細菌プロテアーゼ抑制を基盤としたグラム陽性菌敗血症治療法の開発に関する研究

• 研究課題/領域番号: 18390125
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 今村 隆寿 熊本大学, 大学院・医学薬学研究部, 准教授 (20176499)
• 研究分担者: 梅山 秀明 北里大学, 薬学部, 教授 (20050619)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 10,760千円 (直接経費: 9,500千円、間接経費: 1,260千円); 2008年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円); 2007年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円); 2006年度: 5,300千円 (直接経費: 5,300千円)
• キーワード: 黄色ブドウ球菌 / プロテアーゼ / 阻害剤 / 血管漏出 / 敗血性ショック / システインプロテアーゼ / 敗血症 / 治療 / ショック / 凝固 / 線溶 / 欠損株

研究概要

黄色ブドウ球菌放出病原プロテアーゼstaphopain A とBの立体構造に基づいて活性中心部の鍵穴に当てはまる化学物質を30万種類程度の試薬リストからコンピュータを使ってドッキング計算より選出し、阻害効果を調べた。Staphopain BについてはKi値が数10μM程度の阻害物質しか得られなかったが、Aに対して最も強い阻害効果をもつchemical #11は、Ki値1.3μMで拮抗型阻害を示し、本菌敗血性ショック発症に直結するstaphopain Aの血管漏出作用を20 μM でほぼ完全に抑制した。さらに他の細菌や細胞、血漿由来のプロテアーゼに対してもその種類や基質特異性とは無関係に阻害効果がみられたことから、プロテアーゼが関係する疾患への治療を含めた多方面への応用性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] A fatal hypotension by sildenafil in an end-stage renal disease patient with hypertension and abnormal pharmacokinetics of the medicine (2009)
  • 著者名/発表者名: Wada, Y., Kikuchi, K., & Imamura, T.
  • 雑誌名: Nephrology 14 ページ: 357-358
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lysine-specific gingipain promotes lipopolysaccharides- and active vitamin D_3-induced osteoclast differentiation by degrading osteoprotegerin (2009)
  • 著者名/発表者名: Yasuhara, R., Miyamoto, Y., Takami, M., Imamura, T., Potempa, J., Yoshimura, K., & Kamijo, R.
  • 雑誌名: Biochem. J 419 ページ: 159-166
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lysine-specific gingipain promotes lipopolysaccharides- and active vitamin D_3-induced osteoclast differentiation by degrading osteoprotegerin. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yasuhara, R.
  • 雑誌名: Biochem. J. 419 ページ: 159-166
  • 査読あり
• [雑誌論文] Thrombin in synovial fluid as a marker of synovial inflammation: a definite measurement by ELISA and correlation with VEGF (2008)
  • 著者名/発表者名: Kitamoto, Y., Nakamura, E., Kudo, S., Tokunaga, H., Murakami, E., Noguchi, K., & Imamura, T.
  • 雑誌名: Clinica Chimica Acta 389 ページ: 159-160
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prostate expression of endothelins and their receptors in rat growth. Reprod (2008)
  • 著者名/発表者名: Wada. Y., Takahashi, W., Latifpour, J., Weiss, R. M., Matsumoto, K., Matsui, K., Yamada, G., and *Imamura, T.
  • 雑誌名: Fertil. Develop 20 ページ: 750-759
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of C5a by ASP, a serine protease released from Aeromonas sobria (2008)
  • 著者名/発表者名: Nitta, H., Imamura, T., Wada, Y., Irie, A., Kobayashi, H., Okamoto, K., & Baba, H
  • 雑誌名: J. Immunol 181 ページ: 3602-3608
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impaired plasma clotting induction through fibrinogen degradation by ASP, a serine protease released from Aeromonas sobria (2008)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T., Nitta, H., Wada, Y., Kobayashi, H., & Okamoto, K
  • 雑誌名: FEMS Mirobiol. Lett 284 ページ: 35-42
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anti-VEGF therapy for crescentic glomerulonephritis? (2008)
  • 著者名/発表者名: Kitamoto, Y., Taguma, Y., Arizono, K., & Imamura, T
  • 雑誌名: Am. J. Kidney Dis 52 ページ: 710-711
  • 査読あり
• [雑誌論文] Coexistence of serus cystadenoma and ductal adenocarcinoma in the pancreas : A case report and literature review (2008)
  • 著者名/発表者名: Nitta, H., Hirota, M., Ohkado, A., Motomura, Y., Chikamoto, A., Shibata, M., Takamori, H., Kanemitsu, K., Imamura, T., Yamamoto, T., & Baba, H
  • 雑誌名: Pancreas 36 ページ: 218-219
  • 査読あり
• [雑誌論文] Low serum PSA levels of diabetes mellitus-caused end-stage renal disease patients (2008)
  • 著者名/発表者名: Wada, Y., Kikuchi, K., Kikkawa, H., & Imamura, T
  • 雑誌名: Nephrol. Dial. Transpl. Plus 1 ページ: 58-59
  • 査読あり
• [雑誌論文] Modified technique for improving tubeless cutaneous ureterostomy using the Ariyoshi method (2008)
  • 著者名/発表者名: Wada, Y., Kikuchi, K., Suenaga, T., Imamura, T., Matsumoto, K., & Kodama, K
  • 雑誌名: Int. J. Urol 15 ページ: 144-150
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impaired plasma clotting induction through fibrinogen degradation by ASP, a serine protease released from Aeromonas sobria. (2008)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T.
