| 研究課題/領域番号 |
17790075
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
生物系薬学
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| 研究機関 | 東京理科大学 |
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研究代表者 |
塩川 大介 東京理科大学, 薬学部, 助手 (90277278)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
2006年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
2005年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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| キーワード | DNase / macrophage / apoptosis / phagocytosis / interferon / GPI-anchor / translation initiation |
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| 研究概要 |
我々は平成17年度の研究成果により、DNaseXがMφの分化、DNaseγがIFN-γやIL-4などのサイトカインによるMφの活性化、それぞれの過程に於いて強く発現誘導されることを見いだした。本年度の研究はこれらのDNaseの役割を明らかとし、Mφに於けるDNA分解機構を包括的に理解することを目標に行われた。
Mφに於けるDNaseXの局在を蛍光抗体法を用い解析、DNaseXがMφの細胞膜表面に強く発現することを見いだした。DNaseXの膜結合様式を調べ、当該タンパクがGPIアンカーにより膜結合するecto型DNaseであることを明らかとした。さらにラテックスビーズの貪食に伴う局在変化を調べ、DNaseXが初期ファゴソームに局在し、ファゴソーム成熟過程でDNaseIIと入れ替わることを明らかとした。
Mφによる外来DNA分解に於けるDNaseXの役割を明らかとするため、siRNAによるノックダウンの影響を調べた。DNaseXノックダウンMφでは、貪食したDNA分解の初期に観察される3'-OH末端形成が強く抑制された。
Mφのアポトーシスに於けるDNaseγの役割をDNaseγノックアウトマウスを用い調べた。無刺激MφのアポトーシスにDNaseγの関与は認められなかったが、IFN-γ活性化Mφに於いてはDNaseγ依存的にアポトーシスのDNA断片化が起こることを明らかとした。
以上の研究成果により、Mφに於けるDNA消去について以下のことが明らかとなった。1)貪食作用により取り込まれた外来DNAの消去過程は、DNaseXに依存する初期段階とDNaseIIが担当する後期段階からなる。2)アポトーシスに於けるMφ自身のDNA消去に於いては、その活性化状態によりCADとDNaseγが使い分けられている。
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