マイクロダイセクションを用いた糖鎖の領域特異的解析法の開発

• 研究課題/領域番号: 18390011
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 物理系薬学
• 研究機関: 立命館大学 (2008); 千葉大学 (2006-2007)
• 研究代表者: 豊田 英尚 立命館大学, 薬学部, 教授 (70217579)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 15,860千円 (直接経費: 14,900千円、間接経費: 960千円); 2008年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2007年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2006年度: 11,700千円 (直接経費: 11,700千円)
• キーワード: 糖鎖 / レーザーマイクロダイセクション / マイクロダイセクション / 脳 / コンドロイチン硫酸 / 高速液体クロマトグラフィー / N-結合糖鎖

研究概要

遺伝子発現のパターンが細胞や組織で異なっているのと同様に, 起源, 分化の状態に応じて糖鎖も様々に変化していることが予測され興味が持たれているが, 脳のように構造が複雑で, 領域特異的に役割分担が決定している組織の糖鎖を解析する手段はこれまでに存在しなかった. 本研究では, レーザーマイクロダイセクションで微小部位を切り取り糖鎖の分析をする方法を研究した. その結果, 脳組織切片から微小領域を回収後, 様々な種類の糖鎖構造を解析することが可能になった.

研究成果

• [雑誌論文] モデル生物と分析化学 (2008)
  • 著者名/発表者名: 豊田英尚
  • 雑誌名: Bunseki ページ: 222-227
  • NAID: 10021100855
• [雑誌論文] Heparan sulfate regulates self-renewal and pluripotency of embryonic stem cells (2008)
  • 著者名/発表者名: N. Sasaki, K. Okishio, K. Ui-Tei, K. Saigo, A. Kinoshita-Toyoda, H. Toyoda, T. Nishimura, Y. Suda, M. Hayasaka, K. Hanaoka, S. Hitoshi, K. Ikenaka, S. Nishihara
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 283 ページ: 3594-3606
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional analysis of proteoglycan galactosyltransferase II RNA interference mutant flies (2008)
  • 著者名/発表者名: M. Ueyama, H. Takemae, Y. Ohmae, H. Yoshida, H. Toyoda, R. Ueda, S. Nishihara
  • 雑誌名: R. Ueda, S. Nishihara, J. Biol. Chem 283 ページ: 6076-6084
  • 査読あり
• [雑誌論文] Heparan sulfate regulates self-renewal and pluripotency of embryonic stem cells (2008)
  • 著者名/発表者名: N. Sasaki, K. Okishio, K. Ui-Tei, K. Saigo, A. Kinoshita-Toyoda. H. Toyoda, T. Nisbimura. Y. Suda, M. Hayasaka, K. Hanaoka, S. Hitoshi, K. Ikenaka, S. Nishiara
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 285 ページ: 3594-3606
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional analysis of proteoglycan galactosyltransferase II RNA interference mutant flies (2008)
  • 著者名/発表者名: M. Ueyama, H. Takemae, Y. Ohame, H. Yoshida. H. Toyoda, R. Ueda, S. Nishihara
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 283 ページ: 6076-6084
  • 査読あり
• [雑誌論文] モデル生物と分析化学 (2008)
  • 著者名/発表者名: 豊田英尚
  • 雑誌名: ぶんせき 5 ページ: 222-227
  • NAID: 10021100855
• [雑誌論文] Nucleotide-sugar transporter SLC35D1 is critical to chondroitin sulfate synthesis in cartilage and skeletal development in mouse and human (2007)
  • 著者名/発表者名: S. Hiraoka, T. Furuichi, G. Nishimura, S. Shibata, M. Yanagishita, D. L. Rimoin, A. Superti-Furga, P. G. Nikkels, M. Ogawa, K. Katsuyama, H. Toyoda, A. Kinoshita-Toyoda, N. Ishida, K. Isono, Y. Sanai, D. H. Cohn, H. Koseki. and S. Ikegawa
  • 雑誌名: Nat. Med 13 ページ: 1363-1367
• [雑誌論文] Glycomics of proteoglycan biosynthesis in murine embryonic stemcell differentiation (2007)
  • 著者名/発表者名: A. V. Nairn, A. Kinoshita-Toyoda, H. Toyoda, J. Xie, K. Harris, S. Dalton, M. Kulik, J. M. Pierce, T. Toida, K. W. Moremen, R. J. Linhardt
  • 雑誌名: J. Proteome Res 6 ページ: 4374-4387
• [雑誌論文] Reduced sulfation of chondroitin sulfate in thyroglobulin derived from human papillary thyroid carcinomas (2007)
