酵母CytoTrap法を用いたウイルス粒子形成責任宿主因子の同定とその阻害剤探索

• 研究課題/領域番号: 18390144
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: ウイルス学
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 森川 裕子 北里大学, 大学院・感染制御科学府, 教授 (20191017)
• 研究分担者: 百瀬 文隆 北里大学, 大学院・感染制御科学府, 教授 (90332204)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 17,030千円 (直接経費: 14,300千円、間接経費: 2,730千円); 2008年度: 5,590千円 (直接経費: 4,300千円、間接経費: 1,290千円); 2007年度: 6,240千円 (直接経費: 4,800千円、間接経費: 1,440千円); 2006年度: 5,200千円 (直接経費: 5,200千円)
• キーワード: 酵母 / ウイルス / 宿主因子 / 阻害剤探索 / CytoTrap / 阻害剤

研究概要

酵母"CytoTrap法"を用いてHIV粒子形成の責任宿主因子を探索し、2個のGag蛋白に結合する宿主因子(一方は既知の宿主因子AnnexinA2、他方は新規の宿主因子AUP1)を同定した。全長AUP1はHIV粒子産生を促進したが、AUP1 N末端断片は顕著に阻害した。この阻害機序を解析したところ、Gag蛋白分解促進の可能性が推測された。"CytoTrap法"を利用し、酵母でGag-Gag 阻害剤探索系を構築し、化合物ライブラリを探索した。

