新規核内タンパク質HEXIM1による核内レセプター選択的活性化機構の解明

• 研究課題/領域番号: 17659282
• 研究種目: 萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 内分泌学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 田中 廣壽 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (00171794)
• 研究期間 (年度): 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 2,900千円 (直接経費: 2,900千円); 2005年度: 2,900千円 (直接経費: 2,900千円)
• キーワード: 内分泌学 / 分子生物学 / DNA / 転写因子 / 転写伸張 / 遺伝子 / 核内レセプター / RNA

研究概要

計画1
HEXIM1によるグルココルチコイドレセプター(GR)機能抑制機構の解明
・HEXIM1とGRの相互作用に関わる各々のドメインを解析し、HEXIM1の中央部に存在する核移行シグナル、GRのリガンド結合領域のN末端部分であることを同定した。その際、GRはHEXIM1の核移行シグナルと低分子核内RNA 7SKの結合を阻害することがわかった。
・HEXIM1によってGRの核内局在が変化することを共焦点レーザー顕微鏡を用いて明らかにした。HEXIM1の過剰発現により、GRの核内局在は、転写共役因子TIF2との共局在パターンからHEXIM1との細顆粒状の局在パターンに変化した。
・HEXIM1の転写抑制作用に関して、GR、MRのみならず他の核内レセプターや転写因子の機能に与える影響を検討し、GRやMRにきわめて選択的であることを明らかにした。核内レセプターにおいても、PPARなどには影響はなかった。また、bHLH-PAS型転写因子であるAhRやArntも影響を受けなかった。
計画2
HEXIM1の組織における発現と機能の解明
・ラビットで作成した抗HEXIM1抗体を用いてヒト各組織におけるHEXIM1の発現を免疫組織染色で検討した。ヒト心臓においては、冠状動脈の内皮、血管平滑筋、そして、心筋においてHEXIM1の発現が認められた。また、HEXIM1はいずれの細胞においても核に局在していた。各組織におけるHEXIM1の機能を明らかにするために、Cre-loxPシステムを用いてHEXIM1を誘導性に発現可能なアデノウイルスを作成したとともに、その各種細胞における導入、発現効率を検証した。

研究成果

• [雑誌論文] Roxithromycin specifically inhibits development of collagen induced arthritis and production of proinflammatory cytokines by human T cells and macrophages (2005)
  • 著者名/発表者名: Urasaki Y, Nori M, Iwata S, Sasaki T, Hosono O, Kawasaki K, Tanaka H, Rang NH, Ikeda E, Morimoto C
  • 雑誌名: J Rheumatol 32(9) ページ: 1765-1774
• [雑誌論文] Nuclear translocation of UDCA by the glucocorticoid receptor is required to reduce TGF-betal-induced apoptosis in rat hepatocytes (2005)
  • 著者名/発表者名: cola S, Amaral JD, Castro RE, Ramalho RM, Borralho PM, Kren BT, Tanaka H, Steer CJ, Rodrigues CM
  • 雑誌名: Hepatology 42(4) ページ: 925-934
• [雑誌論文] HEXIM1 forms a transcriptionally abortive complex with glucocorticoid receptor without involving 7SK RNA and positive transcription elongation factor b (2005)
  • 著者名/発表者名: Shimizu N, Ouchida R, Yoshikawa N, Hisada T, Watanabe H, Okamoto K, Kusuhara M, Handa.H, Morimoto C, Tanaka H
  • 雑誌名: Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102(24) ページ: 8555-8560
• [雑誌論文] TCR Engagement Increases Hypoxia-Inducible Factor-1 Protein Synthesis via Rapamycin-Sensitive Pathway under Hypoxic Conditions in Human Peripheral T Cells (2005)
  • 著者名/発表者名: Nakamura H, Makino Y, Okamoto K, Poellinger L, Ohnuma K, Morimoto C, Tanaka H
  • 雑誌名: J.Immunol. 174(12) ページ: 7592-7599
• [雑誌論文] CD26 Mediates Dissociation of Tollip and IRAK-1 from Caveolin-1 and Induces Upregulation of CD86 on Antigen-Presenting Cells (2005)
  • 著者名/発表者名: Ohnuma K, Yamochi T, Uchiyama M, Nishibashi K, Iwata S, Hosono O, Kawasaki H, Tanaka T, Dang NH, Morimoto C
  • 雑誌名: Biol.Cell.Biol. 25(17) ページ: 7743-7757
• [雑誌論文] The distinct agonistic properties of the phenylpyrazolosteroid cortivazol reveal interdomain communication in the glucocorticoid receptor (2005)
  • 著者名/発表者名: Yoshikawa N, Yamamoto K, Shimizu N, IYamada S, Morimoto C, Tanaka H
  • 雑誌名: Mol.Endocrinol. 19(5) ページ: 1110-1124