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無機硫黄化合物の酵素化学の確立とその応用

研究課題

研究課題/領域番号 17K08169
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 環境農学(含ランドスケープ科学)
研究機関岡山大学

研究代表者

金尾 忠芳  岡山大学, 環境生命科学学域, 准教授 (40379813)

研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2022-03-31
研究課題ステータス 完了 (2021年度)
配分額 *注記
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2020年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2019年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2018年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2017年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
キーワード無機硫黄化合物 / 酵素化学 / 硫黄酸化細菌 / 異化的硫黄代謝 / 環境微生物 / 脱硫硫黄 / 独立栄養細菌 / 応用微生物学 / 硫黄代謝 / 好酸性細菌 / 結晶構造解析 / 組換え発現 / refolding / 酵素の結晶化 / 構造解析 / 応用微生物 / 酵素
研究成果の概要

無機硫黄化合物の酵素化学の対象として、まずは硫黄酸化細菌の一種<i>Acidithiobacillus ferrooxidans</i>由来のテトラチオン酸ハイドロラーゼ(<i>Af</i>-Tth)について研究を行った。我々は既に本酵素コードする新規な遺伝子を初めて同定し、独自に開発した酸性refoldingによる活性型酵素の取得とこれの結晶化に成功した。得られた本酵素の結晶を基質であるテトラチオン酸とともにX-線結晶構造解析することで、そのユニークな反応メカニズムの解明を目指している。本研究では、Af-TthのD325がテトラチオン酸を加水分解する重要な残基であることを実証した。

研究成果の学術的意義や社会的意義

硫黄酸化細菌 A. ferrooxidans 由来のテトラチオン酸ハイドロラーゼは、無機硫黄化合物のテトラチオン酸を基質として加水分解し、単体硫黄、チオ硫酸および硫酸を生成するユニークな酵素である。この触媒メカニズムを解明するべく、我々は本酵素のX-線結晶構造解析を行った結果、325番目のアスパラギン酸残基(D325)が基質の加水分解に関わっていることを実証した。現在まで無機硫黄化合物の代謝に関わる酵素は、ほとんどがシステイン残基を介しており、アスパラギン酸残基を触媒とする新たな反応を発見したことは学術的に極めて重要である。また脱硫硫黄の生物的処理への知見を蓄積するため、社会的意義も大きい。

報告書

(6件)
  • 2021 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2020 実施状況報告書
  • 2019 実施状況報告書
  • 2018 実施状況報告書
  • 2017 実施状況報告書
  • 研究成果

    (18件)

すべて 2021 2020 2019 2018 2017

すべて 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 2件、 査読あり 4件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (14件) (うち国際学会 5件)

  • [雑誌論文] Reaction mechanism of tetrathionate hydrolysis based on the crystal structure of tetrathionate hydrolase from Acidithiobacillus ferrooxidans2020

    • 著者名/発表者名
      Kanao Tadayoshi、Hase Naruki、Nakayama Hisayuki、Yoshida Kyoya、Nishiura Kazumi、Kosaka Megumi、Kamimura Kazuo、Hirano Yu、Tamada Taro
    • 雑誌名

      Protein Science

      巻: 30 号: 2 ページ: 328-338

    • DOI

      10.1002/pro.3984

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書 2020 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Identification of a gene encoding a novel thiosulfate:quinone oxidoreductase in marine Acidithiobacillus sp. strain SH2020

    • 著者名/発表者名
      Kanao Tadayoshi、Sharmin Sultana、Tokuhisa Mirai、Otsuki Maho、Kamimura Kazuo
    • 雑誌名

      Research in Microbiology

      巻: 171 号: 7 ページ: 281-286

    • DOI

      10.1016/j.resmic.2020.09.004

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Characterization of tetrathionate hydrolase from the marine acidophilic sulfur-oxidizing bacterium, Acidithiobacillus thiooxidans strain SH.2018

    • 著者名/発表者名
      Kanao T, Onishi M, Kajitani Y, Hashimoto Y, Toge T, Kikukawa H, Kamimura K.
    • 雑誌名

      Bioscience, Biotechnology and Biochemistry

      巻: 82 号: 1 ページ: 152-160

    • DOI

      10.1080/09168451.2017.1415128

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Draft Genome Sequence of Acidithiobacillus sp. Strain SH, a Marine Acidophilic Sulfur-Oxidizing Bacterium.2018

    • 著者名/発表者名
      Kamimura K, Sharmin S, Yoshino E, Tokuhisa M, Kanao T.
    • 雑誌名

