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X線結晶構造解析による新規農薬デザイン

研究課題

研究課題/領域番号 17K19272
研究種目

挑戦的研究(萌芽)

配分区分基金
研究分野 生産環境農学およびその関連分野
研究機関九州大学

研究代表者

山本 幸治  九州大学, 農学研究院, 助教 (00346834)

研究分担者 山田 直隆  九州大学, 農学研究院, 助教 (20304769)
研究期間 (年度) 2017-06-30 – 2020-03-31
研究課題ステータス 完了 (2019年度)
配分額 *注記
6,240千円 (直接経費: 4,800千円、間接経費: 1,440千円)
2019年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2018年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
2017年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
キーワードグルタチオン転移酵素 / X線結晶構造解析 / 有機リン剤
研究成果の概要

Glutathione S-Transferase Unclassified 2(GSTU2)は農薬・ダイアジノンを殺虫活性のないグルタチオン抱合体へ代謝する。本研究では、GSTU2の構造と機能を解析する。Apo―GSTU2結晶を得ることに成功し、この結晶を用いて回折データを収集した。その結果、分解能1.68 オングストロームの条件にて精密化を進めた。また、Pro13、Tyr107、Ile118、Tyr119、Phe211は基質結合に重要であった。TALENによりGSTU2ノックアウトカイコの作製に成功した。ノックアウトカイコにおいて、ダイアジノンに対するLD50値の低下が観察された。

研究成果の学術的意義や社会的意義

ゲノム編集技術によりGSTU2ノックアウトカイコの作製に成功した。野生型カイコと比較した際、得られたノックアウトカイコにおいて、有機リン剤(ダイアジノン)に対するLD50値の低下が観察された。これは、当該ノックアウトカイコ体内において、GSTU2によりダイアジノンが代謝されないためにLD50値低下がおこったものと推察された。また、当該ノックアウトカイコ体内においてアセチルコリン量が増加していることが明らかとなった。ノックアウトカイコ中、GSTU2はアセチルコリンエステラーゼへ不可逆的に結合し、アセチルコリンエステラーゼはアセチルコリンを代謝できない機能不全に陥っていることが示唆された。

報告書

(4件)
  • 2019 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2018 実施状況報告書
  • 2017 実施状況報告書
  • 研究成果

    (18件)

すべて 2020 2019 2018 2017

すべて 雑誌論文 (11件) (うち国際共著 3件、 査読あり 11件) 学会発表 (6件) (うち国際学会 2件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] A defective prostaglandin E synthase could affect egg formation in the silkworm Bombyx mori2020

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto K, Tsubota T, Uno T, Tsujita Y, Yokota S, Sezutsu S, Mita K.
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 521 ページ: 347-352

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Functional analysis of an epsilon-class glutathione S-transferase from Nilaparvata lugens2019

    • 著者名/発表者名
      Saruta F, Yamada N, Yamamoto K.
    • 雑誌名

      Journal of Insect Science

      巻: 19 ページ: 1-7

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] An omega-class glutathione S-transferase in the brown planthopper Nilaparvata lugens exhibits glutathione transferase and dehydroascorbate reductase activities2019

    • 著者名/発表者名
      Saruta F, Yamada N, Yamamoto K.
    • 雑誌名

      Archives of Insect Biochemistry & Physiology

      巻: 102

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Serine hydroxymethyltransferase from the silkworm Bombyx mori: Identification, distribution, and biochemical characterization2019

    • 著者名/発表者名
      Haque MR, Hirowatari A, Nai N, Furuya S, Yamamoto K.
    • 雑誌名

      Archives of Insect Biochemistry & Physiology

      巻: 102

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Molecular survey of the phosphoserine phosphatase involved in L-serine synthesis by silkworms (Bombyx mori)2019

    • 著者名/発表者名
      Haque MR, Hirowatari A, Saruta F, Furuya S, Yamamoto K.
    • 雑誌名

