HE、蛍光免疫染色、FISH法のWSI解析の発展及びホジキンリンパ腫研究への応用

• 研究課題/領域番号: 17K08746
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 人体病理学
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 村瀬 貴幸 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (40315875)
• 研究分担者: 稲垣 宏 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (30232507)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2019年度)
• 配分額: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円); 2019年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2018年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2017年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 蛍光 in situ hybridization / Sequential FICTION-WSI / 免疫染色 / IN-Cell Analyzer / 顕微鏡画像解析 / 染色体転座 / 多形腺腫 / 多発性骨髄腫 / 病理学 / 癌 / 細胞・組織 / 遺伝子 / トランスレーショナルリサーチ

研究成果の概要

多発性骨髄腫のCCND1-IGH,NSD2-IGH,MAF-IGH遺伝子再構成検出にFFPE組織による免疫染色法を開発した。FISH法による遺伝子再構成とIHCによる蛋白発現を比較し、CCND1；NSD2；MAFのIHCのcut off値,感度,特異度は各々5%,100%,100%；10%,95.0%,96.0%；10%,90.0%,98.3%であった。遺伝子変異未検索例でもIHCと組織FISH法を行い、感度,特異度はCCND1で100%,97.5%、 NSD2で90.9%,98.9%、MAFで100%,100%であった。よってFFPE組織による多発性骨髄腫の再構成検出は有用であった。

研究成果の学術的意義や社会的意義

次世代シーケンサーにより網羅的に遺伝子を解析し、腫瘍遺伝子異常をビッグデータ化することは腫瘍発生研究に重要であるが、腫瘍組織のビッグデータとの比較の報告はない。我々は1枚のパラフィン組織切片から蛍光免疫染色とFISH法を連続的に行い、スライド全体をビッグデータ化し、細胞単位で組織全体を解析する技術(Sequential FICTION-WSI法)を開発したが、基礎医学・臨床医学分野での応用が可能である。以上から遺伝子ビッグデータと細胞単位の形態・蛋白発現・遺伝子解析から得られた組織ビッグデータとを比較することは画期的であり、腫瘍組織を対象とした分子病理学の応用範囲を飛躍的に広げるものである。

