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ヒト・ミトコンドリア蛋白質合成系の分子機構

研究課題

研究課題/領域番号 17770140
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 分子生物学
研究機関東京大学

研究代表者

富田 野乃 (竹内 野乃)  東京大学, 大学院新領域創成科学研究科, 助手 (80323450)

研究期間 (年度) 2005 – 2006
研究課題ステータス 完了 (2006年度)
配分額 *注記
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2006年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2005年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
キーワードミトコンドリア / 蛋白質合成 / 生体外
研究概要

ヒト・ミトコンドリアにおける蛋白質合成系の分子機構を解明することを目指し、生体外ミトコンドリア蛋白質合成系の構築を行った。具体的には、以下の4項目について取り組んだ。
(1)ヒト培養細胞からのミトコンドリアおよびミトコンドリア抽出液の調製方法の確立
翻訳活性を維持したミトコンドリアを高収率で得る調製方法を確立した。
(2)ミトコンドリアリボソームの調製方法の確立
豚肝臓ミトコンドリアからリボソームサブユニットを調製し、再会合を行うことにより、翻訳活性の高いリボソームを調製する方法を確立した。
(3)組み換えミトコンドリア翻訳因子の調製
翻訳に必要なすべてのミトコンドリア翻訳因子について、発現および精製方法を確立した。
(4)ミトコンドリア翻訳系の再構築
(1)-(3)で得たミトコンドリア抽出液、リボソーム、翻訳因子を利用し、ミトコンドリア翻訳系を再構築した。
その結果、FLAGペプチドなど、いくつかのペプチドの翻訳ができる生体外ミトコンドリア蛋白質合成系の構築に成功した。
『(3)組み換えミトコンドリア翻訳因子の調製』の過程では、新規なミトコンドリア翻訳終結因子HMRF1Lを同定した。
『(2)ミトコンドリアリボソームの調製方法の確立』の後、ミトコンドリアリボソームの生化学的解析をおこない、ミトコンドリアリボソームにE-siteを発見した。
構築した生体外蛋白質合成系を利用し、ミトコンドリア翻訳因子(EF-TumtおよびEF-Tsmt)の変異による疾患の発症機構の解析や、ミトコンドリア翻訳制御因子の機能解析を行った。

報告書

(2件)
  • 2006 実績報告書
  • 2005 実績報告書
  • 研究成果

    (3件)

すべて 2007 2006

すべて 雑誌論文 (3件)

  • [雑誌論文] Chaperone properties of mammalian mitochondrial translation elongation factor Tu.2007

    • 著者名/発表者名
      Suzuki H, Ueda T, Taguchi H, Takeuchi N
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem. 282

      ページ: 4076-4084

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Nuclear respiratory factor 2 activates transcription of human mitochondrial translation initiation factor 2 gene.2007

    • 著者名/発表者名
      Hayashi R, Ueda T, Farwell MA, Takeuchi N
    • 雑誌名

      Mitochondrion 7

      ページ: 195-203

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] 翻訳異常と疾患〜ミトコンドリア翻訳因子、リボソーム、tRNAなどの異常に起因する疾患〜2006

    • 著者名/発表者名
      竹内野乃, 上田卓也
    • 雑誌名

      分子細胞治療 5

      ページ: 406-413

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書

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公開日: 2005-04-01   更新日: 2016-04-21  

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