      Insect Molecular Biology

      巻: 29 ページ: 48-55

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Molecular structure of a 5,10-methylenetetrahydrofolate dehydrogenase from the silkworm Bombyx mori2019

    • 著者名/発表者名
      Mohammad R. Haque, Akifumi Higashiura, Atsushi Nakagawa, Aiko Hirowatari, Shigeki Furuya, and Kohji Yamamoto
    • 雑誌名

      FEBS Open Bio

      巻: 9 ページ: 618-628

    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Identification and expression analysis of the replication factor C protein in the silkworm, Bombyx mori2019

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto K, Haque M. R. , Saruta F.
    • 雑誌名

      Journal of Insect Biotechnology and Sericology

      巻: 88 ページ: 17-20

    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Characterisation of a diazinon-metabolising glutathione S-transferase in the silkworm Bombyx mori by X-ray crystallography and genome editing analysis2018

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto K, Higashiura A, Hirowatari A, Yamada N, Tsubota T, Sezutsu H, Nakagawa A
    • 雑誌名

      Scientific reports

      巻: 8 ページ: 16835-16835

    • NAID

      120006770877

    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Wide distribution of a major East Asian noctuid pest explained by genomic adaptation to polyphagy and insecticides2017

    • 著者名/発表者名
      Cheng T., Wu J., Wu Y., Chilukuri R., Huang L., Yamamoto K., et al, Arunkumar A., Kishino H., Goldsmith M., Feng Q., Xia Q., and Mita K.
    • 雑誌名

      Nature Ecology & Evolution

      巻: 1 ページ: 1747-1756

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Molecular structure of a prostaglandin D synthase requiring glutathione from the brown planthopper, Nilaparvata lugens2017

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto K., Higashiura A., Suzuki M., Aritake K., Urade Y., Nakagawa A.
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 492 ページ: 166-171

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Localization of an Aldo-Keto Reductase (AKR2E4) in the Silkworm Bomber mori (Lepidoptera: Bombycidae)2017

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto K., Ozakiya Y., Uno T.
    • 雑誌名

      Journal of insect science

      巻: 17 ページ: 1-3

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Molecular characterization and expression analysis of a phosphoserine aminotransferase involving L-serine synthesis from silkworm, Bombyx mori2019

    • 著者名/発表者名
      Haque MR, Hirowatari A, Koyanagi A, Ichinose T, Abiru M, Mohri S, Furuya S. and Yamamoto K.
    • 学会等名
      化学関連支部合同大会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] プロスタグランジンEのカイコ・コリオン遺伝子発現に与える影響2019

    • 著者名/発表者名
      広渡愛子・坪田拓也・宇野知秀・瀬筒秀樹・山本幸治
    • 学会等名
      平成31年度蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] カイコガオス生殖腺分泌物に含まれるSuperoxide dismutase (SOD) の存在2019

    • 著者名/発表者名
      長岡純治、山本幸治
    • 学会等名
      平成31年度蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] Identification and characterization of the serine hydroxymethyl transferase from silkworm, Bombyx mori2018

    • 著者名/発表者名
      Md. Rezwanul Haque, Nonoko Nai, Aiko Hirowatari, Shigeki Furuya, and Kohji Yamamoto
    • 学会等名
      第55回化学関連支部合同九州大会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] Identification and characterization of a novel AKR from the silkworm, Bombyx mori2018

    • 著者名/発表者名
      Kohji Yamamoto, David K. Wilson
    • 学会等名
      Carbonyl conference 2018
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Identification and characterization of the 5, 10- Methylene- tetrahydrofolate dehydrogenase from silkworm (Bombyx mori)2017

    • 著者名/発表者名
      Md. Rezwanul Haque, Aiko Hirowatari, Shigeki Furuya, Kohji Yamamoto
    • 学会等名
      2017 AFELiSA
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [図書] 「カイコの実験単」実験82019

    • 著者名/発表者名
      山本幸治
    • 総ページ数
      6
    • 出版者
      朝倉出版
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書

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公開日: 2017-07-21   更新日: 2021-02-19  

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