| 研究課題/領域番号 |
17K15444
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 研究分野 |
生物系薬学
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| 研究機関 | 九州大学 (2018)
千葉大学 (2017) |
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研究代表者 |
高橋 大輔 九州大学, 薬学研究院, 助教 (70791523)
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| 研究協力者 |
坂根 郁夫
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2019-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2018年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2018年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2017年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
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| キーワード | ジアシルグリセロールキナーゼ / 脂質キナーゼ / マルチドメイン蛋白質 / 構造解析 / 昆虫細胞・バキュロウイルス / EFハンド / DGK / 立体構造解析 / EFハンドモチーフ / がん免疫 / 脂質代謝酵素 / シグナル伝達 / 細胞内情報伝達 / シグナル脂質 / 相互作用ネットワーク |
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| 研究成果の概要 |
ジアシルグリセロールキナーゼ（DGK）は，脂質メッセンジャーであるDGとPAの細胞内濃度を調整する脂質代謝酵素である．しかしながら，その生理・病理学的重要性にもかかわらず，未だ構造生物学的理解は乏しい．本研究では，DGKαを昆虫細胞により初めて大量発現させ，活性を保持した試料を高純度・高収率に精製することに成功した．さらにDGKα N末端の活性制御領域であるDGKα EFのCa2+結合型の結晶構造を新規に決定するとともに，Ca2+が結合するとDGKα EFがプロテアーゼ耐性のあるリジッドな構造へと変化することを生化学・物理化学的手法を用いて明らかにした．
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
脂質キナーゼであるDGKに関する構造生物学的理解は乏しく，活性が確認されて以来約60年，DGK触媒領域の構造は不明のままである．特に，がん免疫治療の標的の一つとして近年注視されているDGKαの構造基盤の解明は，構造に指南された阻害剤開発のためにひも必要である．本研究で初めて確率した昆虫細胞によるDGKα試料の大量発現・精製法およびN末端EFハンドドメインの構造決定と構造変化の解析は，これまで遅れていたDGKの構造研究を進展させるものである．
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