモノオキシゲナーゼは、メタン→メタノールを常温常圧下で触媒することから、産業上きわめて価値が高い。しかし既知のタンモノオキシゲナーゼ遺伝子は大腸菌での発現が極めて弱く、実用化には至っていない。そこで申請者は発想を逆転させて、既得の遺伝子の発現を試みるのでは無く、「大腸菌で発現可能な遺伝子」を直接自然界から探し出すことを考えた。
昨年度、メタン資化生菌のDNAのみを^<13>Cに置き換えることを目的に、各種土壌サンプルを^<13>Cでラベルしたメタン存在下に暴露後、全DNAを抽出し、超遠心により^<13>C-DNAを選択的に回収して、メタン資化性菌のみからなるメタゲノムライブラリーを構築した。本ライブラリから16SrDNAを増幅、クローン解析を行った結果、未知の新規メタン資化性菌が多数含まれていることを確認した。次にここからスクリーニングに十分な長さの遺伝子断片を回収し、大腸菌に導入するための基本技術を確立した。
今年度はこのライブラリーからhybridization法によりメタンモノオキシゲナーゼオペロンの取得を行った。その結果、5,000クローンのライプラリーから1種類の新規なparticulate MMOの取得に成功した。
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