研究成果

• [雑誌論文] Dominant negative inhibition of human immunodeficiency virus particle production by the non-myristoylated form of Gag (2009)
  • 著者名/発表者名: S. Kawada, T. Goto, H. Haraguchi, A. Ono, & Y. Morikawa.
  • 雑誌名: J. Virol. 82 ページ: 4384-4399
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cyclin K/CPR4 inhibits primate lentiviral replication by inactivating Tat/P-TEFb-dependent LTR transcription (2008)
  • 著者名/発表者名: E. Urano, S. Shimizu, Y. Futahashi, M.Hamatake, Y. Morikawa, N. Takahashi, H.Fukazawa, N. Yamamoto, & J. Komano
  • 雑誌名: AIDS 22 ページ: 1081-1083
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ebola virus matrix VP40 protein uses the COPII transport system for its intracellular transport (2008)
  • 著者名/発表者名: S. Yamayoshi, T. Noda, H. Ebihara, H. Goto,Y. Morikawa, I. S. Lukashevich, G. Neumann, H. Feldmann, & Y. Kawaoka
  • 雑誌名: Cell Host Microbe 3 ページ: 168-177
  • 査読あり
• [雑誌論文] SOCS1 is an inducible host factor during HIV-1 infection and regulates the intracellular trafficking and stability of HIV-1 Gag (2008)
  • 著者名/発表者名: A. Ryo, N. Tsurutani, K. Ohba, R. Kimura, J. Komano, M. Nishi, H. Soeda, S. Hattori, K. Perrem, M. Yamamoto, J. Chiba, J. Mimaya, K. Yoshimura, S. Matsushita, M. Honda, A. Yoshimura, T. Sawasaki, I. Aoki, Y. Morikawa, & N. Yamamoto
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105 ページ: 294-299
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of the P-TEFb complex-interacting domain of Brd4 as an inhibitor of HIV-1 replication by functional cDNA library screening in MT-4 cells (2008)
  • 著者名/発表者名: E. Urano, Y. Kariya, Y. Futahashi, R. Ichikawa, M. Hamatake, H. Fukazawa, Y. Morikawa, T. Yoshida, Y. Koyanagi, N. Yamamoto, & J. Komano
  • 雑誌名: FEBS Let 582 ページ: 4053-4058
  • 査読あり
• [雑誌論文] SOCSl is an inducible host factor during HIV-1 infection and regulates the intracellular trafficking and stability of HIV-1 Gag (2008)
  • 著者名/発表者名: A. Ryo, N. Tsurutani, K. Ohba, R. Kimura, J. Komano, M. Nishi, H. Soeda, S. Hattori, K. Perrem, M. Yamamoto, J. Chiba, J. Mimaya, K. Yoshimura, S. Matsushita, M. Honda, A. Yoshimura, T. Sawasaki, I. Aoki, Y. Morikawa, & N. Yamamoto
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105 ページ: 294-299
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ebola virus matrix VP40 protein uses the COPII transport system for its intracellular transport. (2008)
  • 著者名/発表者名: S. Yamayoshi, T. Noda, H. Ebihara, H. Goto, Y. Morikawa, I. S. Lukashevich, G. Neumann, H. Feldmann, & Y. Kawaoka
  • 雑誌名: Cell Host Microbe 3 ページ: 168-177
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dominant negative inhibition of human immunodeficiency vims particle production by the non-myristoylated form of Gag (2008)
  • 著者名/発表者名: S. Kawada, T. Goto, H. Haraguchi, A. Ono, & Y. Morikawa.
  • 雑誌名: J. Virol. 82 ページ: 4384-4399
  • 査読あり
• [雑誌論文] Defect of Human Immunodeficiency Virus Type 2 Gag Assembly in Saccharomyces cerevisiae (2007)
  • 著者名/発表者名: Y. Morikawa, T. Goto, D. Yasuoka, F. Momose, & T. Matano
  • 雑誌名: J. Virol. 81 ページ: 9911-9921
  • 査読あり
• [雑誌論文] 蛋白質核酸酵素 (2007)
  • 著者名/発表者名: 森川裕子、鶴谷直美
  • 雑誌名: HIVの粒子形成と成熟機構 52 ページ: 1181-1186
• [雑誌論文] Visualization of microtubulemediated transport of influenza viral progeny ribonucleoprotein (2007)
  • 著者名/発表者名: F. Momose, Y. Kikuchi, K. Komase, & Y. Morikawa
  • 雑誌名: Microbes Infect 9 ページ: 1422-1433
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of Hsp90 in assembly and nuclear import of influenza virus RNA polymerase subunits (2007)
  • 著者名/発表者名: T. Naito, F. Momose, A.Kawaguchi, & K. Nagata
  • 雑誌名: J. Virol. 81 ページ: 1339-1349
  • 査読あり
• [雑誌論文] Defect of Human Immunodeficiency Virus Type 2 Gag Assembly in Saccharomyces cerevisiae (2007)
  • 著者名/発表者名: Y.Morikawa, T.Goto, D.Yasuoka, F.Momose, & T.Matano
  • 雑誌名: J.Virol. 81 ページ: 9911-9921
  • 査読あり
• [雑誌論文] Visualization of microtubule-mediated transport of influenza viral progeny ribonuc leoprotein (2007)
  • 著者名/発表者名: F.Momose, Y.Kikuchi, K.Komase, & Y.Morikawa
  • 雑誌名: Microbes Infect. 9 ページ: 1422-1433
  • 査読あり
• [雑誌論文] HIVの粒子形成と成熟機構 (2007)
  • 著者名/発表者名: 森川 裕子、鶴谷 直美
  • 雑誌名: 蛋白質核酸酵素 52 ページ: 1181-1186
• [雑誌論文] Development of a rapid and convenient method for the quantitation of HIV-1 budding (2006)
  • 著者名/発表者名: S. Sakuragi, J. Sakuragi, Y. Morikawa, & T. Shioda
  • 雑誌名: Microbes Infect 8 ページ: 1875-1881
  • 査読あり
• [雑誌論文] 酵母を用いた動物ウイルスの研究 (2006)
  • 著者名/発表者名: 森川裕子
  • 雑誌名: ウイルス 56 ページ: 9-16
  • NAID: 10017992012
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of a rapid and convenient method for the quantitation of HIV-1 budding (2006)
  • 著者名/発表者名: Sakuragi S, Sakuragi J-I, Morikawa Y, Shioda T.
  • 雑誌名: Microbes Infect. 8 ページ: 1875-1881
• [雑誌論文] Substitution of the myristoylation signal of human immunodeficiency virus type 1 Pr55Gag with the phopholipase C delta 1 pleckstrin homology domain results in infectious seudovirion production