  • 雑誌名: FEMS Mirobiol. Lett. 284 ページ: 35-42
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of C5a by ASP, a serine protease released from Aeromonas sobria. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nitta, H.
  • 雑誌名: J. Immunol. 181 ページ: 3602-3608
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activation of prothrombin by ASP, a serine protease released from Aeromonas sobria (2007)
  • 著者名/発表者名: Nitta, H., Kobayashi, H., Irie, A., Baba, H., Okamoto, K., & Imamura, T
  • 雑誌名: FEBS lett 581 ページ: 5935-5939
  • 査読あり
• [雑誌論文] Augmentation of vascular permeability of VEGF is enhanced by KDR-binding proteins (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamazaki, Y., Nakano, Y., Imamura, T., & Morita, T
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 355 ページ: 693-699
  • 査読あり
• [雑誌論文] Induction of vascular leakage through kinin release by a serine proteinase from Aeromonas sobria (2006)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T., Kobayashi, H., Khan, R., Nitta, H., & Okamoto, K
  • 雑誌名: J. Immunol 177 ページ: 8723-8729
  • 査読あり
• [雑誌論文] Arginine-specific gingipains from Porphyromonas gingivalis deprive protective functions of secretory leukocyte inhibitor in periodontal tissue (2006)
  • 著者名/発表者名: Into, T., Inomata, M., Kanno, Y., Matsuyama, T., Machigashira, M., Izumi,Y., Imamura, T., Nakashima, M., Noguchi, T., & Matsushita, K
  • 雑誌名: Clin. Exp.Immunol 145 ページ: 545-554
  • 査読あり
• [雑誌論文] Urokinase immobilization suppresses inflammatory responses to polyurethane tubes implanted in rabbit muscles (2006)
  • 著者名/発表者名: Lai, Z.-F., Imamura, T., Koike, N., and Kitamoto, Y
  • 雑誌名: J. Biomed. Mater. Res 76A ページ: 81-85
  • 査読あり
• [雑誌論文] DX-9065a inhibits proinflammatory events induced by gingipains and factor Xa (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsushita, K., Imamura, T., Tomikawa, M., Tancharoen, S., Tatsuyama, S., & Maruyama, I
  • 雑誌名: J. Periodont. Res 41 ページ: 148-156
  • 査読あり
• [雑誌論文] Selcetive inhibition of Porphyromonas gingivalis growth by a factor Xa inhibitor, DX-9065a (2006)
  • 著者名/発表者名: 17.Matsushita, K., Imamura, T., Tancharoen, S., Tatsuyama, S., Tomikawa, M.,Travis, J., Potempa, J., Torii, M., & Maruyama, I
  • 雑誌名: J. Periodont. Res 41 ページ: 171-176
  • 査読あり
• [雑誌論文] Urokinase immobilization suppresses inflammatory responses to polyurethane tubes implanted in rabbit muscles. (2006)
  • 著者名/発表者名: Lai, Z.-F., Imamura, T., 他2名
  • 雑誌名: J.Biomed.Mater.Res. 76A ページ: 81-85
• [雑誌論文] DX-9065a inhibits proinflammatory events induced by gingipains and factor Xa. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsushita, K., Imamura, T., 他4名
  • 雑誌名: J.Periodont.Res. 41 ページ: 148-156
• [雑誌論文] Selcetive inhibition of Porphyromonas gingivalis growth by a Factor Xa inhibitor, DX-9065a. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsushita, K., Imamura, T., 他4名
  • 雑誌名: J.Periodont.Res. 41 ページ: 171-176
• [雑誌論文] Arginine-specific gingipains from Porphyromonas gingivalis deprive protective functions of secretory leukocyte inhibitor in periodontal tissue. (2006)
  • 著者名/発表者名: Into, T., Imamura, T., 他8名
  • 雑誌名: Clin.Exp.Immunol. 145 ページ: 545-554
• [雑誌論文] Induction of vascular leakage through kinin release by a serine proteinase from Aeromonas sobria. (2006)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T., Kobayashi, H., 他3名
  • 雑誌名: J.Immunol. 117 ページ: 8723-8729
• [雑誌論文] Augmentation of vascular permeability of VEGF by KDR-binding proteins. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yamazaki, Y., Imamura, T., 他2名
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 355 ページ: 693-699
• [学会発表] 黄色ブドウ球菌, MRSA 産生protease によるDIC 発症のメカニズム (2008)
  • 著者名/発表者名: 新田英利
