研究課題
基盤研究(B)
生体高分子は生体内で様々な分子と相互作用し、相互に調節もしくは作用を及ぼし合っている。そこで、我々はHIVの感染細胞内での転写活性を正に調節するNF-kBの主要サブユニットp65と直接に相互作用する宿主蛋白因子を酵母を利用したtwo-hybrid screen法で分離同定し、さらにその機能解析を進めてきた。これまでに既に7つの新しいp65相互作用因子を同定した。この数は単独研究期間としては世界一である。今年度はそのような因子の一つとしてAKIP1蛋白を同定した。AKIP1はPKAに結合して核に局在する蛋白として以前に報告されていたものであるが、p65との結合が酵母two-hybrid screenで見つかり、in vitro pull down assayおよび生細胞内でもIP-Western blot法で確認された。AKIP1が存在することによってp65(NF-kB)の核内への移行が促進され、かつNF-kBの転写因子としての活性を正に調節するp65の中央部位Ser276のPKAによるリン酸化が促進されることがわかった(Gao, et. al.J Biol Chem 283:7834-7843,2008)。また、AKIP1の発現量は細胞ごとに著しく異なるが、AKIP1が多い細胞ではPKAシグナルとNF-kB活性化シグナルは相乗的に作用するが、AKIP1がほとんど発現しない細胞ではPKAシグナルによってNF-kB活性化シグナルの抑制が起こる事が分かった(論文準備中)。今後は、感染細胞内でのHIV潜伏感染の維持におけるAKIP1の役割を追求してゆく予定である。他方、1999年に報告した別のp65相互作用蛋白RAIは胎盤組織に発現し、trophoblastの分化に重要な役割を演じており、その際に別の転写因子Sp1と相互作用していることを明らかにした(Minekawa, et. al.Endocrinology 148:5803-5810,2007)。これらの研究は、HIVの潜伏感染の維持と活性化にAKIP1やRAIなどのp65相互作用因子が重要な役割を持つ事を示し、これらの分子過程を制御していることを示唆する。
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