| 研究課題/領域番号 |
17659272
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| 研究種目 |
萌芽研究
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
代謝学
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| 研究機関 | 群馬大学 |
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研究代表者 |
泉 哲郎 群馬大学, 生体調節研究所, 教授 (00212952)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2006年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
2005年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
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| キーワード | 調節性分泌 / 分泌顆粒 / インスリン / グルコース / Rab蛋白質 |
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| 研究概要 |
これまで申請者らは、低分子量GTPase Rab27aに変異があるashenマウス膵β細胞において、グルコース刺激特異的にインスリン分泌が低下しており、個体レベルでも耐糖能が低下していることを明らかにしている(J.Clin.Invest.発表)。本研究では、Rab27a機能異常によるインスリン分泌障害のメカニズムを明らかにすることを目的とする。まずインスリン開口放出機構を形態学的に解析するために、インスリン-EGFP融合蛋白質を、マウス膵β細胞にアデノウイルスを用いて発現させ、顆粒を可視化した。次に細胞膜近傍の蛍光のみ検知する全反射顕微鏡を用いて開口放出過程を直接観察する系を構築した。Ashen β細胞と正常β細胞を、それぞれグルコース、KClで刺激して開口放出過程を生細胞で観察すると、Rab27aは、細胞膜ドッキングの前の、顆粒の動員過程に関与していることが示唆された。一方、Rab27aエフェクターであるGranuphilinは、その欠損膵β細胞での解析により、顆粒の細胞膜ドッキング過程に、直接機能することがわかった(以上、発表準備中)。またGranuphilinのC2ドメインは、負電荷をもつ細胞膜脂質に対する親和性を比較的弱いながらも有しており(Mol.Biol.Cell発表)、細胞膜上のSNARE蛋白質syntaxin-laとの結合活性とともに、顆粒を細胞膜にドッキングさせる過程に寄与することが示唆された。
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