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グライコミクスを革新する新たな分析基盤の構築

研究課題

研究課題/領域番号 17H03808
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 応用生物化学
研究機関国立研究開発法人産業技術総合研究所

研究代表者

亀山 昭彦  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 生命工学領域, 上級主任研究員 (80415661)

研究分担者 佐藤 隆  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 生命工学領域, 主任研究員 (90371046)
研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2020-03-31
研究課題ステータス 完了 (2019年度)
配分額 *注記
16,380千円 (直接経費: 12,600千円、間接経費: 3,780千円)
2019年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2018年度: 5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円)
2017年度: 6,630千円 (直接経費: 5,100千円、間接経費: 1,530千円)
キーワードグライコミクス / 糖鎖 / 糖転移酵素 / ムチン / O-グリカン / 脱離オキシム化 / グリコシルスレオニン / 糖鎖遊離反応 / 糖鎖ライブラリー / 7-メトキシクマリン / キャピラリー電気泳動 / 質量分析 / 糖鎖遊離法 / 蛍光標識 / 分析化学
研究成果の概要

O-型糖鎖に関するグライコミクス基盤の確立を目的として、ウシフェツイン、ブタ胃ムチン、ウシ顎下腺ムチンから独自の糖鎖遊離法である脱離オキシム化反応を利用して約20種のO-型糖鎖ライブラリ―を得た。さらに酵素合成によるライブラリー充実のため、コア1からコア4までの4種の糖鎖を有するスレオニンを出発物質として各種糖転移酵素による糖鎖伸長を行った。また、得られた糖鎖アミノ酸から糖鎖を中性条件で遊離できる新たな手法を確立した。こうした一連の手法を用いてO-型糖鎖グライコミクスの基盤となるライブラリー構築法を確立した。

研究成果の学術的意義や社会的意義

今世紀に入りポストゲノム研究の興隆そして日進月歩で発展した質量分析計に牽引される形で、糖鎖構造解析技術も大きな発展を遂げてきた。しかし発展したのは主にN-グリカンの解析であり、O-グリカンについては大きく後れを取っていると言わざるを得ない。本研究では、O-グリカンのグライコミクスの基盤をなす糖鎖標品ライブラリーを迅速に構築する方法を確立した。今後、これを用いた糖鎖分析データベースを開発することにより、O-型糖鎖の迅速分析が可能となり、ムチン関連腫瘍マーカーをはじめとする各種のバイオマーカー探索やバイオ医薬の品質管理等への活用が期待される。

報告書

(4件)
  • 2019 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2018 実績報告書
  • 2017 実績報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて 2019

すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (4件) (うち国際学会 1件、 招待講演 2件)

  • [雑誌論文] A practical method of liberating O-linked glycans from glycoproteins using hydroxylamine and an organic superbase2019

    • 著者名/発表者名
      Kameyama Akihiko、Thet Tin Wai Wai、Toyoda Masaaki、Sakaguchi Midori
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 513 号: 1 ページ: 186-192

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2019.03.144

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] A complex between phosphatidylinositol 4 kinase IIα and integrin α3β1 is required for N-glycan sialylation in cancer cells2019

    • 著者名/発表者名
      Isaji Tomoya、Im Sanghun、Kameyama Akihiko、Wang Yuqin、Fukuda Tomohiko、Gu Jianguo
    • 雑誌名

      Journal of Biological Chemistry

      巻: 294 号: 12 ページ: 4425-4436

    • DOI

      10.1074/jbc.ra118.005208

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [学会発表] ムチンを調べる新しいプラットフォームの開発2019

    • 著者名/発表者名
      亀山昭彦
    • 学会等名
      第17回糖鎖科学コンソーシアムシンポジウム
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Breakthrough of O-glycan liberation and its application to analysis of mucins separated by supported molecular matrix electrophoresis2019

    • 著者名/発表者名
      亀山昭彦
    • 学会等名
      25th International Symposium on Glycoconjugates
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] O-型糖鎖遊離法のブレークスルーと分子マトリックス電気泳動によるムチン分析への応用2019

    • 著者名/発表者名
      亀山昭彦、ウェイウェイテッティン、豊田雅哲、阪口碧
    • 学会等名
      第38回日本糖質学会年会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] 粘性糖タンパク質ムチンの解析:分子マトリックス電気泳動と糖鎖解析法のブレークスルー2019

    • 著者名/発表者名
      亀山昭彦
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会2019年大会・第70回日本電気泳動学会総会合同大会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 招待講演

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公開日: 2017-04-28   更新日: 2021-02-19  

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