CRISPR/Cas9を用いた卵巣癌の分子病理学的研究～ケモカインを標的として～

• 研究課題/領域番号: 17K16863
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 産婦人科学
• 研究機関: 和歌山県立医科大学
• 研究代表者: 八幡 環 和歌山県立医科大学, 医学部, 客員研究員 (90647562)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2019年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2019年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2018年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2017年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
• キーワード: 卵巣癌 / CRISPR/Cas9 / ケモカイン / PD-L1 / CXCR4 / CRISPR/Cas9 system / 婦人科学

研究成果の概要

本研究ではCRISPR/Cas9ゲノム編集技術を用いて、卵巣がん進展に関与するケモカイン受容体遺伝子を欠損させ、癌微小環境下における病態生理学的役割を解明し、卵巣がんにおける新規治療戦略を開発することを目的とした。
マウス卵巣癌細胞株ID8を用いて癌進展に関与するケモカイン受容体の発現量を評価した。real time RT-PCRではCCR5、CXCR4、CX3CR1、またフローサイトメトリーではCXCR4の発現を確認した。各々の遺伝子改変用ベクターを構築し、ID8にCXCR4遺伝子改変用ベクターをトランスフェクト後、目的細胞を樹立し、今後、卵巣癌進展への関与について評価を行う予定である。

研究成果の学術的意義や社会的意義

卵巣癌は女性の癌死因の半数を占める。進行症例に対する治療法は腫瘍減量手術と化学療法が主となるが、長期予後は不良であり、予後改善のためには新規標的治療の確立が必要である。本研究は卵巣癌進展に関与する分子としてケモカイン・ケモカイン受容体システムに注目し、マウス卵巣癌細胞株ID8のCCR5、CXCR4、CX3CR1のケモカイン受容体発現を確認した。ゲノム編集ツールであるCRISPR/Cas9システムを用いて、これらの遺伝子の発現を欠損させた細胞株を樹立し、癌微小環境下における病態生理学的役割を解明することで、卵巣癌において、ケモカインを標的とする新規治療法確立の基盤研究となる可能性がある。

研究成果

• [雑誌論文] Mabuchi Y, Takiguchi Y, Yahata T, Mizoguchi M, Sasaki N, Ota N, Minami S, Ino K. Short term outcomes of helical tomotherapy during concurrent chemoradiotherapy for advanced cervical cancer. (2019)
  • 著者名/発表者名: Mabuchi Y, Takiguchi Y, Yahata T, Mizoguchi M, Sasaki N, Ota N, Minami S, Ino K.
  • 雑誌名: Mol Clin Oncol. 巻: 10 ページ: 382-386
  • DOI: 10.3892/mco.2019.1806
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Programmed cell death ligand 1 disruption by clustered regularly interspaced short palindromic repeats/Cas9‐genome editing promotes antitumor immunity and suppresses ovarian cancer progression (2019)
  • 著者名/発表者名: Yahata T, Mizoguchi M, Kimura A, Orimo T, Toujima S, Kuninaka Y, Nosaka M, Ishida Y, Sasaki I, Fukuda‐Ohta Y, Hemmi H, Iwahashi N, Noguchi T, Kaisho T, Kondo T, Ino K
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 110 号: 4 ページ: 1279-1292
  • DOI: 10.1111/cas.13958
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Liquid biopsy-based comprehensive gene mutation profiling for gynecological cancer using CAncer Personalized Profiling by deep Sequencing (2019)
  • 著者名/発表者名: Iwahashi Naoyuki、Sakai Kazuko、Noguchi Tomoko、Yahata Tamaki、Matsukawa Hitomi、Toujima Saori、Nishio Kazuto、Ino Kazuhiko
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 9 号: 1 ページ: 10426-10426
  • DOI: 10.1038/s41598-019-47030-w
  • 査読あり / オープンアクセス