  • 著者名/発表者名: N. Emoto, Y. Kunii, M. Ashizawa, S. Oikawa, K. Shimizu, M. Shimonaka, A. Toyoda and H. Toyoda
  • 雑誌名: Cancer Sci 98 ページ: 1577-1581
• [雑誌論文] HPLC determination of chondrosine in mouse blood plasma after intravenous or oral dose (2007)
  • 著者名/発表者名: S. Kusano, A. Ootani, S. Sakai, N. Igarashi, A. Takeguchi, H. Toyoda, T. Toida
  • 雑誌名: Biol. Pharm. Bull 30 ページ: 1365-1368
• [雑誌論文] Mosquito heparan sulfate and its potential role in malaria infection and transmission (2007)
  • 著者名/発表者名: P. Sinnis, A. Coppi, T. Toida, H. Toyoda, A. Kinoshita-Toyoda, J. Xie, M. M. Kemp and R. J. Linhardt
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 282 ページ: 25376-25384
• [雑誌論文] Matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry analysis of hyaluronan oligosaccharides (2007)
  • 著者名/発表者名: S. Sakai, K. Hirano, H. Toyoda, R. J. Linhardt and T. Toida
  • 雑誌名: Anal. Chim. Acta 593 ページ: 207-213
• [雑誌論文] Regulation of heparan sulfate 6-0-sulfation by β-secretase activity (2007)
  • 著者名/発表者名: N. Nagai, H. Habuchi, S. Kitazume, H. Toyoda, Y. Hashimoto and K. Kimata
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 282 ページ: 14942-14951
• [雑誌論文] Drosophila β 1,4-N-acetylgalactosaminyltransferase-A synthesizes the LacdiNAc structures on several glycoproteins and glycosphingolipids (2007)
  • 著者名/発表者名: N. Sasaki, H. Yoshida, T. J. Fuwa, A. Kinoshita-Toyoda, H. Toyoda, Y. Hirabayashi, H. Ishida, R. Ueda, S. Nishihara
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 354 ページ: 522-527
• [雑誌論文] Drosophila β1,4-N-acetylgalactosaminyltransferase-A synthesizes theLacdiNAc stuctures on several glycoproteins and glycosphingolipids (2007)
  • 著者名/発表者名: N.Sasaki, H.Yoshida, T.J. Fuwa, A.Kinoshita-Toyoda, H.Toyoda, YHiabayashi, H.Ishida, R.Ueda, S.Nishihara
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun 354 ページ: 522-527
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of heparan sulfate 6-ο-sulfation by β-secretase activity (2007)
  • 著者名/発表者名: N.Nagai, H.Habuchi, S.Kitazume, H.Toyoda, Y.Hashimoto and K.Kimata
  • 雑誌名: J.Biol.Chem 282 ページ: 14942-14951
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mosquito heparan sulfate and its potential role in malaria infection and tranSmission (2007)
  • 著者名/発表者名: P.Sinnis, A.Coppi, T.Toida, H.Tbyoda, A.Kinoshita-Toyoda, J.Xie, M.M.Kemp and R.J.Linhardt
  • 雑誌名: Anal.Chim.Acta 593 ページ: 207-213
  • 査読あり
• [雑誌論文] Matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry analysis of hyaluronan oligosaccharides (2007)
  • 著者名/発表者名: S.Sakai, K.Hirano, H.Toyoda, RJ.Linhardt and T.Tbida
  • 雑誌名: J.Biol.Chem 282 ページ: 25376-25384
  • 査読あり
• [雑誌論文] HPLC determination of chondrosine in mouse blood plasma afterintravenous or oral dose (2007)
  • 著者名/発表者名: S.Kusano, A.Ootani, S.Sakai, N.Igarashi, A.Takeguchi, H.Toyoda, T.Toida
  • 雑誌名: Biol.Pharm.Bull 30 ページ: 1365-1368
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reduced sulfation of chondroitin sulfate in thyroglobulin derived fromhuman papillary thyroid carcinomas (2007)
  • 著者名/発表者名: N.Emoto, Y.Kunh, M.Ashizawa, S.Oikawa, K.Shimizu, M.Shimonaka, A.Tbyoda and H.Toyoda
  • 雑誌名: Cancer Sci 98 ページ: 1577-1581
