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顕微注入法を用いない全卵ゲノム編集方法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 17H03860
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 水圏生産科学
研究機関京都大学

研究代表者

木下 政人  京都大学, 農学研究科, 助教 (60263125)

研究分担者 堀部 智久  京都大学, 医学研究科, 特定准教授 (20467468)
鷲尾 洋平  近畿大学, 水産研究所, 助教 (60771681)
家戸 敬太郎  近畿大学, 水産研究所, 教授 (90330240)
有馬 祐介  九州大学, 先導物質化学研究所, 准教授 (90402792)
研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2020-03-31
研究課題ステータス 完了 (2019年度)
配分額 *注記
17,940千円 (直接経費: 13,800千円、間接経費: 4,140千円)
2019年度: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2018年度: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2017年度: 7,800千円 (直接経費: 6,000千円、間接経費: 1,800千円)
キーワードビテロゲニン / メダカ / GFP / ゲノム編集 / 発光 / 顕微注入 / 遺伝子導入 / マダイ / 緑色蛍光タンパク質 / 移植
研究成果の概要

魚類や甲殻類へのゲノム編集を行うには、通常、受精卵へのマイクロインジェクション法(MI)を用いる。しかしながら、魚類、甲殻類ではモデル生物として確立されている種は少なく、モデル生物以外では計画的に受精卵を得ることが難しい。そこで受精卵へのMIを用いないゲノム編集方法の開発に取り組んだ。
多くの魚類では肝臓で作られたビテロゲニンが卵内に蓄積される。このシステムを用いて肝臓で発現させたCas9タンパク質を卵に蓄積させ、ゲノム編集を完成させることを考えた。
ビテロゲニンの卵への輸送シグナルと緑色蛍光タンパク質を融合させると、肝臓から卵黄への輸送は成功したが、卵の細胞質への輸送は成功しなかった。

研究成果の学術的意義や社会的意義

今回の研究でマイクロインジェクション法を用いないゲノム編集法の開発には成功しなかった。しかし、肝臓で作られたタンパク質を卵黄に蓄積することに成功した。
魚類の受精卵の生残率は、卵質、つまり、発生に必須あるいは優位な物質がどれだけ卵に蓄積されているか、により大きく異なる。
今回開発したビテロゲニンシステムを活用することにより、卵質を高め、養殖業に活用することが期待できる。

報告書

(4件)
  • 2019 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2018 実績報告書
  • 2017 実績報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて 2019 2018 2017

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (3件)

  • [雑誌論文] Development of an efficient bioreactor system for delivering foreign proteins secreted from liver into eggs with a vitellogenin signal in medaka Oryzias latipes2019

    • 著者名/発表者名
      Yu Murakami, Tomohisa Horibe, Masato Kinoshita
    • 雑誌名

      Fisheries Science

      巻: 85 号: 4 ページ: 677-685

    • DOI

      10.1007/s12562-019-01320-4

    • NAID

      130007884604

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 卵内物質輸送を可能とするモデルメダカの作出2018

    • 著者名/発表者名
      村上悠、堀部智久、木下政人
    • 学会等名
      平成30年度 日本水産学会秋季大会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 卵内物質輸送を可能とするモデルメダカの作出2018

    • 著者名/発表者名
      村上 悠、木下政人
    • 学会等名
      平成30年度 日本水産学会春季大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 卵内物質輸送を可能とするモデルメダカの作出2017

    • 著者名/発表者名
      村上 悠、木下政人
    • 学会等名
      平成29年度 日本水産学会近畿支部会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書

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公開日: 2017-04-28   更新日: 2021-02-19  

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