研究成果

• [雑誌論文] Mixed-type primary germ cell tumor of the mediastinum in a young adult male with a sudden life threatening condition: A case report. (2020)
  • 著者名/発表者名: Sakane T, Okuda K, Murase T, Watanabe T, Oda R, Tatematsu T, Yokota K, Haneda H, Inagaki H, Nakanishi R.
  • 雑誌名: Thorac Cancer. 11(1):166-169;2020 巻: 11(1) ページ: 166-169
  • 査読あり
• [雑誌論文] Central pathology review of salivary gland adenoid cystic carcinoma. (2020)
  • 著者名/発表者名: Ueda K, Murase T, Nagao T, Kusafuka K, Urano M, Yamamoto H, Nakaguro M, Taguchi KI, Masaki A, Hirai H, Kawakita D, Tsukahara K, Hato N, Nagao T, Fujimoto Y, Sakurai K, Hanai N, Kano S, Onitsuka T, Okami K, Nibu KI, Tada Y, Kawata R, Inagaki H.
  • 雑誌名: Head Neck. 巻: In press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinicopathological significance of EGFR pathway gene mutations and CRTC1/3-MAML2 fusions in salivary gland mucoepidermoid carcinoma. (2020)
  • 著者名/発表者名: *Morita M, *Murase T, Okumura Y, Ueda K, Sakamoto Y, Masaki A, Kawakita D, Tada Y, Nibu K, Shibuya Y, Inagaki H.
  • 雑誌名: Histopathol 巻: In press
  • 査読あり
• [雑誌論文] A mutation analysis of the EGFR pathway genes, RAS, EGFR, PIK3CA, AKT1, and BRAF, and TP53 gene in thymic carcinoma and thymoma type A/B3. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sakane T, Murase T, Okuda K, Saida K, Masaki A, Yamada T, Saito Y, Nakanishi R, Inagaki H.
  • 雑誌名: Histopathology 巻: 75(5) ページ: 755-766
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunohistochemistry for identification of CCND1, NSD2, and MAF gene rearrangements in plasma cell myeloma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Murase T, Ri M, Narita T, Fujii K, Masaki A, Iida S, Inagaki H.
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 110(8) ページ: 2600-2606
  • 査読あり
• [雑誌論文] Plasma cell myeloma positive for t(14;20) with relapse in the central nervous system. (2019)
  • 著者名/発表者名: Murase T, Inagaki A, Masaki A, Fujii K, Narita T, Ri M, Hanamura I, Iida S, Inagaki H.
  • 雑誌名: J Clin Exp Hematop 巻: 59(3) ページ: 135-139
  • NAID: 130007720089
  • 査読あり
• [雑誌論文] CCR4 is rarely expressed in CCR4-mutated T/NK-cell lymphomas other than adult T-cell leukemia/lymphoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto Y, Fujii K, Murase S, Nakano S, Masaki A, Murase T, Kusumoto S, Iida S, Utsunomiya A, Ueda R, Ishida T, Inagaki H.
  • 雑誌名: Int J Hematol. 巻: 110(4) ページ: 389-392
  • 査読あり
• [雑誌論文] Postoperative radiotherapy for T1/2N0M0 mucoepidermoid carcinoma positive for CRTC1/3‐MAML2 fusions (2018)
  • 著者名/発表者名: Okumura Yoshihide、Murase Takayuki、Saida Kosuke、Fujii Kana、Takino Hisashi、Masaki Ayako、Ijichi Kei、Shimozato Kazuo、Tada Yuichiro、Nibu Ken‐ichi、Inagaki Hiroshi
  • 雑誌名: Head & Neck 巻: 40 号: 12 ページ: 2565-2573
  • DOI: 10.1002/hed.24856
  • 査読あり
• [雑誌論文] CCR4 mutations associated with superior outcome of adult T-cell leukemia/lymphoma under mogamulizumab treatment (2018)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto Yuma、Ishida Takashi、Masaki Ayako、Murase Takayuki、Yonekura Kentaro、Tashiro Yukie、Tokunaga Masahito、Utsunomiya Atae、Ito Asahi、Kusumoto Shigeru、Iida Shinsuke、Ueda Ryuzo、Inagaki Hiroshi
  • 雑誌名: Blood 巻: 132 号: 7 ページ: 758-761
  • DOI: 10.1182/blood-2018-02-835991
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Mutation analysis of the EGFR pathway genes, EGFR, RAS, PIK3CA, BRAF, and AKT1, in salivary gland adenoid cystic carcinoma. (2018)
  • 著者名/発表者名: Saida K, Murase T, Ito M, Fujii K, Takino H, Masaki A, Kawakita D, Ijichi K, Tada Y, Kusafuka K,Iida Y, Onitsuka T, Yatabe Y, Hanai N, Hasegawa Y
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 9 号: 24 ページ: 17043-17055
  • DOI: 10.18632/oncotarget.24818
