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ディスプロシウムに対する新奇微生物応答の発見と機構解析、並びにその応用

研究課題

研究課題/領域番号 17J08400
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 応用生物化学
研究機関愛媛大学

研究代表者

白米 優一  愛媛大学, 連合農学研究科, 特別研究員(DC2)

研究期間 (年度) 2017-04-26 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
2018年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2017年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
キーワードレアアース / ディスプロシウム / 巨大菌 / DNA / レアメタル / ポリγグルタミン酸
研究実績の概要

最終年度では、発見した(微)生物と金属のまったく新しい接点を拡げていくことに注力した。現在に至るまで、その接点は生物毒性あるいは無毒性に限定され、正の影響は皆無に等しいと考えられてきた。そうした中、レアアースの中でも産業上重要なディスプロシウム(Dy)がバチルス属に属する巨大菌の代謝に正の影響をもたらすという発見は、学術的な意義に留まらない可能性を秘めている。この新奇微生物応答は、具体的には対数増殖期における細胞増殖速度の促進とポリγグルタミン酸(PGA)産生の増産であった。同じくバチルス属の納豆菌では該応答が認められていないことから、両者のPGA合成オペロンとその近傍の配列を比較し、近傍配列中に顕著な違いを見いだした。納豆菌にはない、広域転写制御因子DegU認識配列が巨大菌には備わっていた。該認識配列を含む領域を計算化学的に解析したところ、数塩基の増減でその構造を激しく変化させるリボスイッチモチーフの存在が示唆された。
実際に二次構造形成の有無を調査するため、PCR法の原理に着目した。二本鎖DNAの変性からアニーリングに至る段階で、鋳型一本鎖DNA分子内での二次構造形成がプライマーDNAの結合より早い場合を仮定し、PCR産物量の減衰を指標とする阻害PCR法を案出した。結果、該配列に結合するDNAプライマーでは正常増幅に比して30%程度であったのに対し、該配列部分から-5nt(塩基)離れた下流に結合するDNAプライマーでは増幅に問題なかった。そのため、計算化学的に予測された二次構造が高い確立で存在しうるとの結論に達した。次いで、ランタノイドとMnを対象とした阻害PCRを試みた。結果、ランタノイドに代表されるランタンや二価金属のMnではPCR産物の増幅率が制限される一方、興味深いことにDyでは濃度依存的な増幅率の回復が認められた。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2018 実績報告書
  • 2017 実績報告書
  • 研究成果

    (23件)

すべて 2019 2018 2017

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件、 オープンアクセス 4件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (19件) (うち国際学会 2件)

  • [雑誌論文] Biochemical characterization of mismatch-binding protein MutS1 and nicking endonuclease MutL from a euryarchaeon Methanosaeta thermophila.2019

    • 著者名/発表者名
      Ai Minobe, Kenji Fukui, Hitomi Yonezu, Koki Ohshita, Saki Mizobuchi, Takashi Morisawa, Yuichi Hakumai, Takato Yano, Makoto Ashiuchi, Taisuke Wakamatsu
    • 雑誌名

      DNA Repair

      巻: 75 ページ: 29-38

    • DOI

      10.1016/j.dnarep.2019.01.005

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Engineering antimicrobial coating of archaeal poly-γ-glutamate-based materials using non-covalent crosslinkages2018

    • 著者名/発表者名
      Ashiuchi Makoto、Hakumai Yuichi、Nakayama Sawami、Higashiuchi Haruna、Shimada Kosuke
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 8 号: 1 ページ: 1-9

    • DOI

      10.1038/s41598-018-23017-x

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Structural insights into L-tryptophan dehydrogenase from a photoautotrophic cyanobacterium Nostoc punctiforme.2017

    • 著者名/発表者名
      Taisuke Wakamatsu, Haruhiko Sakuraba, Megumi Kitamura, Yuichi Hakumai, Kenji Fukui, Kouhei Ohnishi, Makoto Ashiuchi, and Toshihisa Ohshima
    • 雑誌名

      Appl. Environ. Microbiol.

