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リアルタイムバイオイメージングによるファイトプラズマの媒介昆虫細胞侵入機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 17J09974
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 植物保護科学
研究機関東京大学

研究代表者

鯉沼 宏章  東京大学, 農学生命科学研究科, 特別研究員(DC1)

研究期間 (年度) 2017-04-26 – 2020-03-31
研究課題ステータス 完了 (2019年度)
配分額 *注記
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
2019年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2018年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2017年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
キーワードファイトプラズマ / 媒介昆虫
研究実績の概要

本研究では、ファイトプラズマの膜タンパク質と結合する宿主レセプターの同定、および昆虫細胞の高精細リアルタイムバイオイメージングに基づいた、ファイトプラズマの媒介昆虫細胞侵入機構を明らかにすることを目的としている。
本年度は、媒介昆虫におけるファイトプラズマの高精細バイオイメージングを行う目的で、ファイトプラズマの細胞膜表面を覆う膜タンパク質Ampに対する抗体を用いて、媒介昆虫の消化管および唾腺をホールマウント(whole mount)で免疫染色し、共焦点レーザー顕微鏡を用いて観察した。その結果、ヨコバイに感染したファイトプラズマを可視化することに成功し、経時的な観察によりファイトプラズマが昆虫の消化管や唾腺に感染して広がる様子を明らかにした。さらに、臓器内部の分布を三次元的に可視化することで、臓器内部における局在変動を詳細に捉え、ファイトプラズマが感染する組織に偏りがあることを明らかにし、主要な侵入・増殖部位や移行時期を特定した。また、リアルタイムPCRにより消化管や唾腺における蓄積量を経時的に定量することで、ファイトプラズマの増殖時期や増殖量を詳細に解明した。これらの解析をもとに、ファイトプラズマの詳細な全身感染モデルを構築することに初めて成功した。
ファイトプラズマの他にも昆虫に全身感染して媒介される植物病原細菌は知られているものの、詳細な全身感染モデルは不明であることから、本研究で構築したモデルはこれらの病原細菌にも適用することができ、昆虫媒介性の病原細菌に共通する基盤的成果だと考えられる。また、昆虫による植物病原細菌の媒介メカニズムはこれまでほとんど分かっていないが、本研究によりファイトプラズマが昆虫に侵入・増殖・移行する際の時期や場所を特定できたことから、今後、媒介メカニズムを分子レベルで詳細に解明するうえで重要な足がかりになると考えられる。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(3件)
  • 2019 実績報告書
  • 2018 実績報告書
  • 2017 実績報告書
  • 研究成果

    (15件)

すべて 2020 2019 2018 2017

すべて 雑誌論文 (7件) (うち国際共著 3件、 査読あり 7件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (8件) (うち国際学会 3件)

  • [雑誌論文] Spatiotemporal dynamics and quantitative analysis of phytoplasmas in insect vectors2020

    • 著者名/発表者名
      Koinuma Hiroaki、Maejima Kensaku、Tokuda Ryosuke、Kitazawa Yugo、Nijo Takamichi、Wei Wei、Kumita Kohei、Miyazaki Akio、Namba Shigetou、Yamaji Yasuyuki
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 10 号: 1 ページ: 4291-4291

    • DOI

      10.1038/s41598-020-61042-x

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Crystal structure of phyllogen, a phyllody-inducing effector protein of phytoplasma2019

    • 著者名/発表者名
      Iwabuchi Nozomu、Maejima Kensaku、Kitazawa Yugo、Miyatake Hideyuki、Nishikawa Masanobu、Tokuda Ryosuke、Koinuma Hiroaki、Miyazaki Akio、Nijo Takamichi、Oshima Kenro、Yamaji Yasuyuki、Namba Shigetou
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 印刷中 号: 4 ページ: 952-957

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2019.04.060

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Comprehensive screening of antimicrobials to control phytoplasma diseases using an in vitro plant?phytoplasma co-culture system2018

    • 著者名/発表者名
      Tanno Kazuyuki、Maejima Kensaku、Miyazaki Akio、Koinuma Hiroaki、Iwabuchi Nozomu、Kitazawa Yugo、Nijo Takamichi、Hashimoto Masayoshi、Yamaji Yasuyuki、Namba Shigetou
    • 雑誌名

      Microbiology

      巻: 164 号: 8 ページ: 1048-1058

    • DOI

      10.1099/mic.0.000681

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] First report of ‘Candidatus Phytoplasma pruni’ infecting cassava in Japan2018

    • 著者名/発表者名
      Koinuma Hiroaki、Miyazaki Akio、Wakaki Renya、Fujimoto Yuji、Iwabuchi Nozomu、Nijo Takamichi、Kitazawa Yugo、Shigaki Toshiro、Maejima Kensaku、Yamaji Yasuyuki、Namba Shigetou
    • 雑誌名

      Journal of General Plant Pathology

      巻: 84 号: 4 ページ: 300-304

    • DOI

      10.1007/s10327-018-0787-2

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] First report of ‘Candidatus Phytoplasma pruni’ infecting cassava in Japan2018

