研究課題
若手研究(A)
本研究における目的は、BMP-2あるいはVEGFの遺伝子を顎骨より得たヒト骨膜細胞に遺伝子導入し、その骨芽細胞への分化を、細胞培養実験および免疫不全マウスへの細胞移植実験によって評価することである。実験群としては、BMP-2群、VEGF群、BMP-2+VEGF群、そして遺伝子導入を行わない対照群を用いた。培養骨膜細胞におけるヒト骨芽細胞のマーカー遺伝子(アルカリフォスファターゼ、1型コラーゲンおよびオステオカルシン)の発現をリアルタイムPCRを用いて観察したところ、実験期間である4週間にわたりBMP-2群およびBMP-2+VEGF群で有意な発現が観られ、さらにアルカリフォスファターゼのタンパク発現においても、培養細胞染色法や定量法によって同2群に有意な発現が確認された。一方、細胞移植実験において試料をパラフィン胞埋組織切片で観察すると、移植後4週間で全ての群に異所性の骨様組織形成が確認され、その大きさは8週間まで増え続けた。また、画像解析ソフトにより骨様組織の面積を計測したところ、BMP-2群およびBMP-2+VEGF群では、VEGF群および対照群に比較して有意に大きかった。しかしながら、BMP-2群とBMP-2+VEGF群、あるいはVEGF群と対照群のそれぞれには、有意な差は観られなかった。さらにVEGF群およびBMP-2+VEGF群においては血管新生が顕著であった。以上の結果から、BMP-2あるいはVEGFの遺伝子導入によってヒト骨膜細胞の骨芽細胞への分化が確認され、VEGFによる血管新生はBMP-2による異所性の骨形成を促進する可能性が示唆された。また、口腔内領域より容易に採取出来る骨膜細胞の、骨組織再生への応用が期待できる。
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Tissue Engineering (in press)
