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嗅覚障害での嗅上皮再生における研究

研究課題

研究課題/領域番号 17791190
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 耳鼻咽喉科学
研究機関名古屋市立大学

研究代表者

濱島 有喜  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 助手 (30343403)

研究期間 (年度) 2005 – 2006
研究課題ステータス 完了 (2006年度)
配分額 *注記
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2006年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
2005年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
キーワード臭覚障害 / 組織幹細胞 / 嗅上皮再生 / 嗅覚障害
研究概要

妊娠マウスをケタミン、キシラジンにて麻酔後、胎児を取りだし、イソジンにて消毒後、断頭して脳組織を取り除き、嗅裂を含むように鼻粘膜を取り出した。ペニシリン・ストレプトマイシンを含んだ生理食塩水にて組織を洗浄後、0.25%トリプシンにて組織を37℃にて15分間留置し、細胞を分離させ、ナイロンメッシュにて骨などの不要組織を除去し、回収した細胞に成長因子を加えた培養液で継代した。ディッシュに付着する細胞と浮遊する細胞を分離し、浮遊細胞を継代した。浮遊細胞は球状なneuro-sphereを形成し、12ヶ月以上継代することが出来た。マウス骨髄からも同様にsphereを形成する培養細胞が分離できたが、2ヶ月程すると、細胞はアポトーシスを起こし、消失していったのに対し、鼻粘膜由来の細胞は15ヶ月継代することができた。これらの細胞からRNAを抽出し、RT-PCRにて神経系マーカーの発現をみると、Musashi1、Nestin、などの神経幹細胞を示唆する遺伝子の発現を認めた。今後は、嗅上皮細胞に分化する可能性があるかMath1,Id1、Hes1などのベクターを細胞に導入したり、ビタミンB12や細胞分化の最終段階で必要であることが内耳有毛細胞のセルラインで解ってきているレチル酸を培養液に添加することで、OMP(olfactory major protein)などの遺伝子が発現するか検討する。またこの細胞をBrdUにて標識後、正常マウスと嗅覚障害モデルマウスの鼻粘膜に注射し、OMPの発現が生じるか検討したい。

報告書

(2件)
  • 2006 実績報告書
  • 2005 実績報告書
  • 研究成果

    (2件)

すべて 2007 2006

すべて 雑誌論文 (2件)

  • [雑誌論文] Pneumococcal peptidoglycan-polysaccharides induce the expression of interleukin-8 in airway epithelial cells by way of nuclear factor-kappaB, nuclear factor interleukin-6m or activation protein-1 dependent mechanisms.2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuchiya K
    • 雑誌名

      Laryngoscope 117・1

      ページ: 86-91

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Id1 induces the proliferation of Cochlear sensory epithelial cells via the nuclear factor-kB/Cyclin D1 pathway in Vitro2006

    • 著者名/発表者名
      Ozeki M
    • 雑誌名

      Jounal of Neuroscience Reserch 85

      ページ: 515-522

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書

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公開日: 2005-04-01   更新日: 2016-04-21  

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