  • 査読あり
• [雑誌論文] Glycomics of proteoglycan biosynthesis in murine embryonic stem celldifferentiation (2007)
  • 著者名/発表者名: A.V.Nairn, A.Kinoshita-Toyoda, H.Toyoda, J.Xie, K.Harris, S.Dalton, M.Kulik, J.M.Pierce, T.Toida, K.W.Moremen, R.J.Linhardt
  • 雑誌名: J.Proteome Res 6 ページ: 4374-4387
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nucleotide-sugar transporter SLC35Dl is critical to chondroitin sulfatesynthesis in cartilage and skeletal development in mouse and human (2007)
  • 著者名/発表者名: S.Hiraoka, T.Furuichi, G.Nishimura, S.Shibata, M.Yanagishita, D.L.Rimoin, A.Superti-Furga, PG.Nikkels, M.Ogawa, K.Katsuyama, H.Tbyoda, A.Kinoshita-Toyoda, N.Ishida, K, Isono, Y.Sanai, D.H.Cohn, H.Koseki. and S.Ikegawa
  • 雑誌名: Nat.Med 13 ページ: 1363-1367
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chondroitin acts in the guidance of gonadal distal tip cells in C. elegans (2006)
  • 著者名/発表者名: N. Suzuki, H. Toyoda, M. Sano and K. Nishiwaki
  • 雑誌名: Dev. Biol 300 ページ: 635-646
• [雑誌論文] Identification and characterization of a novel Drosophila 3'-phosphoadenosine 5'-phosphosulfate transporter (2006)
  • 著者名/発表者名: E.Goda, S.Kamiyama, T.Uno, H.Yoshida, M.Ueyama, A.Kinoshita-Toyoda, H.Toyoda H, R.Ueda, S.Nishihara
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 281 ページ: 28508-28517
• [雑誌論文] Chondroitin acts in the guidance of gonadal distal tip cells in C. elegans (2006)
  • 著者名/発表者名: N.Suzuki, H.Toyoda, M.Sano, K.Nishiwaki
  • 雑誌名: Developmental Biology 300 ページ: 635-646
• [雑誌論文] Identification and characterization of a novel Drosophila 3'-phosphoadenosine 5'-phosphosulfate transporter
  • 著者名/発表者名: E. Goda, S. Kamiyama, T. Uno, H. Yoshida, M. Ueyama, A. Kinoshita-Toyoda, H. Toyoda, R. Ueda, S. Nishihara
  • 雑誌名: J. Biol. Chem
• [学会発表] 新規糖鎖遺伝子unbas-1による複合糖質の産生 (2009)
  • 著者名/発表者名: 豊田英尚, 中村かほり, 豊田亜希子
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会要旨集3
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] C. elegansコンドロイチン重合体因子MIG-17/ADAMTS欠損の抑圧に関与する分子の同定 (2008)
  • 著者名/発表者名: 佐々壽浩, 豊田英尚, 大蔵清貴, 西脇清二
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会, 第81回日本生化学会合同大会要旨集387
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] ヘパラン硫酸はマウス胚性幹細胞の未分化と多能性を制御する (2008)
  • 著者名/発表者名: 佐々木紀彦, 沖汐和彦, 平野拓也, 程久美子, 豊田亜希子, 豊田英尚, 西村知晃, 隅田泰生, 早坂美智子, 花岡和則, 等誠司, 池中一裕, 西原祥子
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会, 第81回日本生化学会合同大会要旨集291
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 糖ヌクレオチド輸送体ノックアウトマウスを利用した発生・分化における糖鎖機能の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 平岡秀一, 古市達也, 柴田俊一, 柳下正樹, 豊田英尚, 石田信宏, 佐内豊, 西村玄, 池川志郎, 古関明彦, 浅原弘嗣
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会, 第81回日本生化学会合同大会要旨集169
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] ヘパラン硫酸はマウス胚性幹細胞の未分化と多能性を制御する (2008)
  • 著者名/発表者名: 佐々木紀彦, 沖汐和彦, 程久美子, 豊田亜希子, 豊田英尚, 西村知晃, 隅田泰生, 早坂美智子, 花岡和則, 等誠司, 池中一裕, 西原祥子
  • 学会等名: 第28回日本糖質学会要旨集78
  • 発表場所: つくば
• [学会発表] ヘパラン硫酸はマウス胚性幹細胞の未分化と多能性を制御する (2008)
  • 著者名/発表者名: 佐々木紀彦, 沖汐和彦, 程 久美子, 豊田亜希子, 豊田英尚, 西村知晃, 隅田泰生, 早坂美智子, 花岡和則, 等 誠司, 池中一裕, 西原祥子
  • 学会等名: 第28回日本糖質学会
  • 発表場所: つくば(茨城県)
• [学会発表] 糖ヌクレオチド輸送体ノックアウトマウスを利用した発生・分化における糖鎖機能の解析. (2008)