      Genome Announcement

      巻: 6 号: 6

    • DOI

      10.1128/genomea.01603-17

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] 鉄硫黄酸化細菌 Acidithiobacillus ferrooxidans を 宿主とした組換え発現系の構築2021

    • 著者名/発表者名
      金尾忠芳,扇元修志,國久智紀,田村隆,上村一雄
    • 学会等名
      日本農芸化学会2021年大会
    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [学会発表] 鉄硫黄酸化細菌Acidithiobacillus ferrooxidansを宿主とした組換え発現系の構築2020

    • 著者名/発表者名
      國久智紀,扇元修志,田村隆,上村一雄,金尾忠芳
    • 学会等名
      日本生物工学会西日本支部大会
    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [学会発表] Characterization of tetrathionate hydrolase from the marine acidophilic sulfur-oxidizing bacterium, Acidithiobacillus sp. strain SH2019

    • 著者名/発表者名
      Shuji Ohgimoto, Moe Onishi, Kazuo Kamimura, Tadayoshi Kanao
    • 学会等名
      23rd International Biohydrometallurgy symposium
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Crystallization and preliminary X-ray diffraction analysis of tetrathionate hydrolase from Acidithiobacillus ferrooxidans.2019

    • 著者名/発表者名
      Tadayoshi Kanao, Kazumi Nishiura, Megumi Kosaka, Kazuo Kamimura, Taro Tamada
    • 学会等名
      23rd International Biohydrometallurgy symposium
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Characterization of the novel thiosulfate: quinone oxidoreductase from a marine acidophilic sulfur-oxidizing bacterium, Acidithiobacillus thiooxidans sp. strain SH2019

    • 著者名/発表者名
      Maho Otsuki, Tadayoshi Kanao, Sultana Sharmin, Mirai Tokuhisa, Kazuo Kamimura
    • 学会等名
      23rd International Biohydrometallurgy symposium
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 鉄硫黄酸化細菌Acidithiobacillus ferrooxidans 由来Sulfide:quinone oxidoreductaseに関する研究2019

    • 著者名/発表者名
      井原里弥、上村一雄、金尾忠芳
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部例会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] 好酸性従属栄養細菌への外来遺伝子導入と組換え発言系の開発2019

    • 著者名/発表者名
      金尾忠芳、藤原孝太、上村一雄
    • 学会等名
      日本農芸化学会2019年大会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] Characterization of tetrathionate hydrolase from a the marine acidophilic sulfur-oxidizing bacterium, Acidithiobacillus thiooxidans strain SH2018

    • 著者名/発表者名
      Kanao T.
    • 学会等名
      5th International Symposium on Microbial Sulfur Metabolism
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Characterization of the novel thiosulfate:quinone oxidoreductase from a marine acidophilic sulfur-oxidizing bacterium, Acidithiobacillus sp. strain SH2018

    • 著者名/発表者名
      Kamimura K., Sultana S., Ohtsuki M., Tokuhisa M., Kanao T.
    • 学会等名
      5th International Symposium on Microbial Sulfur Metabolism
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Acidithiobacillus ferrooxidans のチオ硫酸代謝に関する研究2018

    • 著者名/発表者名
      池田くみ子、金尾忠芳、上村一雄
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部例会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] 鉄硫黄酸化細菌Acidithiobacillus ferrooxidans由来テトラチオン酸ハイドロラーゼの構造解析2018

    • 著者名/発表者名
      金尾忠芳、長谷成記、小坂恵、上村一雄、玉田太郎
    • 学会等名
      日本農芸化学会2018年次大会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 海洋性好酸性硫黄酸化細菌のチオ硫酸デヒドロゲナーゼの遺伝子解析2018

    • 著者名/発表者名
      上村一雄、徳久未来、金尾忠芳
    • 学会等名
      日本農芸化学会2018年次大会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 海洋性硫黄酸化細菌Acidithiobacillus thiooxidans SH株由来テトラチオン酸ハイドロラーゼに関する研究~第2報2018

    • 著者名/発表者名
      金尾忠芳、上村一雄
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部例会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 好酸性従属栄養細菌への外来遺伝子の導入と組換え発現系の開発2017

    • 著者名/発表者名
      藤原孝太、中谷安希、上村一雄、金尾忠芳
    • 学会等名
      日本農芸化学会3支部合同大会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書

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公開日: 2017-04-28   更新日: 2023-01-30  

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