  • 学会等名: 第108日本外科学会
  • 発表場所: 長崎
  • 年月日: 2008-05-16
• [学会発表] 黄色ブドウ球菌, MRSA産生proteaseによるDIC発症のメカニズム (2008)
  • 著者名/発表者名: 新田英利
  • 学会等名: 第108日本外科学会
  • 発表場所: 長崎市長崎ブリックホール
  • 年月日: 2008-05-16
• [学会発表] DICの病態把握におけるFDPとD-ダイマーの意味 (2008)
  • 著者名/発表者名: 内場光浩
  • 学会等名: 第55回日本臨床検査医学会総会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] ALアミロイドーシスにおける過剰線溶と病態形成におけるuPAの関与 (2008)
  • 著者名/発表者名: 内場光浩
  • 学会等名: 第31回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Aeromonas sobriaセリンプロテアーゼASPによる血漿凝固促進とトロンビン産生 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第31回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] ALアミロイドーシスの過剰線溶および病態形成には形質細胞からのuPA が関与している (2008)
  • 著者名/発表者名: 内場光浩
  • 学会等名: 第19回九州血管血栓フォーラム
  • 発表場所: 鹿児島
• [学会発表] uPA産生形質細胞により過剰線溶をきたしたAL アミロイドーシス (2008)
  • 著者名/発表者名: 立津央
  • 学会等名: 第90回日本血液学会総会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Aeromonas sobriaセリンプロテアーゼのプロトロンビン活性化による血液凝固誘導作用 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第13回病態と治療におけるプロテアーゼとインヒビター学会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 黄色ブドウ球菌、MRSA 産生protease による敗血症性ショックおよびDIC発症のメカニズム (2008)
  • 著者名/発表者名: 新田英利
  • 学会等名: 第63回日本消化器外科学会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] Role of uPA in excessive fibrinolysis observed in AL-amyloidosis (2008)
  • 著者名/発表者名: Uchiba, M.
  • 学会等名: XIXth International Congress on Fibrinolysis and Proteolysis
  • 発表場所: Viena, Austria
• [学会発表] ハブ毒中で単独で作用する補体活性化因子の構造と機能について (2008)
  • 著者名/発表者名: 上田直子
  • 学会等名: 第52回毒素シンポジウム
  • 発表場所: 山梨県山中湖村
• [学会発表] Aeromonas sobria放出セリンプロテアーゼのC5a 産生活性 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第97回日本病理学会総会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] 糖尿病性末期腎不全患者のPSA 低値と前立腺癌低罹患率 : 血液透析患者の原疾患別比較 (2008)
  • 著者名/発表者名: 和田孝浩
  • 学会等名: 第96回日本泌尿器科学会総会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Aeromonas sobria放出セリンプロテアーゼのC5a産生活性 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第97回日本病理学会総会
  • 発表場所: 金沢市石川県立音楽堂
• [学会発表] 黄色ブドウ球菌、MRSA産生proteaseによる敗血症性ショックおよびDIC発症のメカニズム. (2008)
  • 著者名/発表者名: 新田英利
  • 学会等名: 第63回日本消化器外科学会
  • 発表場所: 札幌市ロイトン札幌
• [学会発表] Aeromonas sobriaセリンプロテアーゼのプロトロンビン活性化による血液凝固誘導作用 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第13回病態と治療におけるプロテアーゼとインヒビター学会
  • 発表場所: 大阪市千里ライフサイエンスセンター
• [学会発表] Aeromonas sobriaセリンプロテアーゼASPによる血漿凝固促進とトロンビン産生 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第31回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 大阪市大阪国際交流センター
• [学会発表] 胆嚢炎および胆嚢癌における8-nitroguanine の発現とその意義 (2007)
  • 著者名/発表者名: 新田英利
  • 学会等名: 第107日本外科学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2007-04-13
• [学会発表] 尿トロンビン測定による腎炎病巣での凝固反応活性化とその制御の解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 北本康則
  • 学会等名: 第7回TTMフォーラム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2007-03-10
• [学会発表] ハブ毒中の新規なC3/C5コンベルターゼの精製と緒性質 (2007)
  • 著者名/発表者名: 鈴木美緒
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会, 第80回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] 尿トロンビンのATIII難抑制性と腎炎部血管外凝固反応活性化依存性 (2007)
  • 著者名/発表者名: 北本康則
  • 学会等名: 第30回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 三重
• [学会発表] Production of C5a by a serine proteinase from Aeromonas sobria, leading to Neutrophil Migration and vascular leakage (2007)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T
  • 学会等名: 4th International Symposium of Proteolysis
  • 発表場所: Patras, Greece
• [学会発表] Aeromonas sobriaセリンプロテアーゼによるアナフィラトキシンC5aの産生 (2007)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第12回病態と治療におけるプロテアーゼとインヒビター学会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Augmentation of vascular permeability of vascular endothelial growth factor(VEGF)is enhanced by VEGF receptor 2-binding proteins (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamazaki, Y.
