Liquid Biopsy と腫瘍生検によるprecision medicine

• 研究課題/領域番号: 17K07202
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 腫瘍診断学
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 猶木 克彦 北里大学, 医学部, 教授 (40265806)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2019年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2019年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円); 2018年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2017年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: 肺癌 / バイオマーカー / リキッドバイオプシー / 生検 / プレシジョンメディスン / 分子標的 / EGFR / T790M

研究成果の概要

肺癌治療戦略では癌遺伝子変異に基づくプレシジョンメディスンが必須である。日本人肺癌患者で高頻度であるEGFR遺伝子変異に関し感受性および耐性変異（T790M）の最適な検出方法を検討した。EGFR阻害剤耐性肺癌患者の組織・血液を採取し本邦で広く行われていた高感度PCR法（PNA-LNA PCR Clamp法）と欧米で主に行われていたreal-time PCR法（Cobas法）を比較した。組織での結果は検査法に関わらず一致していたが血液検体との一致率は感受性変異と耐性変異で異なった。血漿と血清での検出感度は同様に有意義であった。検体毎の特性を留意し複数回の検査により感度を高めることが重要である。

研究成果の学術的意義や社会的意義

肺癌のバイオマーカーとしてのEGFR遺伝子変異に関して、治療方針決定のための感受性変異および耐性変異検出方法を前向き研究により検討した。血液を用いたリキッドバイオプシーの有用性と限界、血漿と血清での差を詳細に検討し、EGFR阻害剤耐性肺癌患者での変異検出方法に関して本邦でも広く行われるようになったCobas法に関して基礎的な情報を与えるものとなった。英文論文（Onco Targets Ther 2018)、学会発表（2019年世界肺癌学会、2018年日本肺癌学会、他)により公表した。さらに、基礎的なEGFR阻害剤耐性肺癌細胞株での耐性機序に関して検討し発表した（2019年日本肺癌学会）。