  • 著者名/発表者名: 平岡秀一, 古市達也, 柴田俊一, 柳下正樹, 豊田英尚, 石田信宏, 佐内 豊, 西村 玄, 池川志郎, 古関明彦, 浅原弘嗣
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会, 第81回日本生化学会合同大会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] C. elegansコンドロイチン重合体因子MIG-17/ADAMTS欠損の抑圧に関与する分子の同定 (2008)
  • 著者名/発表者名: 佐々壽浩, 豊田英尚, 大蔵清貴, 西脇清
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会, 第81回日本生化学会合同大会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 新規糖鎖遺伝子unbas-1による複合糖質の産生 (2008)
  • 著者名/発表者名: 豊田英尚, 中村かほり, 豊田亜希子
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] mig-22遺伝子の優性変異はmig-17変異体のDTC移動異常を抑圧する (2007)
  • 著者名/発表者名: 佐々壽浩,豊田英尚, 大蔵清貴, 西脇清二
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会・第80回日本生化学会要旨集365
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] ショウジョウバエを用いた糖鎖関連遺伝子の網羅的機能解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 西原祥子, 上山盛夫, 山本(日野)美紀, 吉田英樹, 不破尚志, 後藤聡, 豊田英尚, 上田龍
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会・第80回日本生化学会要旨集144
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] ショウジョウバエunbas-1変異体を用いた糖鎖機能の解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 中村かほり, 細山沙織, 戸井田敏彦, 豊田亜希子, 豊田英尚
  • 学会等名: 第51回日本薬学会関東支部会要旨集93
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] レーザーマイクロダイセクションを用いた脳内糖鎖の解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 高戸美緒, 井関友美, 中込麻里子, 戸井田敏彦, 豊田亜希子, 豊田英尚
  • 学会等名: 第51回日本薬学会関東支部会要旨集89
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] マボヤ(Halocynthia roretzi)由来新規デルマタン硫酸の単離と構造特性 (2007)
  • 著者名/発表者名: 梅沢道代, 豊田英尚, 戸井田敏彦
  • 学会等名: 第51回日本薬学会関東支部会要旨60
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] コンドロイチン硫酸の経口吸収における分子量の影響 (2007)
  • 著者名/発表者名: 竹口敦子, 五十嵐尚子, 酒井信夫, 豊田英尚, 戸井田敏彦
  • 学会等名: 第51回日本薬学会関東支部会要旨集54
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 新規低分子ヘパリンの構造と生理活性 (2007)
  • 著者名/発表者名: 中務裕子, 豊田英尚, 戸井田敏彦
  • 学会等名: 第51回日本薬学会関東支部会要旨集53
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] レーザーマイクロダイセクションを用いた脳N-結合糖鎖の領域特異的解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 中込麻里子, 高戸美緒, 戸井田敏彦, 西原祥子, 豊田亜希子, 豊田英尚
  • 学会等名: 第27回日本糖質学会年会要旨集92
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] ショウジョウバエ機能獲得変異体を用いたムチン型糖鎖の解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 細山沙織, 豊田亜希子, 戸井田敏彦, 豊田英尚
  • 学会等名: 日本薬学会127年会要旨集3, 41
  • 発表場所: 富山
• [学会発表] レーザーマイクロダイセクションを用いた脳N-結合糖鎖の領域特異的解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 中込 麻里子, 高戸 美緒, 戸井田 敏彦, 西原 祥子, 豊田 亜希子, 豊田 英尚
  • 学会等名: 第27回日本糖質学会年会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] mig-22貴伝子の優性変異はmig-17変異体のDTC移動異常を抑圧する (2007)
  • 著者名/発表者名: 佐々壽 浩, 豊田 英尚, 大蔵 清貴, 西脇 清二
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会・第80回日本生化学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] メチルエステル化グリコサミノグリカンの酵素分解平野花奈 (2006)
  • 著者名/発表者名: 酒井信夫, 豊田英尚, 戸井田敏彦
  • 学会等名: 第26回日本糖質学会年会講旨集168
  • 発表場所: 仙台
• [学会発表] モデル生物を用いたN-結合糖鎖超微量分析法の開発 (2006)
  • 著者名/発表者名: 豊田亜希子, 伊藤美樹子, 中込麻里子, 高戸美緒, 戸井田敏彦, 西原祥子, 豊田英尚
  • 学会等名: 第26回日本糖質学会年会要旨集145
  • 発表場所: 仙台
• [学会発表] 糖鎖の微量分析法の開発とモデル生物を用いた糖鎖機能解明への応用 (2006)
  • 著者名/発表者名: 豊田英尚, 細山沙織, 伊藤美樹子, 雨ノ宮奈穂子, 中村はるか, 戸井田敏彦, 西原祥子, Scott B. Selleck, 豊田亜希子
  • 学会等名: 第26回日本糖質学会年会要旨集73
  • 発表場所: 仙台
• [備考]
  • URL: http://www.ritsumei.ac.jp/pharmacy/toyoda/seitaibunseki/top.html