| 研究課題/領域番号 |
17H02210
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
ケミカルバイオロジー
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
堀 雄一郎 大阪大学, 工学研究科, 准教授 (00444563)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2020年度)
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| 配分額 *注記 |
17,290千円 (直接経費: 13,300千円、間接経費: 3,990千円)
2019年度: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2018年度: 6,110千円 (直接経費: 4,700千円、間接経費: 1,410千円)
2017年度: 7,150千円 (直接経費: 5,500千円、間接経費: 1,650千円)
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| キーワード | ハイブリッドプローブ / PYPタグ / ナノボディ / 合成蛍光色素 / 膜タンパク質 / pHプローブ / 細胞膜タンパク質 / 内在化 / pH / ラベル化 / クマリン / 内在性膜蛋白質 / 蛋白質ラベル化 / 膜蛋白質 / 蛍光プローブ / 光架橋 / タンパク質間相互作用 / PYP / タンパク質ラベル化 |
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| 研究成果の概要 |
膜タンパク質は、細胞内でダイナミックに局在変化することで、生理機能を発揮している。本研究では、内在性膜タンパク質の動態を可視化するために、独自のタンパク質ラベル化技術により、ナノボディと膜染色色素を複合化させたハイブリッドプローブを開発した。このプローブは、内在性膜タンパク質を特異的に認識し蛍光強度を上昇させることができるため、生細胞で内在性膜タンパク質を高いコントラストで検出する有用な技術である。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
今日、最も用いられているイメージング技術は、免疫染色と蛍光タンパク質を用いた方法の二つといえる。前者は細胞固定を伴うため生細胞の状態での解析ができなず、後者は目的タンパク質との融合タンパク質として発現させるため、内在性のタンパク質を検出することができない。このため、本研究で開発した技術は、これまでに得ることのできなかった内在性タンパク質の動態情報を与える革新的なものとなる可能性を秘めている。
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