• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

外来薬物による遺伝子発現誘導における転写因子複合体の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 18055001
研究種目

特定領域研究

配分区分補助金
審査区分 生物系
研究機関東北大学

研究代表者

安元 研一  東北大学, 大学院・生命科学研究科, 准教授 (90241629)

研究分担者 十川 和博  東北大学, 大学院・生命科学研究科, 教授 (80175421)
研究期間 (年度) 2006 – 2007
研究課題ステータス 完了 (2007年度)
配分額 *注記
6,900千円 (直接経費: 6,900千円)
2007年度: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
2006年度: 3,800千円 (直接経費: 3,800千円)
キーワードFLIM-FRET / 薬物応答 / 転写因子複合体 / Arnt / AhR / 遺伝子調節 / 蛍光顕微鏡 / 転写因子 / LBP-1 / CYP1A2
研究概要

蛍光の寿命の変化を測定するシステムとして、ピコ秒パルスレーザー・蛍光顕微鏡・時間空間相関単一光子計数検出器・時間電圧変換器を組み合わせたFLIM-FRET測定システムの開発を進めた。従来の蛍光強度の変化を測定する方法と比較すると、蛍光寿命の変化を測定することにより他の分子からの蛍光による影響を排除することができ、さらにFRETによる蛍光寿命の変化が蛍光分子間の距離に依存することから、生体分子の構造変化や相互作用の変化を測定できる利点がある。
このFHM-FRET測定システムを用いた解析対象として、外来薬物3-Methylcholanthrene(3-MC)をリガンドとする薬物受容体AhRとそのパートナー因子Arntによる標的遺伝子の活性化機構の解析を行った。特にArntの核内における局在と二量体形成との関連についてこのシステムによる解析を行い、核内スペックルにおいてホモ二量体を形成しているがその他の核内領域ではホモ二量体は形成されていないことを見いだした。さらにレポーターとしてmRFPを用いることにより単一生細胞におけるレポーターの活性を測定する系を構築した。Arntの核内局在は核一様に存在している場合とスペックルを形成している場合がある。そこでArntの核内局在とレポーターの活性との相関関係を測定したところ、スペックル形成と共に転写活性を有する細胞の分布が増加していることが示された。したがってArntの核内スペックルにおけるホモ二量体形成がレポーターの転写活性化に重要であることが示された。このシステムでは細胞の「集団」を用いた実験では明らかになりにくい転写因子の機能を単一生細胞で観察することにより明らかにすることができた。

報告書

(2件)
  • 2007 実績報告書
  • 2006 実績報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて 2007 2006

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 2件)

  • [雑誌論文] Identification of amino acid residues in the Ah receptor involved in ligand binding.2007

    • 著者名/発表者名
      Goryo, K.
    • 雑誌名

      Biochem. Biophys. Res. Commun. 354

      ページ: 396-402

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] The effects of dickkopf1 (DKK1) on gene expression and Wnt signaling by melanocytes: mechanisms underlying its suppression of melanocyte function and proliferation.2007

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi, Y.
    • 雑誌名

      Journal of Investigative Dermatology 127

      ページ: 1217-1225

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] The Effects of Dickkopf 1 on Gene Expression and Wnt Signaling by Melanocytes : Mechanisms Underlying Its Suppression of Melanocyte Function and Proliferation.2007

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi, Y.
    • 雑誌名

      Journal of Investigative Dermatology (in press)

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Identification of amino acid residues in the Ah receptor involved in ligand binding.2007

    • 著者名/発表者名
      Goryo, K.
    • 雑誌名

      Biochemical an Biophysical Research Communication 354 (2)

      ページ: 396-402

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Intracellular composition of fatty acid affects the processing and function of tyrosinase through the ubiquitin-proteasome pathway.2006

    • 著者名/発表者名
      Ando, H.
    • 雑誌名

      Biochemical Journal 394 (1)

      ページ: 43-50

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書

URL: 

公開日: 2006-04-01   更新日: 2018-03-28  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi