生細胞を用いたリアルタイムイメージングによるヘルペスウイルス制御因子の機能解析

• 研究課題/領域番号: 17689020
• 研究種目: 若手研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: ウイルス学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 川口 寧 東京大学, 医科学研究所, 准教授 (60292984)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 28,470千円 (直接経費: 21,900千円、間接経費: 6,570千円); 2007年度: 8,840千円 (直接経費: 6,800千円、間接経費: 2,040千円); 2006年度: 9,230千円 (直接経費: 7,100千円、間接経費: 2,130千円); 2005年度: 10,400千円 (直接経費: 8,000千円、間接経費: 2,400千円)
• キーワード: ヘルペスウイルス / リアルタイムイメージング / HSV / 可視化 / 組み換えウイルス

研究概要

ダイナミックな動態を示すウイルス因子の解析には、同一の生細胞をリアルタイムで、連続的に観察するといったウイルス因子の動態解析が極めて重要となってくる。本研究では、最新のイメージング技術を駆使して、生きた感染細胞において、HSV(herpes simplex virus)がコードする様々なウイルス因子の動態を可視化する。そして、従来の研究手法では見いだせずにいた、ウイルス因子の新たな側面を明らかにし、HSV増殖機構の新たなパラダイムを構築することを目的とする。本年度は、HSVのカプシドタンパク質UL35、局在が異なる2つのテグメントタンパク質UL49、エンベロープタンパク質gBをそれぞれVenus、mPFR、ECFPで標識した組み換えウイルスYK608を用いて、感染細胞の詳細な時空間的リアルタイムイメージング解析を行った。その結果、細胞の細胞の基底面にウイルス粒子が成熟する場が複数形成されることを明らかにした。また、その場には宿主細胞のオルガネラであるトランスゴルジネットワークのマーカーが特異的に集積することが明らかになった。つまり、HSVの最終エンベロープ獲得の場がトランスゴルジネットワークであることが明らかになった。

研究成果

• [雑誌論文] PILRa is a herpes simplex-1 entry co-receptor that associates with glycoprotein B (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Satoh et al
  • 雑誌名: Cell 132 ページ: 1-10
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of proteins directly phosphorylated by UL13 protein kinase from herpes simplex virus 1 (2007)
  • 著者名/発表者名: R. Asai et al
  • 雑誌名: Microbes and Infection 9 ページ: 1434-1438
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced Phosphorylation of Transcription Factor Sp1 dependent on Ataxia Telangiectasia-Mutated (ATM) in response to Herpes Simplex Virus Type I Infection (2007)
  • 著者名/発表者名: S. Iwahori et al
  • 雑誌名: J. Virol. 88 ページ: 9653-9664
  • 査読あり
• [雑誌論文] Herpes Simples Virus 1-Encoded Protein Kinase UL13 Phosphorylates the Viral Us3 Protein Kinase and Regulates uclear Localization of Viral Envelopment Factors UL34 and UL31. (2006)
  • 著者名/発表者名: A. Kato, et. al.
  • 雑誌名: J. Virol. 80 ページ: 1476-1486
• [雑誌論文] Epstein-Barr Virus Protein Kinase BGLF4 Is a Virion Tegument Protein That Dissociates From Virions in a Phosphorylation Dependent Process and Phosphorylates the Viral Immediate-Early Protein BZLF1. (2006)
  • 著者名/発表者名: R. Asai, et. al.
  • 雑誌名: J. Virol. 80 ページ: 5125-5134
• [雑誌論文] Association of two membrane proteins encoded by herpes simplex virus type2, UL11 and UL56. (2006)
  • 著者名/発表者名: T. Koshizuka, et. al.
  • 雑誌名: Virus Genes 32 ページ: 157-167
• [雑誌論文] Construction of an infectious clone of canine herpesvirus genome as a bacterial artificial chromosome. (2006)
  • 著者名/発表者名: J. Arii, et. al.
  • 雑誌名: Microbes and Infection 8 ページ: 1054-1063
• [雑誌論文] Identification of Proteins Phosphorylated Directly by the Us3 Protein Kinase Encoded by Herpes Simplex Virus 1. (2005)
  • 著者名/発表者名: A.Kato et al.
  • 雑誌名: J.Virol. 79 ページ: 9325-9331
• [雑誌論文] The role of protein kinase activity expressed by the UL13 gene of herpes simplex virus 1 : The activity is not essential for optimal expression of ICP0 and UL41. (2005)
  • 著者名/発表者名: M.Tanaka et al.
  • 雑誌名: Virology 341 ページ: 301-312
• [雑誌論文] Herpes Simplex Virus Type 1 UL51 Protein Is involved in Maturation and Egress of Virus Particles. (2005)
  • 著者名/発表者名: N.Nozawa et al.
  • 雑誌名: J.Virol. 79 ページ: 6947-6956
• [雑誌論文] The HSV-2 membrane protein UL56 associates with the kinesin motor protein KIF1A. (2005)
  • 著者名/発表者名: T.Koshizuka et al.
  • 雑誌名: J.Gen.Virol. 86 ページ: 527-533
• [学会発表] Protein kinase activity of the HSV-1 Us3 is regulated by phosphorylation (2007)
  • 著者名/発表者名: A. Kato and Y. Kawaguchi
  • 学会等名: 32th International Herpesvirus Workshop
  • 発表場所: Asheville, USA
  • 年月日: 2007-11-07
• [備考]
  • URL: http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/Kawaguchi-lab/KawaguchiLabTop.html
• [産業財産権] ウイルス粒子の3つのコンポーネントを異なる蛍光タンパク質で標識した組み換えウイルス (2006)
  • 発明者名: 川口 寧、杉本 研
  • 権利者名: 国立大学法人東京大学
  • 産業財産権番号: 2006-318534
  • 出願年月日: 2006-11-27