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培養細胞に損傷活性を示す微生物由来新規生物活性タンパク質の発見と機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 17K07780
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 生物有機化学
研究機関崇城大学

研究代表者

浴野 圭輔  崇城大学, 生物生命学部, 教授 (30310030)

研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2020-03-31
研究課題ステータス 完了 (2019年度)
配分額 *注記
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2019年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2018年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2017年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
キーワードBacillus thuringiensis / parasporin / 結晶性タンパク質 / パラスポリン / 細胞損傷タンパク質 / 応用微生物
研究成果の概要

Bacillus thuringiensis(BT)の培養液中に細胞損傷活性を示すタンパク質が存在することがわかった。タンパク質精製を行い、A297株ゲノム上に存在する297_1_00946遺伝子が目的タンパク質候補と考えられた。また、培養条件により、活性を示さない条件がわかったため、両培養条件における遺伝子発現量の比較解析を行った。その結果、2種の二次代謝産物および1種のエンテロトキシンの生産に関連する遺伝子の発現量に差があることがわかり、解析をすすめている。また、蛍光プローブを用いた細胞損傷活性の解析により、培養細胞の細胞膜に作用することが強く示唆された。

研究成果の学術的意義や社会的意義

Bacillus thuringiensis(BT)は殺虫タンパク質を生成することから、これまで微生物殺虫剤や遺伝子組換え作物に利用されてきた。21世紀に入り、BTが作る結晶性タンパク質の中に培養細胞に対して損傷活性を示すタンパク質が発見され、パラスポリンとよばれている。現在6種類に分類されているこれらのタンパク質は既知タンパク質との配列相同性が低く、新規な生物活性タンパク質である。本研究課題の成果は、これらBTの生物活性タンパク質の新たな知見を提供する可能性がある。

報告書

(4件)
  • 2019 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2018 実施状況報告書
  • 2017 実施状況報告書
  • 研究成果

    (7件)

すべて 2020 2019 2017

すべて 雑誌論文 (5件) (うち国際共著 1件、 査読あり 5件、 オープンアクセス 4件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Systematic approach for assessing whether undeletable chromosomal regions in Saccharomyces cerevisiae are required for cell viability.2020

    • 著者名/発表者名
      Hassan N, Easmin F, Sasano Y, Ekino K, Taguchi H, Harashima S.
    • 雑誌名

      AMB Express

      巻: 10 号: 1 ページ: 73-73

    • DOI

      10.1186/s13568-020-01001-x

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] CRISPR-PCDup: a novel approach for simultaneous segmental chromosomal duplication in Saccharomyces cerevisiae2020

    • 著者名/発表者名
      Hassan Naim、Sasano Yu、Kimura Shunta、Easmin Farhana、Ekino Keisuke、Taguchi Hisataka、Harashima Satoshi
    • 雑誌名

      AMB Express

      巻: 10 号: 1 ページ: 27-27

    • DOI

      10.1186/s13568-020-0957-4

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] CRISPR-PCD and CRISPR-PCRep: Two novel technologies for simultaneous multiple segmental chromosomal deletion/replacement in Saccharomyces cerevisiae2020

    • 著者名/発表者名
      Easmin Farhana、Sasano Yu、Kimura Shunta、Hassan Naim、Ekino Keisuke、Taguchi Hisataka、Harashima Satoshi
    • 雑誌名

      Journal of Bioscience and Bioengineering

      巻: 129 号: 2 ページ: 129-139

    • DOI

      10.1016/j.jbiosc.2019.08.004

    • NAID

      40022159677

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] gRNA-transient expression system for simplified gRNA delivery in CRISPR/Cas9 genome editing.2019

    • 著者名/発表者名
      Easmin F, Hassan N, Sasano Y, Ekino K, Taguchi H, Harashima S.
    • 雑誌名

      J Biosci Bioeng

      巻: 印刷中 号: 3 ページ: 373-378

    • DOI

      10.1016/j.jbiosc.2019.02.009

    • NAID

      40022010876

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書 2018 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Cloning, Purification, and Characterization of Tripeptidyl Peptidase from Streptomyces herbaricolor TY-212017

    • 著者名/発表者名
      Ekino Keisuke、Yonei Shinichi、Oyama Hiroshi、Oka Takuji、Nomura Yoshiyuki、Shin Takashi
    • 雑誌名

      Applied Biochemistry and Biotechnology

      巻: 184 号: 1 ページ: 239-252

    • DOI

      10.1007/s12010-017-2547-8

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] PCR-based quick methodto deliver gRNA for CRISPR/Cas9 in yeast2019

    • 著者名/発表者名
      Farhana Easmin, Naim Hassan, Yu Sasano, Keisuke Ekino, Hisataka Taguchi, and Satoshi Harashima
    • 学会等名
      日本農芸化学会西日本支部大会(熊本)
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] Bacillus subtilis NBRC13719由来抗菌ペプチドの解析2017

    • 著者名/発表者名
      前山 諒、岡 拓二、原島 俊、浴野圭輔
    • 学会等名
      第24回日本生物工学会九州支部沖縄大会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書

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公開日: 2017-04-28   更新日: 2021-02-19  

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