      巻: 83 号: 2 ページ: 1-13

    • DOI

      10.1128/aem.02710-16

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Archaeal MutS5 tightly binds to Holliday junction similarly to eukaryotic MutSγ2017

    • 著者名/発表者名
      Ohshita Koki、Fukui Kenji、Sato Mizuki、Morisawa Takashi、Hakumai Yuichi、Morono Yuki、Inagaki Fumio、Yano Takato、Ashiuchi Makoto、Wakamatsu Taisuke
    • 雑誌名

      The FEBS Journal

      巻: 284 号: 20 ページ: 3470-3483

    • DOI

      10.1111/febs.14204

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] ポリεリジンベースオルガノゲル2019

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 武田隼平, 芦内誠
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 超好塩アーキアのポリγグルタミン酸合成遺伝子2019

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 左々玲奈, 芦内誠
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] ポリγグルタミン酸の効率回収に向けた検討2019

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 山内七海, 芦内誠
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] Development of archaeal poly-γ-glutamate-based antimicrobial coating materials2018

    • 著者名/発表者名
      Yuichi Hakumai, Sawami Nakayama, Haruna Higashiuchi, Makoto Ashiuchi
    • 学会等名
      日本生物物理学会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] バイオベースオルガノゲルの創製とその新たな可能性2018

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 芦内誠
    • 学会等名
      高分子学会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] オルガノゲル化能を有する機能性新素材PELICの開発2018

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 芦内誠
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 抗菌素材“PGAIC”の生成機構分析とオンサイトコーティングへの応用2018

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 中山沢水, 東内遥菜, 芦内誠
    • 学会等名
      日本生物工学会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] アーキア由来ポリγグルタミン酸の実用材料化2018

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 中山沢水, 東内遥菜, 島田幸育, 芦内誠
    • 学会等名
      高分子学会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 巨大菌レアメタル依存的応答因子の探索と機能性解析2018

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 松村歩, 芦内誠
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] ポリεリジンベース新素材のオルガノゲル化に必須の分子構造2018

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 芦内誠
    • 学会等名
      日本生化学会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] Novel Microbial Response for Dysprosium and Its Application for Polymer Designing2018

    • 著者名/発表者名
      Yuichi Hakumai, Ayuri Matsumura, Makoto Ashiuchi
    • 学会等名
      The 12th SPSJ International Polymer Conference
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] PGAイオンコンプレックスを利用した活性炭の効率的な除菌担体化2018

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 山口かなえ, 芦内誠
    • 学会等名
      日本農芸化学会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 新素材ポリγグルタミン酸デカリニウム(PGA/DEQ)を基礎とした機能性向上に寄与する骨格構造の検討2017

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 東内春奈, 芦内誠
    • 学会等名
      日本生化学会中国・四国支部
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 納豆菌由来γ‐グルタミル加水分解酵素:構造と機能、その応用2017

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 芦内誠
    • 学会等名
      酵素・補酵素研究会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] Enzymatic processing and genetic engineering for stereo-regular poly-γ-D-glutamate production2017

    • 著者名/発表者名
      Yuichi Hakumai, Hisaaki Nakamura, Makoto Ashiuchi
    • 学会等名
      The International Conference of D-Amino Acid Research(IDAR2017)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] グリーンオルガノゲルの創製と応用2017

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 芦内誠
    • 学会等名
      日本生物工学会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ポリεリジンを基礎とするプラスチック新素材に見いだされたオルガノゲル特性2017

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 芦内誠
    • 学会等名
      高分子学会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ホモキラルポリγグルタミン酸の高機能材料化、及びそれを利用した微生物増殖の制御2017

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 中山沢水, 東内春奈, 芦内誠
    • 学会等名
      黒潮カンファレンス
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ホモキラルポリγグルタミン酸によるレアメタル協同吸着現象の熱応答挙動2017

    • 著者名/発表者名
      白米優一, 河本友輝, 芦内誠
    • 学会等名
      生命科学系学会合同年次大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書

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公開日: 2017-05-25   更新日: 2024-03-26  

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