    • 著者名/発表者名
      Koinuma, H., Miyazaki, A., Wakaki, R., Fujimoto, Y., Iwabuchi, N., Nijo, T., Kitazawa, Y., Shigaki, T., Maejima, K., Yamaji, Y., Namba, S.
    • 雑誌名

      Journal of General Plant Pathology

      巻: 未定

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] ‘Candidatus Phytoplasma noviguineense’, a novel taxon associated with Bogia coconut syndrome and banana wilt disease on the island of New Guinea2018

    • 著者名/発表者名
      Miyazaki Akio、Shigaki Toshiro、Koinuma Hiroaki、Iwabuchi Nozomu、Rauka Gou Bue、Kembu Alfred、Saul Josephine、Watanabe Kiyoto、Nijo Takamichi、Maejima Kensaku、Yamaji Yasuyuki、Namba Shigetou
    • 雑誌名

      International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology

      巻: 68 号: 1 ページ: 170-175

    • DOI

      10.1099/ijsem.0.002480

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Genome-Wide Analysis of the Transcription Start Sites and Promoter Motifs of Phytoplasmas2017

    • 著者名/発表者名
      Nijo Takamichi、Neriya Yutaro、Koinuma Hiroaki、Iwabuchi Nozomu、Kitazawa Yugo、Tanno Kazuyuki、Okano Yukari、Maejima Kensaku、Yamaji Yasuyuki、Oshima Kenro、Namba Shigetou
    • 雑誌名

      DNA and Cell Biology

      巻: 36 号: 12 ページ: 1081-1092

    • DOI

      10.1089/dna.2016.3616

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [学会発表] 媒介昆虫個体内におけるファイトプラズマの経時的動態解析2020

    • 著者名/発表者名
      鯉沼宏章・魏薇・徳田遼佑・北沢優悟・二條貴通・汲田幸平・宮﨑彰雄・前島健作・難波成任・山次康幸
    • 学会等名
      令和2年度日本植物病理学会大会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] ファイトプラズマの葉化誘導エフェクター「ファイロジェン」の立体構造2020

    • 著者名/発表者名
      北沢優悟・岩渕望・宮武秀行・鯉沼宏章・宮﨑彰雄・二條貴通・前島健作・大島研郎・難波成任・山次康幸
    • 学会等名
      令和2年度日本植物病理学会大会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] 感染植物由来DNAからのファイトプラズマDNA濃縮系の検討2019

    • 著者名/発表者名
      二條貴通・前島健作・鯉沼宏章・岩 渕 望・徳田遼佑・西川雅展・北沢優 悟・山次康幸・難波成任
    • 学会等名
      平成31年度日本植物病理学会大会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] First characterization of transcription start sites of phytoplasma2018

    • 著者名/発表者名
      Kensaku Maejima, Takamichi Nijo, Yuji Fujimoto, Naoi Hosoe, Yutaro Neriya, Hiroaki Koinuma, Nozomu Iwabuchi, Yugo Kitazawa, Yukari Okano, Yasuyuki Yamaji, Kenro Oshima, Shigetou Namba
    • 学会等名
      The 7th Meeting of the Asian Organization for Mycoplasmology
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Identification of a new phytoplasma from diseased coconut and banana in Papua New Guinea2018

    • 著者名/発表者名
      Akio Miyazaki, Toshiro Shigaki, Naoi Hosoe, Yuji Fujimoto, Hiroaki Koinuma, Nozomu Iwabuchi, Kiyoto Watanabe, Takamichi Nijo, Kensaku Maejima, Yasuyuki Yamaji, Shigetou Namba
    • 学会等名
      The 7th Meeting of the Asian Organization for Mycoplasmology
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ファイトプラズマのRNA転写開始点の網羅的解析による非コードRNAの検出2018

    • 著者名/発表者名
      鯉沼宏章・二條貴通・煉谷裕太朗・岩渕望・北沢優悟・岡野夕香里・前島健作・山次康幸・大島研郎・難波成任
    • 学会等名
      平成30年度日本植物病理学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 国内のキャッサバから初めて検出されたファイトプラズマの分子遺伝学的解析2017

    • 著者名/発表者名
      鯉沼宏章・若木連也・宮﨑彰雄・岩渕望・丹野和幸・北沢優悟・前島健作・山次康幸・難波成任
    • 学会等名
      平成29年度日本植物病理学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] First detection of cassava phytoplasma in Japan and application of LAMP in diagnosis2017

    • 著者名/発表者名
      Hiroaki Koinuma, Akio Miyazaki, Yuji Fujimoto, Kiyoto Watanabe, Yugo Kitazawa, Kensaku Maejima, Yasuyuki Yamaji and Shigetou Namba
    • 学会等名
      The 8th International Conference of Clinical Plant Science
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会

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公開日: 2017-05-25   更新日: 2024-03-26  

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