| 研究課題/領域番号 |
17J09158
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 研究分野 |
細胞生物学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
株田 千華 (2017) 東京大学, 農学生命科学研究科, 特別研究員(DC2)
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| 特別研究員 |
株田 千華 (2018) 東京大学, 農学生命科学研究科, 特別研究員(DC2)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-26 – 2019-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2018年度)
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| 配分額 *注記 |
1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2018年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2017年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
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| キーワード | リソソーム / RNA分解 / RNautophagy / 細胞内基質 / SIDT2 |
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| 研究実績の概要 |
RNautophagyは、リソソームにRNAを直接取り込み分解する新規オートファジーシステムである。近年、RNautophagyによるRNA分解を仲介する輸送体として、SIDT2が見出された。これまで、主に単離リソソームを用いてRNautophagyによるリソソームへのRNAの取り込み機序について調べられてきたが、RNautophagyの細胞内基質となるRNAはまだ明らかになっていない。また、動物個体におけるRNautophagyの生理的意義も不明である。
本研究により、野生型 MEFおよびAtg5 (マクロオートファジー必須因子）KO MEF いずれにおいても、SIDT2 ノックダウン (KD)によりrRNA分解が抑制されることを明らかにした。また、RNautophagyの基質候補として着目したα-Synuclein mRNAについても、同様の結果を得た。SIDT2変異体を用いた実験結果なども併せて、rRNAとα-Synuclein mRNAがRNautophagyの細胞内基質になると結論した。α-Synuclein mRNAについて、RNautophagyを介した分解に寄与する可能性があるmRNAの領域を見出した。
SIDT2 KO マウスを作出し解析したところ、筋肉に顕著な異常所見を認め、組織染色によりrRNAのfoci様凝集物が観察された。その他、SIDT2 KO マウスの表現型について種々の解析を行った。
RNautophagyの細胞内基質候補になるRNAの網羅的な探索も実施した。SIDT2をKDしたAtg5 KO MEFおよび対照細胞についてActinomysin Dチェイス・アッセイを行い、マイクロアレイ解析に供した。この解析により、RNautophagyの新たな細胞内基質候補の選別に成功した。
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| 現在までの達成度 (段落) |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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