| 研究課題/領域番号 |
17K10732
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 基金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
心臓血管外科学
|
|---|
| 研究機関 | 佐賀大学 |
|---|
研究代表者 |
古川 浩二郎 佐賀大学, 医学部, 客員研究員 (90264176)
|
|---|
| 研究分担者 |
木塚 貴浩 佐賀大学, 医学部, 医員 (20796487)
荒井 健一 佐賀大学, 医学部, 特任助教 (40752960)
中山 功一 佐賀大学, 医学部, 教授 (50420609)
伊藤 学 佐賀大学, 医学部, 助教 (50555084)
野出 孝一 佐賀大学, 医学部, 教授 (80359950)
迎 洋輔 佐賀大学, 医学部, 助教 (90746570)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
|
| 研究課題ステータス |
交付 (2018年度)
|
| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2019年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2018年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2017年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
|
|---|
| キーワード | 組織工学 / 神経前駆細胞 / ヒトiPS細胞由来 / 心筋細胞 / ヒトiPS由来心筋凝集体 / 内皮細胞 / ヒトiPS細胞由来心筋細胞 / ヒトiPS細胞由来神経前駆細胞 / ヒトiPS細胞由来血管内皮細胞 / スフェロイド / 心筋再生 |
|---|
| 研究実績の概要 |
我々は従来、古典的な細胞自己凝集現象（スフェロイド形成）やスフェロイド融合現象を利用し、任意の3次元組織を構築する技術を開発してきた。本研究では、ヒト人工多能性幹(iPS)細胞由来の心筋細胞にヒトiPS細胞由来の神経細胞や血管内皮細胞を配合することにより、心筋細胞からできた細胞凝集体（スフェロイド）の機能を向上させることを目的とする。心筋細胞と神経前駆細胞の混合spheroidを作成し、神経前駆細胞が拍動に有利に働くことを確認した。またさらに、心筋細胞75%とドーパミン産生細胞25%の割合で細胞混濁液を作成し、１つあたり2万の混合spheroidを作製し、ドーパミン産生細胞を混合した心筋spheroidと線維芽細胞と内皮細胞を混合した心筋spheroidや100%心筋spheroidにおいて、細胞内cAMP量をPCRを用いて相対的評価を行った。ドーパミン産生細胞を混合した心筋spheroidは他のspheroidに比べて細胞内cAMP量が相対的に多い傾向が認められ、ドーパミン作用の影響が考えられた。ドーパミン産生細胞を混合した心筋Spheroidは、線維芽細胞と内皮細胞を混合した心筋spheroidに比べて生存率が悪く、凝集や拍動も微弱であったため、今後の課題として、生存率のより混合spheroidの作製が挙げられた。神経前駆細胞
配合に伴うスフェロイドの組織学的、拍動力学的機能の特徴、変化の解析を行いながら、前年度の成果をさらに発展させるために、ヒトiPS由来血管内皮細胞を追加で混合し、血管網、神経網が構築され高機能化した拍動心筋スフェロイドの作製を目指す。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ドーパミン産生細胞や神経前駆細胞を心筋細胞に混ぜるアプローチで拍動する混合型心筋スフェロイド作製が可能であった。混合型心筋スフェロイドの細胞内cAMP量の上昇や、組織学的評価において、Troponin Tに加え、Nestin陽性細胞など確認できており概ね順調に進展していると判断した。
|
| 今後の研究の推進方策 |
前年度に達成したスフェロイド作製技術を発展させ、血管網、神経網を有するさらに高機能化したスフェロイド作製を目指したい。
|
