エンドセリン-1による表皮細胞遊走機構の研究

• 研究課題/領域番号: 17790772
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 皮膚科学
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 徳丸 晶 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (50398046)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2006年度: 900千円 (直接経費: 900千円); 2005年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
• キーワード: エンドセリン / 表皮角化細胞 / 細胞遊走 / EGF受容体 / Transactivation

研究概要

本研究の目的は、エンドセリン-1による表皮角化細胞遊走促進機構を明らかにすることである。
ヒト培養表皮角化細胞を用いたエンドセリン-1によるHB-EGFを介したEGF受容体transactivation機構に関る細胞内シグナル伝達経路の解析
表皮角化細胞におけるエンドセリン-1受容体、ETA,ETB受容体の発現をWestern blot法により解析したところ、いずれも発現が認められた。そこでETA,ETB受容体のEGF受容体のtransactivation機構への関与を明らかにする目的で各々に特異的な阻害剤BQ123(ETA),BQ788(ETB)を用いた阻害実験により解析した。Western blot法ではBQ788(1μM)添加群ではエンドセリン-1により誘導されるEGF受容体のリン酸化は完全に抑制された。一方、BQ123(1μM)添加群では影響を認めなかった。次にこれらの阻害剤のエンドセリン-1により誘導される表皮角化細胞遊走に及ぼす影響についてBoyden chamber法により解析したところBQ788(1μM)添加群ではエンドセリン-1により誘導される表皮角化細胞遊走は完全に抑制された。また、BQ123(1μM)添加群では影響は認めなかった。次にETB受容体の下流のシグナル伝達分子としてSrcに注目し、Src特異的な阻害剤PP-2を用いた同様の阻害実験により解析した。PP-2(50μM)添加により、エンドセリン-1により誘導されるEGF受容体のリン酸化、表皮角化細胞遊走いずれも完全に抑制された
これらの結果から、エンドセリン-1によるヒト表皮角化細胞遊走機構にはETB受容体の活性化に引き続くSrcの活性化によるHB-EGFのsheddingを介したEGF受容体のtransactivation機構が重要な役割を果たしていることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] Epiregulin, a member of the EGF family, is over-expressed in psoriatic epidermis. (2007)
  • 著者名/発表者名: Shirakata Y, Kishimoto J, Tokumaru S, Yamasaki K, Hanakawa Y, Tohyama M, Sayama K, Hashimoto K
  • 雑誌名: J Dermatol Sci. 45(1) ページ: 69-72
  • NAID: 10019994988
• [雑誌論文] New skin-equivalent model from de-epithelialized amnion membrane. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yang L, Shirakata Y, Shudou M, Dai X, Tokumaru S, Hirakawa S, Sayama K, Hamuro J, Hashimoto K
  • 雑誌名: Cell Tissue Res. 326(1) ページ: 69-77
• [雑誌論文] Transforming growth factor-beta-activated kinase 1 is essential for differentiation and the prevention of apoptosis in epidermis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Sayama K, Hanakawa Y, Nagai H, Shirakata Y, Dai X, Hirakawa S, Tokumaru S, Tohyama M, Yang L, Sato S, Shizuo A, Hashimoto K
  • 雑誌名: J Biol Chem. 281(31) ページ: 22013-22020
• [雑誌論文] SOCS1-negative feedback of STAT1 activation is a key pathway in the dsRNA-induced innate immune response of human keratinocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Dai X, Sayama K, Yamasaki K, Tohyama M, Shirakata Y, Hanakawa Y, Tokumaru S, Yahata Y, Yang L, Yoshimura A, Hashimoto K
  • 雑誌名: J Invest Dermatol. 126(7) ページ: 1574-1581
• [雑誌論文] A novel function of angiotensin II in skin wound healing. Induction of fibroblast and keratinocyte migration by angiotensin II via heparin-binding epidermal growth factor (EGF)-like growth factor-mediated EGF receptor transactivation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yahata Y, Shirakata Y, Tokumaru S, Yang L, Dai X, Tohyama M, Tsuda T, Sayama K, Iwai M, Horiuchi M, Hashimoto K
  • 雑誌名: J Biol Chem. 281(19) ページ: 13209-13216
• [雑誌論文] Bone morphogenetic protein-2 modulates Wnt and frizzled expression and enhances the canonical pathway of Wnt signaling in normal keratinocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yang L, Yamasaki K, Shirakata Y, Dai X, Tokumaru S, Yahata Y, Tohyama M, Hanakawa Y, Sayama K, Hashimoto K
  • 雑誌名: J Dermatol Sci. 42(2) ページ: 111-119
  • NAID: 10020549817
• [雑誌論文] Bone morphogenetic protein-2 modulates Wnt and frizzled expression and enhances the canonical pathway of Wnt signaling in normal keratinocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yang L, Tokumaru S, et al.
  • 雑誌名: The Journal of Dermatological Science (In press)
  • NAID: 10020549817
• [雑誌論文] SOCS1 negative feedback of STAT1 activation is a key pathway in the dsRNA-induced innate immune response of human keratinocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Dai X, Tokumaru S, et al.
  • 雑誌名: The Journal of Investigative Dermatology (In press)
• [雑誌論文] Heparin-binding EGF-like growth factor accelerates keratinocyte migration and skin wound healing (2005)
  • 著者名/発表者名: Shirakata Y, Tokumaru S, et al.
  • 雑誌名: The Journal of Cell Science 118 ページ: 2363-2370
• [雑誌論文] Microbubble-enhanced ultrasound for gene transfer into living skin equivalents. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yang L, Tokumaru S, et al.
  • 雑誌名: The Journal of Dermatological Science 40 ページ: 105-114
  • NAID: 10018032379
• [雑誌論文] dsRNA-mediated innate immunity of epidermal keratinocytes. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tohyama M, Tokumaru S, et al.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 335 ページ: 505-511
• [雑誌論文] Induction of keratinocyte migration via transactivation of the EGF receptor by the antimicrobial peptide LL-37. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tokumaru S, Sayama K, et al.
  • 雑誌名: Journal of Immunology 175 ページ: 4662-4668