デュシャンヌ型筋ジストロフィー遺伝子治療を目指したヒト人工染色体ベクターの作製

• 研究課題/領域番号: 18390107
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 人類遺伝学
• 研究機関: 鳥取大学
• 研究代表者: 押村 光雄 鳥取大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (20111619)
• 研究分担者: 加藤 基伸 鳥取大学, 医学部, 助教 (00273904) ; 香月 康宏 鳥取大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (90403401)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 13,160千円 (直接経費: 11,000千円、間接経費: 2,160千円); 2008年度: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2007年度: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2006年度: 3,800千円 (直接経費: 3,800千円)
• キーワード: 遺伝子治療 / 染色体工学 / ヒト人工染色体 / 筋ジストロフィー / 間葉系幹細胞 / ES細胞

研究概要

デュシャンヌ型筋ジストロフィー(DMD)の遺伝子治療を目指して、2. 4Mb におよぶジストロフィン(DMD)遺伝子ゲノム領域を染色体改変技術を利用した染色体転座型クローニング法でHAC ベクター上にクローニングすることに成功した(DYS-HAC ベクターとよぶ)。このDYS-HACベクターを保持するキメラマウスにおいて、DMD 遺伝子の発現は組織特異的かつ筋肉の細胞膜周辺に発現することが示された。さらにヒト細胞でのDYS-HAC ベクターは非常に安に維持されることが示された。以上のことより、本研究で作製したDYS-HAC ベクターはDMD の遺伝子治療に利用できることが示された。