  • 学会等名: XXIst Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Geneva, Switzerland
• [学会発表] Induction of vascular leakage and plasma clotting by a serine proteinase from Aeromonas sobria (2007)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T
  • 学会等名: Xth International Symposium on Proteinase Inhibitors and Biological Control
  • 発表場所: Portoroz, Slovenia
• [学会発表] Induction of coagulation by a serine protease from Aeromonas sobria through activation of prothrombin (2007)
  • 著者名/発表者名: Nitta, H
  • 学会等名: 8th World Congress of Inflammation
  • 発表場所: Copenhagen, Denmark
• [学会発表] Aeromonas sobriaセリンプロテアーゼの凝固・線溶作用とその機序 (2007)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第96回日本病理学会総会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Induction of vascular leakage and plasma clotting by a serine proteinase from Aeromonas sobria (2007)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T.
  • 学会等名: Xth International Symposium on Proteinase Inhibitors and Biological Control
  • 発表場所: Portoroz,Slovenia
• [学会発表] Production of C5a by a serine proteinase from Aeromonas sobria,leading to Neutrophil Migration and vascular leakage (2007)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T.
  • 学会等名: 5th International Symposium of Proteolysis
  • 発表場所: Patras,Greece
• [学会発表] 尿を用いた腎炎病態のリアルタイム解析-トロンビン活性の重要性- (2006)
  • 著者名/発表者名: 北本康則
  • 学会等名: 第53回日本臨床検査医学会学術集会
  • 発表場所: 弘前
  • 年月日: 2006-11-11
• [学会発表] 腎炎治療のリアルタイムマーカー, 尿トロンビン (2006)
  • 著者名/発表者名: 北本康則
  • 学会等名: 第51回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2006-05-30
• [学会発表] 尿トロンビン解析におよぼす腎組織, 血管内, および尿中での血液凝固反応とその制御 (2006)
  • 著者名/発表者名: 北本康則
  • 学会等名: 第50回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2006-05-27
• [学会発表] Aeromonas sobriaセリンプロテアーゼによる血漿漏出とその機序 (2006)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第11回病態と治療におけるプロテアーゼとインヒビター研究会
  • 発表場所: 仙台
• [学会発表] Induction of blood coagulation and fibrinolysis by cysteine proteinases from Staphylococcus aureus : A new mechanism of disseminated intravascular coagulation (2006)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T.
  • 学会等名: 5th International Conference on Cysteine Proteinases and Their Inhibitors : From structure to regulation and biology
  • 発表場所: Portoroz, Slovenia
• [学会発表] Urokinase suppresses mononuclear and eosinophilic leukocyte infiltration in a rabbit model (2006)
  • 著者名/発表者名: Lai. Z.-F
  • 学会等名: 46th Annual Meeting of The American Society for Cell Biology
  • 発表場所: San Diego, USA
• [学会発表] Aeromonas sobriaセリンプロテアーゼのキニン遊離を介した血管漏出と血圧低下作用 (2006)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第80回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Snake venom VEGF-F is a most potent inducer of vascular permeability (2006)
  • 著者名/発表者名: Yamazaki, Y
  • 学会等名: XVth World Congress on Animal, Plant and Microbial Toxins
  • 発表場所: Glasgow, UK
• [学会発表] Aeromonas sobriaセリンプロテアーゼの血管透過性亢進作用とその機序 (2006)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 学会等名: 第95回日本病理学会総会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 尿トロンビン、CD14+16+細胞、oil red陽性細胞測定による増殖性腎炎のネフロン傷害の解析 (2005)
  • 著者名/発表者名: 北本康則
  • 学会等名: 第49回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 東京
• [図書] 炎症・再生医学事典 カリクレイン・キニン系 (2009)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 出版者: 朝倉書店出版
• [図書] カリクレイン・キニン系. 炎症・再生医学 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 出版者: 朝倉書店出版
• [備考]
  • URL: http://www.kumamoto-u.ac.jp/seeds/seeds/61580016/index.html
• [備考]
  • URL: http://www.kumamoto-u.ac.jp/seeds/seeds/61580016/index.html
• [産業財産権] 癌細胞C5a産生プロテアーゼおよびC5a受容体をターゲットにした癌治療法 (2009)
  • 発明者名: 今村隆寿、新田英利
  • 権利者名: 熊本大学長
  • 出願年月日: 2009-03-06