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回帰熱ボレリア菌体表層蛋白抗原のエピトープ解析によるワクチン開発

研究課題

研究課題/領域番号 17790294
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 細菌学(含真菌学)
研究機関福山大学

研究代表者

田淵 紀彦  福山大学, 薬学部, 講師 (60330685)

研究期間 (年度) 2005 – 2006
研究課題ステータス 完了 (2006年度)
配分額 *注記
2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
2006年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2005年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
キーワードBorrelia / 菌体表層蛋白質 / VmpP / VspE / エピトープ / 立体構造 / Borrelia duttonii / Epitope / Infection / Variable major protein
研究概要

Borrelia duttonii VmpP(VlpP)遺伝子を基に30アミノ酸残基に相当する一連の遺伝子断片をPCRにより増幅、これらGST融合蛋白質として大腸菌で発現し、精製VmpPにより作成した抗体との反応性を調べた。VmpP30アミノ酸断片一GST融合蛋白と抗体との反応性を調べた結果、13断片中5断片に抗体反性が認められ、さらにその5断片をそれぞれ3つの15アミノ酸断片-GST融合蛋白として発現させた場合では、VmpPの73-87,155-169,223-237,280-294,342-355のアミノ酸残基に反応性がみられた。抗体反応性断片の合成ペプチドを用いてELISA法を行った結果、VmpPのC末端部分の350-355アミノ酸残基(KAADQQ)に最も強い反応性が認められた。このことよりC末端領域の合成ペプチドが成分ワクチンとして機能する可能性が示唆された。
回帰熱ボレリアは2つのファミリーからなる菌体表層蛋白質Vmpを有しており、分子量の大きいVlp(Variable long protein)と分子量の小さいVsp(Variable short protein)から成る。Borrelia turicataeのスナネズミ感染実験においても血液中での回帰が認められ、抗原性の異なる菌体表層蛋白発現が観察された。培地中で培養したときの菌体表層蛋白はVspEであることがペプチド配列解析により判明したので、この蛋白のX線結晶解析による立体構造決定を行った。解析結果より、VspE単体は4つのα-ヘリックス構造からなりライム病ボレリア病原体 Borrelia burgdorferi OspCとアミノ酸類似性は38.6%にもかかわらずきわめて良く似た構造であることが判明した。

報告書

(2件)
  • 2006 実績報告書
  • 2005 実績報告書
  • 研究成果

    (1件)

すべて 2006

すべて 雑誌論文 (1件)

  • [雑誌論文] Immunodominant epitope in the C-terminus of a variable major protein in Borrelia duttonii, an agent of tick-borne relapsing fever.2006

    • 著者名/発表者名
      Tabuchi, N et al.
    • 雑誌名

      Microbiol Immunol. 50

      ページ: 293-305

    • NAID

      10018119137

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書

URL: 

公開日: 2005-04-01   更新日: 2016-04-21  

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