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Four immunohistochemical assays to measure the PD-L1 expression in malignant pleural mesothelioma. (2018)
  • 著者名/発表者名: Watanabe T, Okuda K, Murase T, Moriyama S, Haneda H, Kawano O, Yokota K, Sakane T, Oda R, Inagaki H, Nakanishi R.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: 9(29) 号: 29 ページ: 20769-20780
  • DOI: 10.18632/oncotarget.25100
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Improved clonality detection in Hodgkin lymphoma using a semi-nested modification of the BIOMED-2 PCR assay for IGH and IGK rearrangements: A paraffin-embedded tissue study. (2018)
  • 著者名/発表者名: Han S, Masaki A, Sakamoto Y, Takino H, Murase T, Iida S, Inagaki H.
  • 雑誌名: Pathol Int 巻: Epub 号: 5 ページ: 12660-12660
  • DOI: 10.1111/pin.12660
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] A comparative study of PD-L1 immunohistochemical assays with four reliable antibodies in thymic carcinoma. (2018)
  • 著者名/発表者名: Sakane T, Murase T, Okuda K, Takino H, Masaki A, Oda R, Watanabe T, Kawano O, Haneda H, Moriyama S, Saito Y, Yamada T, Nakanishi R, Inagaki H.
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 9(6) 号: 6 ページ: 6993-7009
  • DOI: 10.18632/oncotarget.24075
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] <i>Achromobacter</i> Infection Is Rare in Japanese Patients with Pulmonary B-cell Lymphoma (2018)
  • 著者名/発表者名: Aoyama S, Masaki A, Sakamoto Y, Takino H, Murase T, Ohshima K, Yoshino T, Kato S, Inagaki H.
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 57 号: 6 ページ: 789-794
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.9430-17
  • NAID: 130006507388
  • ISSN: 0918-2918, 1349-7235
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Improved clonality detection in B-cell lymphoma using a semi-nested modification of the BIOMED-2 PCR assay for IGH rearrangement: A paraffin-embedded tissue study. (2017)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto Y, Masaki A, Aoyama S, Han S, Saida K, Fujii K, Takino H, Murase T, Iida S, Inagaki H.
  • 雑誌名: Pathol Int 巻: 67(9) 号: 9 ページ: 453-460
  • DOI: 10.1111/pin.12566
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] MYB, MYBL1, MYBL2 and NFIB gene alterations and MYC overexpression in salivary gland adenoid cystic carcinoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Fujii K, Murase T, Beppu S, Saida K, Takino H, Masaki A, Ijichi K, Kusafuka K, Iida Y, Onitsuka T, Yatabe Y, Hanai N, Hasegawa Y
  • 雑誌名: Histopathology 巻: 7 号: 5 ページ: 823-834
  • DOI: 10.1111/his.13281
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] FFPE標本を用いた免疫染色は多発性骨髄腫におけるIGH関連遺伝子再構成の有用なスクリーニング法である． (2019)
  • 著者名/発表者名: 村瀬貴幸、正木彩子、藤井慶一郎、上田佳緒璃、李政樹、飯田真介、稲垣宏
  • 学会等名: 第108回 日本病理学会総会(2019.5.東京)
• [学会発表] 多発性骨髄腫におけるCCND1、MMSET、MAF遺伝子再構成の検出：パラフィン標本を用いた組織FISH法および免疫組織染色への応用 (2018)
  • 著者名/発表者名: 村瀬貴幸、李政樹、成田朋子、吉田嵩、正木彩子、飯田真介、稲垣宏
  • 学会等名: 第43回日本骨髄腫学会 (2018.05.)
• [学会発表] ETV6-RET融合遺伝子を有した唾液腺分泌癌の2例 (2018)
  • 著者名/発表者名: 村瀬貴幸、奥村嘉英、齋田昂佑、坂本祐真、津田香那、滝野寿、正木彩子、稲垣宏
  • 学会等名: 第107回日本病理学会総会 (2018.06.)
• [学会発表] MAFB遺伝子再構成陽性を示す多発性骨髄腫の1例 (2018)
  • 著者名/発表者名: 村瀬貴幸、李政樹、稲垣淳、成田朋子、吉田嵩、正木彩子、飯田真介、稲垣宏
  • 学会等名: 第58回日本リンパ・網内系学会 (2018.06.)
• [学会発表] Sequential FICTION-WSI法を用いた多形腺腫細胞のclonality解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 村瀬 貴幸、石橋 謙一郎、藤井 香那、齋田 昂佑、滝野 寿、正木 彩子、稲垣 宏
  • 学会等名: 第106回日本病理学会総会
• [学会発表] t(4;14)(p16;q32)/IGH-FGFR3とt(14;16)(q32;q23)/IGH-MAFに対するパラフィン検体による組織 FISH法の有用性 (2017)
  • 著者名/発表者名: 村瀬 貴幸、成田 朋子、李 政樹、正木 彩子、吉田 嵩、飯田 真介、稲垣 宏
  • 学会等名: 第42回日本骨髄腫学会
• [学会発表] 免疫染色により確定診断された唾液腺intercalated duct lesionの1例 (2017)
  • 著者名/発表者名: 村瀬 貴幸、坂本 祐真、藤井 香那、齋田 昂佑、滝野 寿、正木 彩子、稲垣 宏
  • 学会等名: 第62回日本唾液腺学会