研究成果

• [雑誌論文] A highly stable and non-integrated human artificial chromosome(HAC)containing the 2.4Mb entire human dystrophin gene (2009)
  • 著者名/発表者名: Hoshiya H.
  • 雑誌名: Mol. Therapy. 17 ページ: 309-317
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced apoptosis during early neiironal differentiation in mouse ES cells with autosomal imbalance. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kai Y.
  • 雑誌名: Cell Res. 19 ページ: 247-258
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transfer human artificial chromosome vectors into stem cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Oshimura M., Katoh M.
  • 雑誌名: Reproductive BioMedicine Online Vol.16 No.1 ページ: 57-69
• [雑誌論文] Correction of a genetic defect in multipotentGermline stem cells using a human artificial chromosome (2008)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Y., Hoshiya H., Kai Y., Abe S., Takiguchi M., Osaki M.,Kawazoe S., Katoh M., Kanatsu-Shinohara M., Inoue K., Kajitani N., Yoshino N., Shirayoshi Y., Ogura A., Shinohara T., BarrettJC., Oshimura M.
  • 雑誌名: Gene Therapy 15 ページ: 617-24
• [雑誌論文] A highly stable and non-integrated human artificial chromosome(HAC) containing the 2.4Mb entire human dystrophin gene (2008)
  • 著者名/発表者名: Hoshiya H., Kazuki Y., Abe S., Takiguchi M., Kajitani N., Watanabe Y., Yoshino T.,Shirayoshi Y., Higaki K., Messina G., Cossu G., Oshimura M.,
  • 雑誌名: Mol. Therapy
• [雑誌論文] Telomerase-mediated life-span extension of human primary fibroblasts by human artificial chromosome (HAC) vector (2008)
  • 著者名/発表者名: Shitara S, Kakeda M, Nagata K, Hiratsuka M, Sano A, Osawa K, Okazaki A, Katoh M, Kazuki Y, Oshimura M, Tomizuka K
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun Volume 369, number 3 ページ: 807-11
• [雑誌論文] Telomerase-mediated life-span extension of human primary fibroblasts by human artificial chromosome(HAC)vector. (2008)
  • 著者名/発表者名: Shitara S
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 369 ページ: 807-811
  • 査読あり
• [雑誌論文] Correction of a genetic defect in multipotent germline stem cells using a human artificial chromosome. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Y
  • 雑誌名: Gene Ther. 15 ページ: 617-624
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transfer of human artificial chromosome vectors into stem cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Oshimura M
  • 雑誌名: Reprod Biomed Online. 16 ページ: 57-69
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human artificial chromosome vectors meet stem cells : new prospects for gene delivery (2006)
  • 著者名/発表者名: Ren X, Tahimic CG, Katoh M, Kurimasa A, Inoue T, Oshimura M
  • 雑誌名: Stem Cell Rev 2 ページ: 43-50
• [雑誌論文] Human artificial choromosome vectors meet stem cells : new prospects for gene delivery. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ren X
  • 雑誌名: Stem Cell 2・1 ページ: 43-50
• [学会発表] 染色体工学技術を用いたヒト型モデル動物の作製と応用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 香月康宏
  • 学会等名: 第129回日本薬学会年会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-03-26
• [学会発表] A novel human artificial chromosome (HAC)for gene therapy and animal transgenesis (2008)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Y
  • 学会等名: ASGT 11^<th> annual meeting
  • 発表場所: USA, Boston
  • 年月日: 2008-05-30
• [学会発表] A human artificial chromosome (HAC)vector with about 2.4 Mb-human Dystrophin genome including native expression control elements (2008)
  • 著者名/発表者名: Hoshiya H
  • 学会等名: ASGT 11^<th> annual meeting
  • 発表場所: USA, Boston
  • 年月日: 2008-05-30
• [学会発表] 新規ヒト人工染色体ベクターの構築 : サブテロメアを用いた高発現ベクター系 (2008)
  • 著者名/発表者名: 掛田実、永田恵子、佐野暁子、大澤加奈子、岡崎晃代、設楽真吾、香月康宏、押村光雄、富塚一磨
  • 学会等名: 第6回幹細胞シンポジウム
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] A human artificial chromosome (HAC) vector with about 2.4 Mb-human Dystrophin genome including native expression control elements (2008)
  • 著者名/発表者名: Hoshiya H., Kazuki Y., Abe S., Kai Y., Takiguchi M., Iida Y., Watanabe Y., Osaki M., Kajitani N., Yoshino T., Shirayoshi Y. and Oshimura M.
  • 学会等名: ASGT 11^<th> annual meeting
  • 発表場所: U.S.A.
• [学会発表] A novel human artificial chromosome (HAC) for gene therapy and animal transgenesis (2008)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Y., Hoshiya H., Abe S., Takiguchi M., Iida Y., Watanabe Y., Osaki M., Katoh M., Kajitani N., Yoshino T., Shirayoshi Y., Hiratsuka M., Kurimasa K., and Oshimura M.
  • 学会等名: ASGT 11th annual meeting
  • 発表場所: U.S.A.
• [学会発表] 遺伝子治療に向けた新規遺伝子治療用ヒト人工染色体ベクターの開発 (2008)
  • 著者名/発表者名: 香月康宏, 星谷英寿, 甲斐義輝, 阿部智志, 滝口正人, 飯田雄一, 渡辺義徳, 尾崎克彦, 梶谷尚世, 吉野とう子, 白吉安昭, 富松望, 平塚正治, 栗政明弘, 押村光雄
  • 学会等名: 第7回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] 多能性精原幹細胞(mGS)とヒト人工染色体ベクターを用いた欠損型遺伝子治療を目指して (2008)
  • 著者名/発表者名: 阿部智志、香月康宏、星谷英寿、甲斐義輝、滝口正人、尾崎克彦、川添真史郎、加藤基伸、篠原美都、井上貴美子、梶谷尚世、吉野とう子、白吉安昭、小倉淳郎、篠原隆司、押村光雄
  • 学会等名: 第7回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] ジストロフィンゲノムDNA(2.5Mb)を搭載したHAC ベクター : 遺伝子治療を目指して (2008)
  • 著者名/発表者名: 星谷英寿、香月康宏、甲斐義輝、阿部智志、滝口正人、飯田雄一 ,渡辺義徳, 尾崎克彦、梶谷尚世,吉野とう子,白吉安昭 ,押村光雄
  • 学会等名: 第7回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Genetic restoration of ataxia telangiectasia cells using a human artificial chromosome mediated-genomic cloning system (2007)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Y
  • 学会等名: ASGT 10th annual meeting
  • 発表場所: USA
  • 年月日: 2007-06-01
• [学会発表] Functional restoration of a genetic defect in multipotent germline stem cells by human artificial chromosome containing a genomic insert (2006)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Y., Hoshiya, H., Kai Y., Abe S., Takiguchi M., Osaki M., Kanatsu-Shinohara M., Kajitani N., ShirayoshiY., Hratsuka M., Ogura A., Shinohara T.and Oshimura, M
  • 学会等名: ASGT 9^<th> annual meeting
  • 発表場所: U.S.A.
• [図書] 幹細胞とヒト人工染色体ベクターの出会いVol.19, No.1 (2007)
  • 著者名/発表者名: 香月康宏、押村光雄
  • 出版者: アニテックス
• [図書] ヒト人工染色体ベクター導入と遺伝子・再生医療への可能性vol.10No.4 (2006)
  • 著者名/発表者名: 香月康宏、押村光雄
  • 出版者: 分子呼吸器病
• [図書] 11Vol.5 No.4 (2006)
  • 著者名/発表者名: 平塚正治、押村光雄
  • 出版者: 再生医療
• [産業財産権] ヒト人工染色体(HAC)ベクター及びヒト人工染色体(HAC)を有するヒト細胞医薬 (2007)
  • 発明者名: 掛田実、富塚一磨、押村光雄、香月康宏
  • 出願年月日: 2007-07-06
  • 外国
• [産業財産権] ヒト人工染色体(HAC)ベクター及びヒト人工染色体(HAC)を有するヒト細胞医薬 (2007)
  • 発明者名: 掛田実、富塚一磨、押村光雄、香月康宏
  • 権利者名: キリンファーマ株式会社
  • 出願年月日: 2007-07-06
  • 外国
• [産業財産権] 内在遺伝子を含まないヒト人工染色体ベクター (2006)
  • 発明者名: 押村光雄、香月康宏、松岡隆之
  • 産業財産権番号: 2006-127372
  • 出願年月日: 2006-05-02
• [産業財産権] 内在遺伝子を含まないヒト人工染色体ベクター (2006)
  • 発明者名: 押村光雄, 香月康宏, 松岡隆之
  • 権利者名: 鳥取大学, 有限株式会社chromocenter
  • 産業財産権番号: 2006-127372
  • 出願年月日: 2006-05-02