  • 著者名/発表者名: E. Urano, T. Aoki, Y. Futahashi, T. Murakami, Y. Morikawa, N. Yamamoto, & J. Komano.
  • 雑誌名: J. Gen. Virol. (inpress)
  • 査読あり
• [学会発表] HIV-1 Gag-Pol蛋白の発現比率は粒子産生を制御する (2008)
  • 著者名/発表者名: 原口日和, 森川裕子
  • 学会等名: 第56回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2008-10-26
• [学会発表] Identification of the carboxy-terminal domain of chromatin-associated transcriptional activator bromodomain containing 4 as a specific silencer of HIV-1 replication (2008)
  • 著者名/発表者名: E. Urano, Y. Kariya, Y. Futahashi, M. Hamatake, Y. Morikawa, T. Yoshida, Y. Koyanagi, N. Yamamoto, & J. Komano
  • 学会等名: CSH Retrovirus Meeting
  • 発表場所: 米国NY
• [学会発表] DNA J/ HSP40 Co-chaperonine family によるHIV-1 複製抑制 (2008)
  • 著者名/発表者名: 浦野恵美子、奥長浩之、森川裕子、駒野淳
  • 学会等名: 第56回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] HIV-1 Gag-Pol 蛋白の発現比率は粒子産生を制御する (2008)
  • 著者名/発表者名: 原口日和、森川裕子
  • 学会等名: 第56回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] インフルエンザウイルスRNP 複合体のプラスミドトランスフェクションによる再構成と核外輸送機構の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 百瀬文隆、関本哲也、森川裕子
  • 学会等名: 第56回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] 非ヌクレオチド系逆転転写酵素阻害剤エファビレンツによるHIV粒子形成阻害機構 (2008)
  • 著者名/発表者名: 周東翔、原口日和、潟永博之、森川裕子
  • 学会等名: 第56回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] ライブセルイメージングによるインフルエンザウイルス子孫RNP 複合体の細胞内輸送機構の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 関本哲也、百瀬文隆、森川裕子
  • 学会等名: 56回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] 宿主因子AUP1によるHIVの複製制御機構の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 三枝祥子、森川裕子
  • 学会等名: 56回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] インフルエンザウイルスRNP 複合体輸送機構のライブセルイメージング (2008)
  • 著者名/発表者名: 百瀬文隆、関本哲也、森川裕子
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会/第81回日本生化学会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] エンドソーム分子HRSによるヒト免疫不全ウイルスのGag輸送制御機能の解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 奥長 浩之、鶴谷 直美、森川 裕子
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会/第80回日本生化学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-14
• [学会発表] Upregulating expression of cyclin K/CPR4 limits the replication of HIV-1 (2007)
  • 著者名/発表者名: E. Urano, S. Shimizu, M. Hamatake, Y. Morikawa, & J. Komano
  • 学会等名: CSH Retrovirus Meeting
  • 発表場所: 米国NY
• [学会発表] HIV潜伏感染細胞からのウイルス産生機構 (2007)
  • 著者名/発表者名: 須山真理、佐野浩二、森川裕子
  • 学会等名: 第55回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] Gag出芽機構に関与する宿主因子の網羅的解析-出芽酵母を利用した遺伝学的アプローチ (2007)
  • 著者名/発表者名: 冨田有里子、櫻木小百合、森川裕子、河岡義裕
  • 学会等名: 第55回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] HIV-1 Gag-Pol蛋白の細胞内輸送 (2007)
  • 著者名/発表者名: 原口日和、森川裕子
  • 学会等名: 第55回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] HIV-1 Gag-Pol 蛋白の細胞内輸送 (2007)
  • 著者名/発表者名: 原口日和、森川裕子
  • 学会等名: 第55回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] 新規抗インフルエンザウイルスNPモノクローナル抗体によるRNP複合体の可視化 (2007)
  • 著者名/発表者名: 百瀬文隆、菊池雄士、駒瀬勝啓、森川裕子
  • 学会等名: 第55回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] エンドソーム分子HRS によるヒト免疫不全ウイルスのGag 輸送制御機能の解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 奥長浩之、鶴谷直美、森川裕子
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会/第80回日本生化学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] ヒト免疫不全ウイルスGag-Pol蛋白の細胞内輸送制御機構 (2007)
  • 著者名/発表者名: 原口日和、森川裕子
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会/第80回日本生化学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] 微小管依存的なインフルエンザウイルス子孫vRNP 複合体輸送の可視化 (2007)
  • 著者名/発表者名: 百瀬文隆、菊池雄士、駒瀬勝啓、森川裕子
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会/第80回日本生化学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Identification of host cellular machinery for HIV-1 Gag trafficking (2006)
  • 著者名/発表者名: N. Tsurutani, T. Goto, I. S. Ohno, & Y. Morikawa
  • 学会等名: CSH Retrovirus Meeting
  • 発表場所: 米国NY
• [学会発表] Identification of host cellular machinery for HIV-1 Gag trafficking (2006)
  • 著者名/発表者名: N. Tsurutani, T. Goto, I. S. Ohno, & Y. Morikawa
  • 学会等名: ASCB Meeting
  • 発表場所: 米国AL
• [学会発表] Stimulation of influenza virus RNA synthesis by a host factor RAF-2 that is bound to viral nucleoprotein and the genome RNA. (2006)
  • 著者名/発表者名: F. Momose, A. Kawaguchi, A. Iwamatsu, Y. Morikawa & K. Nagata
  • 学会等名: 第13回ICNSV
  • 発表場所: スペイン
• [学会発表] HIV 非ミリストイル化Gag 蛋白によるドミナントネガティブな粒子形成出芽の阻害機構 (2006)
  • 著者名/発表者名: 森川裕子、後藤俊幸
  • 学会等名: 第54回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] HIV Gag蛋白の細胞内輸送及び粒子形成における責任宿主因子の関与 (2006)
  • 著者名/発表者名: 鶴谷直美、百瀬文隆、森川裕子
  • 学会等名: 第54回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] 宿主因子RAF-2p36に依存したインフルエンザウイルスRNP の形成促進 (2006)
  • 著者名/発表者名: 百瀬文隆、川口敦史、森川裕子、永田恭介
  • 学会等名: 第54回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Dominant negative inhibition of HIV particle production by the nonmyristoylated form of Gag. (2006)
  • 著者名/発表者名: Y. Morikawa
  • 学会等名: 第20回日本エイズ学会
• [備考]
  • URL: http://www.kitasato-u.ac.jp/lisci/labo/ViralInfection2/1/Fig.S1.pdf