研究成果

• [雑誌論文] Comparison of detection methods of EGFR T790M mutations using plasma, serum, and tumor tissue in EGFR-TKI-resistant non-small cell lung cancer (2018)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi Keigo、Naoki Katsuhiko、Manabe Tadashi、Masuzawa Keita、Hasegawa Hanako、Yasuda Hiroyuki、Kawada Ichiro、Soejima Kenzo、Betsuyaku Tomoko
  • 雑誌名: OncoTargets and Therapy 巻: 11 ページ: 3335-3343
  • DOI: 10.2147/ott.s161745
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Comparison of detection methods of EGFR T790M mutation using plasma, serum, and tumor tissue in EGFR-TKI-resistant non-small cell lung cancer. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi K, Naoki K, Manabe T, Masuzawa K, Hasegawa H, Yasuda H, Kawada I, Soejima K, Betsuyaku T.
  • 雑誌名: Onco Targets Ther 巻: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] <i>EGFR</i>-mutant Non-small Cell Lung Cancer Accompanied by Transient Asymptomatic Pulmonary Opacities Successfully Treated with &quot;Stop-And-Go&quot; Osimertinib (2018)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi K, Naoki K, Kuroda A, Yasuda H, Kawada I, Soejima K, Betsuyaku T.
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 57 号: 7 ページ: 1007-1010
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.9609-17
  • NAID: 130006602605
  • ISSN: 0918-2918, 1349-7235
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] EGFR-TKI耐性肺癌のオシメルチニブの効果予測における“血清”検査の有用性． (2019)
  • 著者名/発表者名: 小林慧悟、猶木克彦、増澤啓太、眞鍋維志、池村辰之介、安田浩之、川田一郎、別役智子、副島研造．
  • 学会等名: 第59回日本呼吸器学会学術講演会
• [学会発表] T790M組織再生検陰性,リキッドバイオプシー陽性進行非小細胞肺癌におけるオシメルチニブ治療効果の検討． (2019)
  • 著者名/発表者名: 笠島真志, 間中博也, 伊藤弘紀, 大江俊太郎, 小野泰平, 楠原政一郎, 日吉康弘, 福井朋也, 井川聡, 横場正典, 三藤久, 佐々木治一郎, 片桐真人, 久保田勝, 猶木克彦．
  • 学会等名: 第42回日本呼吸器内視鏡学会学術集会
• [学会発表] 第1、2、3世代EEGFR-TKI耐性肺癌細胞株の樹立と獲得耐性機序の解析． (2019)
  • 著者名/発表者名: 石原未希子, 田中真澄, 南部晶子, 小澤貴裕, 楠原政一郎, 原田真也, 日吉康弘, 笠島真志, 福井朋也, 井川聡, 佐々木治一郎, 猶木 克彦．
  • 学会等名: 第60回日本肺癌学会学術集会
• [学会発表] 固形がんに対する腫瘍遺伝子網羅的解析結果に関する観察研究． (2019)
  • 著者名/発表者名: 福井朋也, 井川聡, 坂井和子, 武田真幸, 高濱隆幸, 中川和彦, 西尾和人, 猶木克彦．
  • 学会等名: 第23回日本がん分子標的治療学会学術集会
• [学会発表] 肺癌治療の最近の進歩（免疫チェックポイント阻害薬を中心に） (2019)
  • 著者名/発表者名: 猶木克彦
  • 学会等名: 第60回日本内科学会関東支部主催生涯教育講演会
  • 招待講演
• [学会発表] リキッドバイオプシーのup to date EGFR-TKI耐性肺癌のオシメルチニブの効果予測における"血清"検査の有用性． (2018)
  • 著者名/発表者名: 小林 慧悟, 猶木 克彦, 眞鍋 維志, 増澤 啓太, 池村 辰之介, 安田 浩之, 川田 一郎, 副島 研造, 別役 智子．
  • 学会等名: 第59回日本肺癌学会学術集会
• [学会発表] 当院におけるEGFR遺伝子変異陽性肺癌のT790M検出にむけた組織再生検の成績. (2018)
  • 著者名/発表者名: 石原 未希子, 井川 聡, 白澤 昌之, 曽根 英之, 杉本 藍, 原田 真也, 楠原 政一郎, 日吉 康弘, 大谷 咲子, 三藤 久, 村雲 芳樹, 久保田 勝, 猶木 克彦.
  • 学会等名: 第41回日本呼吸器内視鏡学会学術集会
• [学会発表] EGFR遺伝子変異陽性進行非小細胞肺癌でT790M組織再生検陰性,リキッドバイオプシー陽性患者についての検討. (2018)
  • 著者名/発表者名: 楠原 政一郎, 井川 聡, 白澤 昌之, 猶木 克彦, 久保田 勝, 三藤 久, 福井 朋也, 笠島 真志, 石原 未希子, 原田 真也, 倉林 慎太郎, 杉田 景佑.
  • 学会等名: 第41回日本呼吸器内視鏡学会学術集会
• [学会発表] EGFR遺伝子変異陽性進行非小細胞肺癌におけるT790M組織再生検陰性、血漿陽性患者のオシメルチニブ臨床効果. (2018)
  • 著者名/発表者名: 間中 博也, 石原 未希子, 楠原 政一郎, 井川 聡, 白澤 昌之, 小澤 貴裕, 三藤 久, 久保田 勝, 村雲 芳樹, 三枝 信, 猶木 克彦.
  • 学会等名: 第59回日本肺癌学会学術集会
• [学会発表] Characterization of the Efficacies of Osimertinib and Nazartinib against Cells Expressing Epidermal Growth Factor Receptor Mutations. (2017)
  • 著者名/発表者名: Masuzawa K, Yasuda H, Hamamoto J, Hirano T, Nukaga S, Kawada I, Naoki K, Soejima K, Betsuyaku T.
  • 学会等名: The IASLC 18th World Conference on Lung Cancer.
  • 国際学会
• [学会発表] EGFR-TKI耐性肺癌での組織再生検とliquid biopsyによるT790M変異検出の比較 (2017)
  • 著者名/発表者名: 小林慧悟, 猶木克彦, 眞鍋維志, 長谷川華子, 増澤啓太, 平野俊之, 額賀重成, 西野誠, 安田浩之, 川田一郎, 副島研造, 別役智子
  • 学会等名: 第40回日本呼吸器内視鏡学会総会
• [学会発表] 当院におけるEGFR遺伝子変異陽性非小細胞肺癌に対するre-biopsyの検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 増澤啓太, 安田浩之, 小林慧悟, 眞鍋維志, 長谷川華子, 平野俊之, 額賀重成, 西野誠, 川田一郎, 猶木克彦, 副島研造, 別役智子
  • 学会等名: 第40回日本呼吸器内視鏡学会総会
• [学会発表] EGFR-TKI耐性化後の非小細胞肺癌における再生検の部位別陽性率及びOsimertinibの導入 (2017)
  • 著者名/発表者名: 眞鍋維志, 猶木克彦, 小林慧悟, 長谷川華子, 増澤啓太, 安田浩之, 川田一郎, 副島研造, 別役智子
  • 学会等名: 第58回日本肺癌学会総会
• [学会発表] EGFR-TKI治療後の進行非小細胞肺癌に対する再生検とOsimertinibの導入． (2017)
  • 著者名/発表者名: 眞鍋維志, 猶木克彦, 小林慧悟, 増澤啓太, 長谷川華子,安田浩之, 川田一郎, 副島研造, 別役智子
  • 学会等名: 第15回日本臨床腫瘍学会学術集会